scFv-teenliggaamontdekkingsdiens

Alpha Lifetech Inc.is trots om omvattende SCFV-biblioteekkonstruksiedienste aan te bied om aan die uiteenlopende behoeftes van wêreldwye wetenskaplikes te voldoen. Ons doel is om die eise van verskillende kliënte te verstaan ​​en te bevredig en om te help met enige opkomende en ontluikende probleme in navorsingswerk.

Wat is scFv - Enkelketting Veranderlike Fragment Teenliggaam?

'n Enkelketting-teenliggaam bestaan ​​uit 'n teenliggaam-veranderlike ligte (VL) en swaar (VH) fragment wat verbind word deur 'n buigsame peptiedskakelaar, wat maklik in 'n funksionele vorm op die oppervlak van 'n faag uitgedruk kan word en daarom algemeen bekend staan ​​as 'n enkelketting-veranderlike fragment (scFv). 'n scFv-fragment is die kleinste eenheid van immunoglobulienmolekule (behalwe nanobodies) met 'n funksie in antigeen-bindende aktiwiteite en laat proteïeningenieurswese toe om die eienskappe van scFv (enkelkettingfragment-veranderlike) te verbeter, soos toename in affiniteit en verandering van spesifisiteit. In Alpha Lifetech Inc. is scFv-teenliggaampies hoofsaaklik gekonstrueer uit hibridoma, miltselle van geïmmuniseerde muise en B-limfosiete van mense. Totale RNA of mRNA word eers geïsoleer uit hibridoma, milt, limfselle en beenmurgselle, gevolg deur omgekeerd getranskribeer in cDNA om as 'n templaat vir teenliggaamgeenamplifikasie (PCR) te dien.

scFv-teenliggaamontwikkeling-faagvertoningstegnologie

Die diversiteit van 'n biblioteek word bepaal deur die aantal onafhanklike klone. Om 'n groot scFv-teenliggaambiblioteek te produseer, sal ons wetenskaplikes ons eie tweestapstrategie vir biblioteekgenerering gebruik. In die eerste stap van die beskrewe prosedure word primêre repertoires voorberei uit PCR-produkte wat die VH-, Vκ- en Vλ-domeine kodeer, wat tipiese mediumgrootte biblioteke (1 - 100 miljoen klone) lewer. In die tweede stap word VH- (of VL-) fragmente geïsoleer deur vertering van plasmied-DNS wat gesuiwer is uit die primêre repertoires en gekloon in die akseptorfagemiedvektor wat die VL- (of VH-) repertoires bevat. Hierdie innovasie verhoog die grootte van die biblioteke dramaties (10¹⁰-10¹²klone).

Grootskaalse en hoë deurset-sifting van scFv-teenliggaampies

Vir grootskaalse voorbereiding van scFv is dit duidelik dat die keuse van ekspressiegasheer 'n beduidende impak op prosesontwerp, stroomaf verwerkingsstrategieë en proseskoste sal hê. Die keuse van vervaardigingsroete sal afhang van die relevansie van post-translasionele modifikasie en tydlyn vir kliniese ontwikkeling en ekonomie, wat ook in wese afhanklik is van die 'gasheerstelsel'. Daar is geen universele ekspressiestelsel wat hoë produkekspressievlakke vir 'n wye reeks verskillende teenliggaampies of selfs proteïene verseker nie.