Платформа розробки Aptamer
Аптамери являють собою одноланцюгові олігонуклеотиди (ДНК, РНК або XNA) з властивостями високої спорідненості та високої специфічності, які специфічно зв’язуються з цільовими молекулами, такими як антитіла, і вони широко використовуються для розробки біосенсорів, діагностики та терапії.
Платформа аптамерів, надана компанією Alpha Lifetech, включає дві категорії: платформу синтезу аптамерів, яка в основному включає службу синтезу бібліотеки аптамерів SELEX і послугу розробки аптамерів (ДНК, РНК або XNA), а також платформу скринінгу аптамерів, включаючи послуги скринінгу на основі технології SELEX для білків, пептидів, клітин, малих молекул, іонів металів та інших цільових молекул, а також послуги оптимізації та аналізу ідентифікації аптамерів.
Платформа синтезу аптамерів
Служба синтезу бібліотеки аптамерів SELEX
Служба синтезу бібліотеки аптамерів SELEX головним чином передбачає створення бібліотеки, що містить велику кількість випадкових одноланцюгових олігонуклеотидних послідовностей, шляхом хімічного синтезу in vitro відповідно до цільових молекул. Побудова бібліотеки є відправною точкою технології SELEX, яка забезпечує велику кількість послідовностей-кандидатів для подальшого процесу скринінгу шляхом створення величезних випадкових бібліотек і збільшує можливість скринінгу високоафінних аптамерів.
Синтез бібліотеки в основному поділяється на такі етапи:
Кроки | Деталі технології |
---|---|
Визначте цільові молекули | Визначте цільові молекули, які необхідно перевірити на аптамери, якими можуть бути білки, нуклеїнові кислоти, малі молекули, іони металів тощо. |
Дизайн випадкової послідовності | Випадкова довжина послідовності, основний склад та інші параметри були розроблені відповідно до характеристик цільових молекул і вимог скринінгу. Як правило, випадкові послідовності мають довжину від десятків до сотень основ. |
Синтез фіксованих послідовностей | Розробляються та синтезуються олігонуклеотидні фрагменти з фіксованими послідовностями (такими як послідовності праймерів ПЛР) на обох кінцях, які будуть використані в подальшому процесі ампліфікації та скринінгу. |
Синтезована бібліотека ще потребує подальшої обробки для контролю якості. Концентрація бібліотеки була визначена для забезпечення її застосовності в подальшому процесі скринінгу. Різноманітність і точність випадкових послідовностей у бібліотеці були перевірені секвенуванням та іншими методами, щоб переконатися, що якість бібліотеки відповідає вимогам скринінгу.
За допомогою вищезазначених етапів можна синтезувати високоякісну та дуже різноманітну бібліотеку аптамерів SELEX, яка може забезпечити велику кількість послідовностей-кандидатів для подальшого процесу скринінгу.
Послуги з розробки аптамерів (ДНК, РНК або XNA)
Аптамери зазвичай відносяться до аптамерів нуклеїнових кислот. Аптамери нуклеїнових кислот включають аптамери ДНК, аптамери РНК і аптамери XNA, які є хімічно модифікованими аптамерами нуклеїнових кислот. Техніка SELEX широко використовується для розробки аптамерів. Основний робочий процес послуг із розробки аптамерів включає створення бібліотеки, зв’язування мішені, виділення та очищення, ампліфікацію, кілька раундів скринінгу та ідентифікацію послідовності. Протягом багатьох років ми зосереджені на будівництві бібліотек і маємо багатий досвід розробки аптамерів. Ми прагнемо надавати клієнтам кращі послуги.
Технологічний процес SELEX
Процес SELEX складається з кількох раундів, кожен із яких складається з таких ключових кроків:
Бібліотека та цільове прив’язування
Сконструйована бібліотека нуклеїнових кислот змішується зі специфічними молекулами-мішенями (такими як білки, маломолекулярні сполуки тощо), так що послідовності нуклеїнових кислот у бібліотеці мають можливість зв’язуватися з молекулами-мішенями.
Виділення незв'язаних молекул
Послідовності нуклеїнових кислот, які не зв’язані з цільовою молекулою, відокремлюються від суміші за допомогою спеціальних методів, таких як афінна хроматографія, розділення магнітних кульок тощо.
Ампліфікація зв'язуючих молекул
Послідовність нуклеїнової кислоти, зв’язана з цільовою молекулою, ампліфікується, як правило, за допомогою технології полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Для наступної фази скринінгу ампліфіковані послідовності будуть використані як вихідна бібліотека.

Малюнок 1: Процес скринінгу SELEX
Платформа скринінгу Aptamer
Служба скринінгу аптамерів
Alpha Lifetech пропонує різноманітні спеціалізовані послуги скринінгу аптамерів із застосуванням різних методологій SELEX для різних типів ваших молекул:
Типи цілей | Технічні деталі |
---|---|
Скринінг протеїнових аптамерів SELEX | Основною метою скринінгу білкових аптамерів є скринінг аптамерів, які можуть специфічно зв’язуватися з білковими молекулами-мішенями. Ці аптамери простіше синтезувати, більш стабільні та менш чутливі до факторів навколишнього середовища. |
Скринінг пептидних аптамерів SELEX | Пептидні аптамери являють собою клас коротких пептидних послідовностей з високою специфічністю та афінністю, які можуть специфічно зв’язуватися з цільовими речовинами та демонструють широкий спектр потенціалу застосування в біомедичній галузі. За допомогою спеціального процесу скринінгу пептидні аптамери, які можуть специфічно зв’язуватися з цільовими молекулами, відбираються з великої кількості бібліотек випадкових пептидних послідовностей. |
Скринінг клітинно-специфічного аптамера (Cell-SELEX) | В якості мішеней готують клітини-мішені або специфічні молекули на поверхні клітини. Мішенями можуть бути цілі клітини, рецептори на клітинній мембрані, білки або інші малі молекули. |
Скринінг малих молекул аптамерів Capture SELEX | Capture SELEX — це метод скринінгу in vitro для скринінгу малих молекул аптамерів, який є варіантом SELEX. Capture SELEX особливо добре підходить для скринінгу аптамерів малих молекулярних мішеней, які зазвичай мають менше функціональних груп і їх важко іммобілізувати безпосередньо на твердофазних носіях. |
Послуги SELEX для живих тварин | Служба скринінгу на живих тваринах — це експериментальна техніка, яка широко використовується в галузі біологічних наук, медицини та біотехнології, яка використовує живих тварин як експериментальні моделі для скринінгу та оцінки конкретних молекул, ліків, терапевтичних засобів або біологічних процесів. Послуги призначені для моделювання фізіологічного середовища в організмі людини для більш точного прогнозування та оцінки ефективності та безпеки результатів експериментів в організмі людини. |
Сервіс оптимізації Aptamer
Гідрофільність, висока втрата афінності під час виробництва та швидке виведення аптамерів обмежують їх застосування. На даний момент досліджено різноманітні методи оптимізації для підвищення ефективності аптамерів.
У нас також є різноманітні способи оптимізації аптамеру, що складаються з усікання, модифікації, кон’югації з відповідною групою (тіол, карбокси, амін, флуорофор тощо).
Служба аналізу характеристик аптамерів
Послуга аналізу характеристик аптамерів відноситься до професійних послуг із визначення структури оцінки продуктивності та функціональної перевірки отриманого аптамеру, щоб переконатися, що аптамер відповідає вимогам специфічної здатності до зв’язування, стабільності та специфічності. Це в основному включає аналіз спорідненості та специфічності, оцінку стабільності та перевірку біологічної функції.
Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами в будь-який час.
Leave Your Message
0102