Aptamer-ontwikkelingsplatform

Aptamere is enkelstrengige oligonukleotiede (DNA, RNA of XNA) met die eienskap van hoë affiniteit en hoë spesifisiteit wat spesifiek aan teikenmolekules soos teenliggaampies bind, en hulle word wyd gebruik vir die ontwikkeling van biosensors, diagnose en terapeutiese middels.

Die aptameerplatform wat deur Alpha Lifetech verskaf word, sluit twee kategorieë in: aptameer-sinteseplatform, wat hoofsaaklik SELEX aptameer-biblioteeksintesediens en aptameer (DNA, RNA of XNA) ontwikkelingsdiens behels, en aptameer-siftingsplatform, insluitend siftingsdienste gebaseer op SELEX-tegnologie vir proteïene, peptiede, selle, klein molekules, metaalione en ander teikenmolekules, sowel as stroomaf aptameer-optimering en identifikasie-analisedienste.

Aptamer Sintese Platform

SELEX aptamer biblioteek sintese diens

SELEX aptameerbiblioteeksintesediens behels hoofsaaklik die konstruksie van 'n biblioteek wat 'n groot aantal ewekansige enkelstrengige oligonukleotiedvolgordes bevat deur in vitro chemiese sintese volgens die teikenmolekules. Biblioteekkonstruksie is die beginpunt van SELEX-tegnologie, wat oorvloedige kandidaatvolgordes vir die daaropvolgende siftingsproses verskaf deur enorme ewekansige biblioteke te bou en die moontlikheid van sifting van hoë-affiniteit aptamere verhoog.

Biblioteeksintese word hoofsaaklik in die volgende stappe verdeel:

Stappe	Tegnologiebesonderhede
Identifiseer Teikenmolekules	Identifiseer die teikenmolekules wat vir aptamere gekeur moet word, wat proteïene, nukleïensure, klein molekulêre, metaalione, ens. kan wees.
Willekeurige Volgorde Ontwerp	Willekeurige volgordelengte, basissamestelling en ander parameters is ontwerp volgens die eienskappe van teikenmolekules en siftingsvereistes. Tipies is willekeurige volgordes tussen tiene en honderde basisse lank.
Sintese van Vaste Rye	Oligonukleotiedfragmente met vaste volgordes (soos PCR-primervolgordes) aan beide kante word ontwerp en gesintetiseer, wat in die daaropvolgende amplifikasie- en siftingsproses gebruik sal word.

Die gesintetiseerde biblioteek moet nog verder verwerk word vir kwaliteitsbeheer. Die konsentrasie van die biblioteek is bepaal om die toepaslikheid daarvan in die daaropvolgende siftingsproses te verseker. Die diversiteit en akkuraatheid van ewekansige rye in die biblioteek is geverifieer deur volgordebepaling en ander metodes om te verseker dat die kwaliteit van die biblioteek aan die siftingsvereistes voldoen.

Deur die bogenoemde stappe kan 'n hoëgehalte- en hoogs diverse SELEX-aptameerbiblioteek gesintetiseer word, wat oorvloedige kandidaatsekwensies vir die daaropvolgende siftingsproses kan verskaf.

Aptamer-ontwikkelingsdienste (DNA, RNA of XNA)

Aptamere verwys gewoonlik na nukleïensuur-aptamere. Nukleïensuur-aptamere sluit DNA-aptamere, RNA-aptamere en XNA-aptamere in, wat chemies gemodifiseerde nukleïensuur-aptamere is. Die SELEX-tegniek word wyd gebruik vir die ontwikkeling van aptamere. Die basiese werkvloei van aptamer-ontwikkelingsdienste sluit in biblioteekkonstruksie, teikenbinding, isolasie en suiwering, amplifikasie, veelvuldige rondes sifting en volgorde-identifikasie. Ons fokus al jare lank op biblioteekkonstruksie en het ryk ervaring in aptamer-ontwikkeling. Ons is daartoe verbind om kliënte van beter dienste te voorsien.

SELEX Tegnologie Proses

Die SELEX-proses bestaan uit verskeie rondes, wat elk uit die volgende sleutelstappe bestaan:

Biblioteek- en Teikenbinding

Die gekonstrueerde nukleïensuurbiblioteek word gemeng met spesifieke teikenmolekules (soos proteïene, kleinmolekuleverbindings, ens.), sodat die nukleïensuurvolgordes in die biblioteek die geleentheid het om aan die teikenmolekules te bind.

Isolasie van Ongebonde Molekules

Nukleïensuurreekse wat nie aan die teikenmolekule gebind is nie, word van die mengsel geskei deur spesifieke metodes soos affiniteitschromatografie, magnetiese kraalskeiding, ens.

Versterking van Bindende Molekules

Die nukleïensuurvolgorde wat aan 'n teikenmolekule gebind is, word geamplifiseer, gewoonlik met behulp van polimerase-kettingreaksie (PCR)-tegnologie. Vir die daaropvolgende siftingsfase sal die geamplifiseerde volgordes as die beginbiblioteek gebruik word.

Fig 1: SELEX-siftingsproses

Aptamer-siftingsplatform

Aptamer-siftingsdiens

Alpha Lifetech bied 'n diverse reeks gespesialiseerde aptamer-siftingsdienste wat verskeie SELEX-metodologieë vir verskillende tipes van u molekules toepas:

Teikentipes	Tegniese Besonderhede
Proteïen Aptamer Sifting deur SELEX	Die hoofdoel van proteïen-aptameer-sifting is om aptamere te sif wat spesifiek aan teikenproteïenmolekules kan bind. Hierdie aptamere is makliker om te sintetiseer, meer stabiel en minder vatbaar vir omgewingsfaktore.
Peptied Aptamer Sifting deur SELEX	Peptied-aptamere is 'n klas kort peptiedvolgordes met hoë spesifisiteit en affiniteit, wat spesifiek aan teikenstowwe kan bind en 'n wye reeks toepassingspotensiaal in die biomediese veld toon. Deur 'n spesifieke siftingsproses word peptied-aptamere wat spesifiek aan teikenmolekules kan bind, gekeur uit 'n groot aantal ewekansige peptiedvolgordebiblioteke.
Selspesifieke Aptameer-sifting (Cell-SELEX)	Teikenselle of spesifieke molekules op die seloppervlak word as teikens voorberei. Teikens kan hele selle, reseptore op die selmembraan, proteïene of ander klein molekules wees.
Kleinmolekule-aptameer-sifting deur Capture SELEX	Vang SELEX is 'n in vitro siftingstegniek vir die sifting van kleinmolekule-aptamere, wat 'n variant van SELEX is. Vang SELEX is veral geskik vir aptamer-sifting van kleinmolekule-teikens, wat tipies minder funksionele groepe het en moeilik is om direk op vastefase-ondersteunings te immobiliseer.
SELEX-dienste gebaseer op lewende diere	Lewende diere-gebaseerde siftingsdiens is 'n eksperimentele tegniek wat wyd gebruik word in die velde van biowetenskap, medisyne en biotegnologie, wat lewende diere as eksperimentele modelle gebruik om spesifieke molekules, medisyne, terapeutiese middels of biologiese prosesse te sif en te evalueer. Die dienste is ontwerp om die fisiologiese omgewing in die menslike liggaam te simuleer om die doeltreffendheid en veiligheid van eksperimentele resultate in die menslike liggaam meer akkuraat te voorspel en te evalueer.

Aptamer-optimaliseringsdiens

Die hidrofilisiteit, hoë affiniteitsverlies tydens produksie, en vinnige uitskeiding van aptamere beperk hul toepassing. Tans is 'n verskeidenheid optimeringsmetodes ondersoek om die werkverrigting van aptamere te verbeter.

Ons het ook 'n verskeidenheid maniere om aptameer te optimaliseer, bestaande uit afkorting, modifikasies, konjugasie na die toepaslike groep (tiol, karboksi, amien, fluorofoor, ens.).

Aptamer karakterisering analise diens

Aptameer-karakteriseringsanalisediens verwys na die professionele diens van prestasie-evaluering, struktuurresolusie en funksionele verifikasie van die verkrygde aptameer om te verseker dat die aptameer aan die spesifieke bindingsvermoë, stabiliteits- en spesifisiteitsvereistes voldoen. Dit sluit hoofsaaklik affiniteits- en spesifisiteitsanalise, stabiliteitsevaluering en biologiese funksieverifikasie in.