Aptamer Ontwikkelingsplatform

Aptamere is enkelstrengige oligonukleotied (DNA, RNA of XNA) met die eienskap van hoë affiniteit en hoë spesifisiteit wat spesifiek aan teikenmolekules soos teenliggaampies bind, en hulle word wyd gebruik vir die ontwikkeling van biosensors, diagnose en terapeutiese middels.

Die aptamer-platform wat deur Alpha Lifetech verskaf word, sluit twee kategorieë in: aptamer-sinteseplatform, wat hoofsaaklik SELEX aptamer-biblioteeksintesediens en aptamer (DNA, RNA of XNA) ontwikkelingsdiens behels, en aptamer-siftingsplatform insluitend siftingsdienste gebaseer op SELEX-tegnologie vir proteïene, peptiede, selle, klein molekules en ander teikenstroom-, molekule- en teikenpeptiede, optimalisering en identifikasie analise dienste.

Aptamer Sintese Platform

SELEX aptamer biblioteek sintese diens

SELEX aptamer biblioteek sintesediens behels hoofsaaklik die opbou van 'n biblioteek wat 'n groot aantal ewekansige enkelstrengige oligonukleotiedvolgordes bevat deur in vitro chemiese sintese volgens die teikenmolekulêre. Biblioteekkonstruksie is die beginpunt van SELEX-tegnologie, wat oorvloedige kandidaatreekse vir die daaropvolgende siftingsproses verskaf deur groot ewekansige biblioteke te bou en die moontlikheid verhoog om hoë-affiniteit aptamers te sift.

Biblioteeksintese word hoofsaaklik in die volgende stappe verdeel:

Trappe	Tegnologie Besonderhede
Identifiseer teikenmolekules	Identifiseer die teikenmolekules wat vir aptamere gekeur moet word, wat proteïene, nukleïensure, klein molekulêre, metaalione, ens.
Ewekansige reeksontwerp	Willekeurige volgordelengte, basissamestelling en ander parameters is ontwerp volgens die eienskappe van teikenmolekules en siftingsvereistes. Tipies is ewekansige rye tussen tiene en honderde basisse lank.
Sintese van vaste rye	Oligonukleotiedfragmente met vaste volgordes (soos PCR-primervolgordes) aan beide kante word ontwerp en gesintetiseer, wat in die daaropvolgende amplifikasie- en siftingsproses gebruik sal word.

Die gesintetiseerde biblioteek moet nog verder verwerk word vir kwaliteitbeheer. Die konsentrasie van die biblioteek is bepaal om die toepaslikheid daarvan in die daaropvolgende siftingsproses te verseker. Die diversiteit en akkuraatheid van ewekansige volgordes in die biblioteek is geverifieer deur volgordebepaling en ander metodes om te verseker dat die kwaliteit van die biblioteek aan die siftingsvereistes voldoen.

Deur die bogenoemde stappe kan 'n hoë-gehalte en hoogs diverse SELEX aptamer biblioteek gesintetiseer word, wat oorvloedige kandidaatreekse vir die daaropvolgende siftingsproses kan verskaf.

Aptamer-ontwikkelingsdienste (DNA, RNA of XNA)

Aptamere verwys gewoonlik na nukleïensuuraptamere. Nukleïensuur aptamers sluit DNA aptamers, RNA aptamers en XNA aptamers in wat chemies gemodifiseerde nukleïensuur aptamers is. Die SELEX-tegniek word wyd gebruik vir die ontwikkeling van aptamers. Die basiese werkvloei van aptamer-ontwikkelingsdienste sluit in biblioteekkonstruksie, teikenbinding, isolasie en suiwering, amplifikasie, veelvuldige rondtes van sifting en volgorde-identifikasie. Vir baie jare het ons gefokus op biblioteekkonstruksie en ryk ervaring in aptamer-ontwikkeling. Ons is daartoe verbind om beter dienste aan kliënte te bied.

SELEX Tegnologie Proses

Die SELEX-proses bestaan uit verskeie rondtes, wat elk uit die volgende sleutelstappe bestaan:

Biblioteek- en Teikenbinding

Die gekonstrueerde nukleïensuurbiblioteek word gemeng met spesifieke teikenmolekules (soos proteïene, kleinmolekuleverbindings, ens.), sodat die nukleïensuurvolgorde in die biblioteek die geleentheid het om aan die teikenmolekules te bind.

Isolasie van ongebonde molekules

Nukleïensuurvolgordes wat nie aan die teikenmolekule gebind is nie, word van die mengsel geskei deur spesifieke metodes soos affiniteitschromatografie, magnetiese kraalskeiding, ens.

Amplifikasie van bindende molekules

Die nukleïensuurvolgorde wat aan 'n teikenmolekule gebind is, word geamplifiseer, gewoonlik deur gebruik te maak van polimerase kettingreaksie (PCR) tegnologie. Vir die daaropvolgende siftingsfase sal die geamplifiseerde reekse as die beginbiblioteek gebruik word.

Fig 1: SELEX siftingsproses

Aptamer Siftingsplatform

Aptamer siftingsdiens

Alpha Lifetech bied 'n uiteenlopende reeks gespesialiseerde aptamer-siftingsdienste wat verskeie SELEX-metodologieë toepas vir verskillende tipes van jou molekules:

Teikentipes	Tegniese Besonderhede
Proteïen Aptamer Sifting deur SELEX	Die hoofdoel van proteïenaptamer-sifting is om aptamers te sift wat spesifiek aan teikenproteïenmolekules kan bind. Hierdie aptamere is makliker om te sintetiseer, meer stabiel en minder vatbaar vir omgewingsfaktore.
Peptied Aptamer Sifting deur SELEX	Peptiedaptamere is 'n klas kort peptiedvolgordes met hoë spesifisiteit en affiniteit, wat spesifiek aan teikenstowwe kan bind en 'n wye reeks toepassingspotensiaal in die biomediese veld toon. Deur 'n spesifieke siftingsproses word peptiedaptamere wat spesifiek aan teikenmolekules kan bind, uit 'n groot aantal ewekansige peptiedvolgordebiblioteke gekeur.
Selspesifieke Aptameer-sifting (Sel-SELEX)	Teikenselle of spesifieke molekules op die seloppervlak word as teikens voorberei. Teikens kan heel selle, reseptore op die selmembraan, proteïene of ander klein molekules wees.
Klein Molekule Aptamer Sifting deur Capture SELEX	Capture SELEX is 'n in vitro siftingstegniek vir die sifting van klein molekule aptamere, wat 'n variant van SELEX is. Capture SELEX is veral geskik vir aptamer-sifting van klein molekule-teikens, wat tipies minder funksionele groepe het en moeilik is om direk op vastefase-ondersteuners te immobiliseer.
Live Animal-gebaseerde SELEX dienste	Lewende diere-gebaseerde siftingsdiens is 'n eksperimentele tegniek wat wyd gebruik word in die velde van biowetenskap, medisyne en biotegnologie, wat lewende diere as eksperimentele modelle gebruik om spesifieke molekules, geneeskundige, terapeutiese of biologiese prosesse te sift en te evalueer. Die dienste is ontwerp om die fisiologiese omgewing in die menslike liggaam te simuleer om die doeltreffendheid en veiligheid van eksperimentele resultate in die menslike liggaam meer akkuraat te voorspel en te evalueer.

Aptamer-optimeringsdiens

Die hidrofilisiteit, hoë affiniteitsverlies tydens produksie en vinnige uitskeiding van aptamere beperk hul toediening. Tans is 'n verskeidenheid optimaliseringsmetodes ondersoek om die werkverrigting van aptamers te verbeter.

Ons het ook 'n verskeidenheid maniere om aptamer te optimaliseer wat bestaan uit afkapping, modifikasies, vervoeging aan die toepaslike groep (tiol, karboksie, amien, fluorofoor, ens.).

Aptamer karakterisering analise diens

Aptameer karakterisering analise diens verwys na die professionele diens van prestasie evaluering struktuur resolusie en funksionele verifikasie van die verkry aptamer om te verseker dat die aptamer voldoen aan die spesifieke bindingsvermoë, stabiliteit en spesifisiteit vereistes. Dit sluit hoofsaaklik affiniteit- en spesifisiteitsanalise, stabiliteitsevaluering en biologiese funksieverifikasie in.