አንቲቦዲ ኢንጂነሪንግ ምንድን ነው?

በፀረ-ሰው ኢንጂነሪንግ እገዛ ሞለኪውላዊ መጠንን፣ ፋርማኮኪኒቲክስ፣ ኢሚውኖጂኒቲቲ፣ አስገዳጅ ትስስር፣ ፀረ እንግዳ አካላትን ልዩነት እና የውጤት ተግባር ማሻሻል ተችሏል። ፀረ እንግዳ አካላትን ከተዋሃዱ በኋላ፣ ፀረ እንግዳ አካላት ልዩ ትስስር በክሊኒካዊ ምርመራ እና ህክምና ውስጥ ከፍተኛ ዋጋ ያደርጋቸዋል። በፀረ-ሰው ኢንጂነሪንግ አማካኝነት የመድሃኒት እና የመመርመሪያ ቅድመ እድገት ፍላጎቶችን ማሟላት ይችላሉ.

የፀረ-ሰው ኢንጂነሪንግ ዓላማ የተፈጥሮ ፀረ እንግዳ አካላት ሊያሳካቸው የማይችሏቸውን በጣም ልዩ የሆኑ የተረጋጋ ተግባራትን መቅረጽ እና ማምረት ሲሆን ይህም ለህክምና ፀረ እንግዳ አካላት መፈጠር መሰረት በመጣል ነው።

በፀረ-ሰው ኢንጂነሪንግ ሰፊ የፕሮጀክት ልምድ ያለው አልፋ ላይፍቴክ ለብዙ ዝርያዎች ብጁ ሞኖክሎናል እና ፖሊክሎናል ፀረ እንግዳ አካላት አገልግሎቶችን እንዲሁም የፋጅ ማሳያ አንቲቦዲ ቤተመፃህፍት ግንባታ እና የማጣሪያ አገልግሎቶችን መስጠት ይችላል። አልፋ ላይፍቴክ ቀልጣፋ፣ ልዩ እና የተረጋጋ ፀረ እንግዳ አካላትን ለማምረት ለደንበኞቻቸው ጥራት ያለው ባዮሲሚላር ፀረ እንግዳ አካላትን እና ዳግም የተዋሃዱ የፕሮቲን ምርቶችን እንዲሁም ተዛማጅ አገልግሎቶችን መስጠት ይችላል። ሁሉን አቀፍ ፀረ እንግዳ አካላትን፣ የፕሮቲን መድረኮችን እና የፋጅ ማሳያ ስርዓቶችን በመጠቀም እንደ ፀረ ሰው ሰዋማዊነት፣ ፀረ ሰው ማጥራት፣ ፀረ እንግዳ አካላት ቅደም ተከተል እና ፀረ እንግዳ አካላት ማረጋገጫን የመሳሰሉ ቴክኒካል አገልግሎቶችን ጨምሮ የፀረ-ሰው ምርትን ወደላይ እና ታች የሚሸፍኑ አገልግሎቶችን እናቀርባለን።

የፀረ-ሰው ኢንጂነሪንግ ቀዳሚ ደረጃ ከሁለት ቴክኖሎጂዎች ጋር የተያያዘ ነው.

--ዳግመኛ የዲኤንኤ ቴክኖሎጂ

--ሃይብሪዶማ ቴክኖሎጂ

የፀረ-ሰው ኢንጂነሪንግ ፈጣን እድገት ከሶስት አስፈላጊ ቴክኖሎጂዎች ጋር የተያያዘ ነው.

--የጂን ክሎኒንግ ቴክኖሎጂ እና የ polymerase chain reaction

--የፕሮቲን አገላለጽ፡- ድጋሚ ፕሮቲን የሚመነጩት እንደ እርሾ፣ ዘንግ በሚመስሉ ቫይረሶች እና ተክሎች ባሉ አገላለጽ ስርዓቶች ነው

-- በኮምፒዩተር የታገዘ መዋቅራዊ ንድፍ

የመጀመሪያው ትውልድ ፀረ እንግዳ አካላት ቺሜሪክ ፀረ እንግዳ አካላትን ለማምረት ሰብአዊነት ተሰጥቷቸዋል ፣ የመዳፊት ሞኖክሎናል ፀረ እንግዳ አካላት ተለዋዋጭ ክልል ከሰው IgG ሞለኪውሎች ቋሚ ክልል ጋር የተቆራኘ ነው። የሁለተኛው ትውልድ የመዳፊት ሞኖክሎናል ፀረ እንግዳ አካል አንቲጂን ማሰሪያ ክልል (ሲዲአር) ወደ ሰው IgG ተተክሏል። ከሲዲአር ክልል በስተቀር፣ ሁሉም ፀረ እንግዳ አካላት የሰው ፀረ እንግዳ አካላት ናቸው ማለት ይቻላል፣ እና የአይጥ ክሎን ፀረ እንግዳ አካላትን ለሰው ልጅ ሕክምና ሲጠቀሙ የሰውን ፀረ እንግዳ አካላት (HAMA) ምላሽ እንዳይሰጡ ጥረት ተደርጓል።

 

የፋጌ ማሳያ ቤተ መፃህፍትን ለመገንባት የመጀመሪያው እርምጃ ፀረ እንግዳ አካላትን የሚመሰጥሩ ጂኖችን ማግኘት ነው እነዚህም ከክትባት ከተወሰዱ እንስሳት ቢ ህዋሶች (የበሽታ መከላከያ ቤተ መፃህፍት ግንባታ)፣ ክትባት ካልተደረገላቸው እንስሳት (የተፈጥሮ ቤተመፃህፍት ግንባታ) በቀጥታ የሚወሰዱ ወይም በብልቃጥ ውስጥ የሚገጣጠሙ ፀረ እንግዳ አካላት (ሰው ሠራሽ ቤተመፃህፍት ግንባታ) ናቸው። ከዚያም ጂኖቹ በ PCR ተጨምረዋል፣ ወደ ፕላዝማይድ ውስጥ ይገባሉ እና ተስማሚ በሆነ የአስተናጋጅ ስርዓት (የእርሾ አገላለጽ (ብዙውን ጊዜ ፒቺያ ፓስቶሪስ)) ፕሮካርዮቲክ አገላለጽ (በተለምዶ ኢ. ኮላይ)፣ አጥቢ እንስሳ ሴል አገላለጽ፣ የእፅዋት ሴል አገላለጽ እና በዱላ ቅርጽ ባላቸው ቫይረሶች የተበከሉ የነፍሳት ሴል አገላለጽ)። በጣም የተለመደው የኢ.ኮሊ አገላለጽ ስርዓት ነው፣ እሱም የተወሰነ የኢኮዲንግ ፀረ እንግዳ አካል ቅደም ተከተል በ phage ላይ በማዋሃድ እና ከ phage ሼል ፕሮቲኖች (pIII ወይም pVIII) ውስጥ አንዱን ኮድ ያደርገዋል። የጂን ውህደት ፣ እና በባክቴሪዮፋጅስ ገጽ ላይ ይታያል። የዚህ ቴክኖሎጂ ዋና ነገር የፋጌ ማሳያ ቤተ-መጽሐፍትን መገንባት ሲሆን ይህም ከተፈጥሯዊ ቤተ-መጻሕፍት ይልቅ ልዩ ትስስር ሊኖረው ይችላል. በመቀጠል፣ አንቲጂን ልዩ ባህሪ ያላቸው ፀረ እንግዳ አካላት በባዮሎጂካል ምርጫ ሂደት ይመረመራሉ፣ ኢላማ የሆኑ አንቲጂኖች ይስተካከላሉ፣ ያልተጣበቁ ፋጆች በተደጋጋሚ ይታጠባሉ እና የታሰሩ ፋጆች ለበለጠ ብልጽግና ይታጠባሉ። ከሶስት ወይም ከዚያ በላይ ድግግሞሾች ከተደጋገሙ በኋላ, ከፍተኛ ልዩነት እና ከፍተኛ ተያያዥነት ያላቸው ፀረ እንግዳ አካላት ይገለላሉ.

ምስል 3፡ አንቲቦዲ ቤተ መፃህፍት ግንባታ እና ማጣሪያ

ድጋሚ የዲኤንኤ ቴክኖሎጂ ፀረ እንግዳ አካላትን ለመፍጠር ሊያገለግል ይችላል። ፋብ ፀረ እንግዳ አካላት በመጀመሪያ ሃይድሮላይዝድ የሚደረጉት በጨጓራ ፕሮቲን (Fab') 2 ፍርስራሾችን ለማምረት ሲሆን እነዚህም በፓፒን ተፈጭተው የግለሰብ የፋብ ቁርጥራጮችን ይፈጥራሉ። የFv ክፍልፋይ ቪኤች እና ቪኤልን ያካትታል፣ እነዚህም በዲሰልፋይድ ቦንዶች ምክንያት ደካማ መረጋጋት አላቸው። ስለዚህ፣ VH እና VL በ15-20 አሚኖ አሲዶች አጭር peptide በኩል ተያይዘው አንድ ሰንሰለት ተለዋዋጭ ቁርጥራጭ (scFv) ፀረ እንግዳ አካላትን እና የሞለኪውላዊ ክብደት በግምት 25KDa።

በካሜሊዳ (ካሜል ፣ ሊማ እና አልፓካ) ውስጥ ስላለው ፀረ እንግዳ አካላት አወቃቀር ጥናት ፀረ እንግዳ አካላት ከባድ ሰንሰለቶች ብቻ እንደሌላቸው እና ቀላል ሰንሰለቶች እንደሌላቸው አብራርቷል ፣ ስለሆነም ከባድ ሰንሰለት ፀረ እንግዳ አካላት (hcAb) ይባላሉ። የከባድ ሰንሰለት ፀረ እንግዳ አካላት ተለዋዋጭ ጎራ ነጠላ ዶሜይን ፀረ እንግዳ አካላት ወይም ናኖቦዲዎች ወይም ቪኤችኤች ይባላል፣ ከ12-15 ኪ.ዲ. እንደ ሞኖመሮች, ምንም ዲሰልፋይድ ቦንዶች የላቸውም እና በጣም የተረጋጉ ናቸው, ለ አንቲጂኖች በጣም ከፍተኛ ግንኙነት አላቸው.

ምስል 5፡ ከባድ ሰንሰለት አንቲቦዲ እና VHH/ Nanobody

የሕዋስ ነፃ አገላለጽ በብልቃጥ ውስጥ የፕሮቲን ውህደትን ለማግኘት የተፈጥሮ ወይም ሰው ሠራሽ ዲ ኤን ኤ አገላለጽ ይጠቀማል፣በተለምዶ የኢ.ኮሊ አገላለጽ ሥርዓትን ይጠቀማል። ፕሮቲኖችን በፍጥነት ያመነጫል እና በሴሎች ላይ ከፍተኛ መጠን ያለው ዳግም የተዋሃዱ ፕሮቲኖችን ሲያመርት በሴሎች ላይ ያለውን የሜታቦሊክ እና የሳይቶቶክሲክ ሸክም ያስወግዳል። በተጨማሪም ለማዋሃድ አስቸጋሪ የሆኑ ፕሮቲኖችን ማለትም ከትርጉም በኋላ ለመለወጥ አስቸጋሪ የሆኑትን ወይም የሜምብሊን ፕሮቲኖችን በማዋሃድ ማምረት ይችላል።