In 1960 is die konsep van bispesifieke teenliggaampies voorgestel. Bispesifieke teenliggaampies, ook bekend as bispesifieke monoklonale teenliggaampies, is kunsmatig gesintetiseerde teenliggaampies met behulp van genetiese manipulasietegnologie. As 'n gemanipuleerde kunsmatige teenliggaam behoort bispesifieke teenliggaampies gewoonlik tot die IgG-subklas en bevat 'n antigeenbindingsfragment wat die CD3-subeenheid teiken. Bispesifieke teenliggaampies het twee spesifieke antigeenbindingsplekke wat gelyktydig twee verskillende antigene, of twee verskillende epitope van 'n antigeen, kan bind en herken. In vergelyking met monoklonale teenliggaampies het bispesifieke teenliggaampies 'n bykomende spesifieke antigeenbindingsplek, wat dus sterker spesifisiteit en teikenvermoë besit, wat tumorselle meer akkuraat kan teiken en toksisiteit buite die teiken kan verminder. Bispesifieke teenliggaampies kan gelyktydig verskeie biologiese funksies verrig, soos die werwing van immuunselle, die blokkering van seinweë en die direkte doodmaak van tumorselle. Vroeë bispesifieke teenliggaampies is hoofsaaklik voorberei deur chemiese konjugasie of selfusie, maar hierdie metode het moontlik stadig gevorder as gevolg van die ewekansige kombinasie en probleme met die isolering van die teikenkombinasie. Met die voortdurende ontwikkeling van genetiese manipulasietegnologie is baie nuwe tegnologieplatforms ontwikkel, soos knope in gate (KIH), CrossMab, DVD Ig, ens. Hierdie platforms los probleme soos swaarketting- en ligtekettingwanpassings effektief op en verbeter die eenvormigheid en opbrengs van bispesifieke teenliggaampies.

Die hoofmetodes vir bispesifieke teenliggaamproduksie sluit in chemiese koppeling, vierbron-hibridoma en genetiese manipulasie-teenliggaamvoorbereiding. Onder hulle koppel die chemiese koppelingsmetode twee intakte IgG- of twee F(ab')2-teenliggaamfragmente in bispesifieke teenliggaampies met behulp van chemiese koppelingsagente soos ftalimied en ditioasielbensoësuur. Hierdie metode is eenvoudig en maklik om te gebruik, maar dit kan die antigeenbindingsplek beskadig, teenliggaamaktiwiteit verminder, en die koppelingsmiddel self het ook 'n sekere mate van karsinogenisiteit. Die vierbron-hibridomametode is gebaseer op die samesmelting van somatiese selle van twee verskillende hibridoma-sellyne om die ooreenstemmende muis-IgG uit te druk. Deur genetiese manipulasietegnologie kan teenliggaampies geneties gemodifiseer word om bispesifieke teenliggaampies te vorm. Twee verskillende monoklonale teenliggaampies is gekonstrueer, en die Fab-fragmente of swaarketting- en ligtekettingveranderlike streke van die twee teenliggaampies is afsonderlik geklief. Deur kruisbindingsreaksie of kettingrekombinasietegnologie is die twee fragmente gekombineer om 'n bispesifieke teenliggaam te vorm. Alhoewel die kompleksiteit van genetiese manipulasietegnologie relatief hoog is, is dit tans die mees gebruikte metode vir bispesifieke teenliggaamproduksie om die struktuur en funksie van teenliggaampies aan te pas. Wanneer bispesifieke teenliggaamontwerp uitgevoer word, kan die beginsel van teenliggaamkruisreaktiwiteit gebruik word, maar teenliggaamkruisreaktiwiteit kan nie-spesifieke reaksies veroorsaak, daarom sal dit noukeurig oorweeg word in die praktiese toepassing van bispesifieke teenliggaamontwerp, soos bispesifieke teenliggaamterapie.

Bispesifieke teenliggaamsuiwering is die proses om hoë-suiwer teikenteenliggaampies te isoleer en te suiwer. Twee metodes, sentrifugering en diep filtrasie, word gebruik om sommige oplosbare onsuiwerhede te verwyder. Die teiken bispesifieke teenliggaam word aanvanklik deur affiniteitschromatografie vasgelê. Vir IgG-agtige bispesifieke teenliggaampies word proteïen A-affiniteitschromatografie gebruik, terwyl vir nie-IgG-agtige bispesifieke teenliggaampies ligte ketting-gebaseerde affiniteitschromatografie gebruik kan word. Daarna word die teenliggaam vir 'n sekere tydperk onder lae pH-toestande geïnkubeer, wat veroorsaak dat die proteïenstruktuur op die oppervlak van die virusomhulsel ontwrig word en sodoende die vermoë om selle te infekteer, verloor. Intermediêre diep filtrasie word uitgevoer om onsuiwerhede soos gasheerselproteïene (HCP) verder te verwyder. Die suiwerheid van teenliggaampies word verbeter deur metodes soos ioonuitruilingschromatografie, en enige oorblywende virusse word verwyder deur nanofiltrasie- of ultrafiltrasietegnieke. Laastens word die monster gekonsentreer en vervang met 'n geskikte formuleringsbuffer.