Aptamer-ontwikkelingsplatform
Aptameren zijn enkelstrengs oligonucleotiden (DNA, RNA of XNA) met de eigenschap van hoge affiniteit en hoge specificiteit die zich specifiek binden aan doelmoleculen zoals antilichamen. Ze worden veelvuldig gebruikt voor de ontwikkeling van biosensoren, diagnose en therapie.
Het aptamerplatform dat Alpha Lifetech levert, omvat twee categorieën: het aptamersyntheseplatform, dat voornamelijk bestaat uit de SELEX-aptamerbibliotheeksyntheseservice en aptamerontwikkelingsservice (DNA, RNA of XNA), en het aptamerscreeningplatform, inclusief screeningservices op basis van SELEX-technologie voor eiwitten, peptiden, cellen, kleine moleculen, metaalionen en andere doelmoleculen, evenals downstream aptameroptimalisatie en identificatieanalyseservices.
Aptamer-syntheseplatform
SELEX aptamer bibliotheek synthese service
De SELEX aptamer bibliotheek synthese service houdt zich voornamelijk bezig met het construeren van een bibliotheek die een groot aantal willekeurige enkelstrengs oligonucleotide sequenties bevat door in vitro chemische synthese volgens de doelmoleculen. Bibliotheekconstructie is het startpunt van SELEX technologie, die overvloedige kandidaatsequenties voor het daaropvolgende screeningproces levert door het construeren van enorme willekeurige bibliotheken en de mogelijkheid vergroot om aptameren met hoge affiniteit te screenen.
De bibliotheeksynthese wordt hoofdzakelijk onderverdeeld in de volgende stappen:
Stappen | Technologiedetails |
---|---|
Identificeer doelmoleculen | Identificeer de doelmoleculen die gescreend moeten worden op aptameren. Dit kunnen eiwitten, nucleïnezuren, kleine moleculen, metaalionen, etc. zijn. |
Willekeurig sequentieontwerp | Willekeurige sequentielengte, basensamenstelling en andere parameters werden ontworpen volgens de kenmerken van doelmoleculen en screeningvereisten. Meestal zijn willekeurige sequenties tussen tientallen en honderden basen lang. |
Synthese van vaste sequenties | Er worden oligonucleotidefragmenten met vaste sequenties (zoals PCR-primersequenties) aan beide uiteinden ontworpen en gesynthetiseerd. Deze fragmenten worden gebruikt in het daaropvolgende amplificatie- en screeningproces. |
De gesynthetiseerde bibliotheek moet nog verder worden verwerkt voor kwaliteitscontrole. De concentratie van de bibliotheek werd bepaald om de toepasbaarheid ervan in het daaropvolgende screeningproces te garanderen. De diversiteit en nauwkeurigheid van willekeurige sequenties in de bibliotheek werden geverifieerd door sequencing en andere methoden om te garanderen dat de kwaliteit van de bibliotheek voldeed aan de screeningvereisten.
Via bovenstaande stappen kan een hoogwaardige en zeer diverse SELEX-aptameerbibliotheek worden gesynthetiseerd, die een overvloed aan kandidaatsequenties kan opleveren voor het daaropvolgende screeningproces.
Aptamer-ontwikkelingsdiensten (DNA, RNA of XNA)
Aptameren verwijzen doorgaans naar nucleïnezuuraptameren. Nucleïnezuuraptameren omvatten DNA-aptameren, RNA-aptameren en XNA-aptameren, wat chemisch gemodificeerde nucleïnezuuraptameren zijn. De SELEX-techniek wordt veel gebruikt voor de ontwikkeling van aptameren. De basisworkflow van aptamerontwikkelingsservices omvat bibliotheekconstructie, targetbinding, isolatie en zuivering, amplificatie, meerdere screeningsrondes en sequentie-identificatie. Al vele jaren richten we ons op bibliotheekconstructie en hebben we veel ervaring in aptamerontwikkeling. We streven ernaar om klanten betere services te bieden.
SELEX Technologie Proces
Het SELEX-proces bestaat uit meerdere ronden, die elk uit de volgende belangrijke stappen bestaan:
Bibliotheek en doelbinding
De opgebouwde nucleïnezuurbibliotheek wordt gemengd met specifieke doelmoleculen (zoals eiwitten, kleine moleculaire verbindingen, etc.), zodat de nucleïnezuursequenties in de bibliotheek de kans krijgen om zich aan de doelmoleculen te binden.
Isolatie van ongebonden moleculen
Nucleïnezuursequenties die niet aan het doelmolecuul gebonden zijn, worden uit het mengsel gescheiden met behulp van specifieke methoden, zoals affiniteitschromatografie, magnetische kralenscheiding, enz.
Amplificatie van bindende moleculen
De nucleïnezuursequentie die aan een doelmolecuul is gebonden, wordt geamplificeerd, meestal met behulp van polymerasekettingreactie (PCR)-technologie. Voor de daaropvolgende screeningfase worden de geamplificeerde sequenties gebruikt als de startbibliotheek.

Figuur 1: SELEX-screeningproces
Aptamer-screeningplatform
Aptamer-screeningservice
Alpha Lifetech biedt een breed scala aan gespecialiseerde aptamer-screeningdiensten waarbij verschillende SELEX-methodologieën worden toegepast voor verschillende soorten van uw moleculen:
Doeltypen | Technische details |
---|---|
Proteïne-aptamerscreening door SELEX | Het hoofddoel van eiwit-aptamer-screening is het screenen van aptameren die specifiek kunnen binden aan doeleiwitmoleculen. Deze aptameren zijn eenvoudiger te synthetiseren, stabieler en minder gevoelig voor omgevingsfactoren. |
Peptide-aptamerscreening door SELEX | Peptide-aptameren zijn een klasse van korte peptidesequenties met hoge specificiteit en affiniteit, die specifiek kunnen binden aan doelstoffen en een breed scala aan toepassingspotentieel in het biomedische veld vertonen. Via een specifiek screeningproces worden peptide-aptameren die specifiek kunnen binden aan doelmoleculen gescreend uit een groot aantal willekeurige peptidesequentiebibliotheken. |
Celspecifieke Aptamer Screening (Cell-SELEX) | Doelcellen of specifieke moleculen op het celoppervlak worden voorbereid als doelen. Doelen kunnen hele cellen, receptoren op het celmembraan, eiwitten of andere kleine moleculen zijn. |
Screening van kleine moleculaire aptameren door middel van Capture SELEX | Capture SELEX is een in vitro screeningtechniek voor de screening van kleine molecuul-aptameren, een variant van SELEX. Capture SELEX is met name geschikt voor aptamerscreening van kleine molecuuldoelen, die doorgaans minder functionele groepen hebben en moeilijk direct op vaste-fasedragers te immobiliseren zijn. |
SELEX-diensten op basis van levende dieren | Live animal-based screening service is een experimentele techniek die veel wordt gebruikt in de biowetenschappen, geneeskunde en biotechnologie, waarbij levende dieren worden gebruikt als experimentele modellen om specifieke moleculen, medicijnen, therapeutische middelen of biologische processen te screenen en evalueren. De services zijn ontworpen om de fysiologische omgeving in het menselijk lichaam te simuleren om de werkzaamheid en veiligheid van experimentele resultaten in het menselijk lichaam nauwkeuriger te voorspellen en evalueren. |
Aptamer-optimalisatieservice
De hydrofiliteit, het hoge affiniteitsverlies tijdens de productie en de snelle uitscheiding van aptameren beperken hun toepassing. Momenteel zijn er verschillende optimalisatiemethoden onderzocht om de prestaties van aptameren te verbeteren.
We hebben ook verschillende manieren om aptameer te optimaliseren, bestaande uit afknotting, modificaties en conjugatie aan de juiste groep (thiol, carboxy, amine, fluorofoor, enz.).
Aptamer karakteriseringsanalyse service
Aptamer karakteriseringsanalyse service verwijst naar de professionele service van prestatie-evaluatie structuurresolutie en functionele verificatie van de verkregen aptamer om ervoor te zorgen dat de aptamer voldoet aan de specifieke bindingsvermogen, stabiliteit en specificiteitsvereisten. Het omvat voornamelijk affiniteits- en specificiteitsanalyse, stabiliteitsevaluatie en biologische functieverificatie.
Als u vragen heeft, kunt u altijd contact met ons opnemen.
Leave Your Message
0102