خدمة تحليل خصائص الأبتامر

تم التحقق من تقارب الأبتامر المُحسَّن باستخدام التقنيات ذات الصلة باختبار ربط الأبتامر. تشمل الأمثلة قياس السعرات الحرارية بالمعايرة المتساوية الحرارة (ITC)، وقياس التدفق الخلوي (FCM)، والرنين البلازموني السطحي (SPR)، وعلم الموائع الدقيقة، وغيرها. عادةً ما يُعبَّر عن تقارب الأبتامر بثابت التفكك (KD)، وهو كمية فيزيائية تُستخدم لقياس درجة التفكك الجزيئي في التفاعلات العكسية. كلما كانت قيمة KD أصغر، كان المركب أكثر استقرارًا، أي زادت قوة التقارب؛ وعلى العكس، كلما زادت قيمة KD، كان المركب أقل استقرارًا وضعف التقارب. تُعد هذه الخطوة أساسية لتحديد أداء الأبتامر، وضمان نضج تقاربه، وقدرته على الارتباط بالجزيء المستهدف بألفة وانتقائية عالية في التطبيقات العملية.

الشكل 1: عملية نضج تقارب الأبتامر. المصدر المرجعي:Kinghorn AB، Fraser LA، 2017.

بالإضافة إلى التحقق من التقارب، يجب التحقق من وظيفة الأبتامر. يشمل ذلك التحقق من استقرار الأبتامر، وخصوصيته، وتفاعلاته مع الجزيئات الأخرى في بيئة معينة. ستؤثر نتائج التحقق الوظيفي بشكل مباشر على قيمة الأبتامر في البحث العلمي والتطبيقات الصناعية.

التحقق المحدد

يتم عادة اختيار الطريقة المناسبة وفقًا لهدف التطبيق المحدد لأبتامر الحمض النووي.

(1) الاختبار على المستوى الجزيئي: استخدام تقنيات البيولوجيا الجزيئية، مثل الرحلان الكهربائي للهلام، والاختبار الغربي، وما إلى ذلك، للكشف عن المجمعات التي تشكلت بعد اتحاد الأبتامر مع الجزيء المستهدف، أو الكشف عن التغييرات في مستوى التعبير عن الجزيء المستهدف الناجم عن الأبتامر.

(2) اختبار مستوى الخلية: باستخدام تقنية زراعة الخلايا، يتم حضانة الأبتامرات مع الخلايا المستهدفة لمراقبة التغيرات البيولوجية مثل مورفولوجيا الخلايا، والتكاثر، والموت الخلوي المبرمج، وتقييم النشاط البيولوجي للأبتامرات.

(3) اختبار نموذج الحيوان: في نماذج الحيوان المناسبة، يتم إعطاء أبتامرات الأحماض النووية عن طريق الحقن أو إعطاء الدواء، ويتم ملاحظة المؤشرات الفسيولوجية والتغيرات المرضية للحيوانات لتقييم النشاط البيولوجي وسلامة الأبتامرات في الجسم الحي.