خدمة تحليل خصائص الأبتامر

تم التحقق من تقارب الأبتامر الأمثل باستخدام تقنيات مناسبة، مثل قياس ارتباط الأبتامر. تشمل هذه التقنيات قياس السعرات الحرارية بالمعايرة متساوية الحرارة (ITC)، وقياس التدفق الخلوي (FCM)، ورنين البلازمون السطحي (SPR)، وتقنية الموائع الدقيقة، وغيرها. يُعبر عن تقارب الأبتامر عادةً بثابت التفكك (KD)، وهو كمية فيزيائية تُستخدم لتحديد درجة تفكك الجزيء في تفاعل عكسي. كلما انخفضت قيمة KD، زادت استقرارية المركب، أي زادت قوة التقارب؛ وعلى العكس، كلما زادت قيمة KD، قلّ استقرار المركب وضعف التقارب. تُعد هذه الخطوة أساسية لتحديد أداء الأبتامر، وضمان نضج تقاربه، وقدرته على الارتباط بالجزيء المستهدف بتقارب وانتقائية عاليتين في التطبيقات العملية.

الشكل 1: عملية نضج ألفة الأبتامر. المصدر المرجعي:كينغهورن إيه بي، فريزر إل إيه، 2017.

إلى جانب التحقق من الألفة، يجب التحقق من وظيفة الأبتامر. يشمل ذلك التحقق من استقرار الأبتامر، وخصوصيته، وتفاعلاته مع الجزيئات الأخرى في بيئة معينة. ستؤثر نتائج التحقق الوظيفي بشكل مباشر على قيمة الأبتامرات في البحث العلمي والتطبيقات الصناعية.

التحقق المحدد

عادة ما يتم اختيار الطريقة المناسبة وفقًا لهدف التطبيق المحدد للأبتامر الحمضي النووي.

(1) الاختبار على المستوى الجزيئي: استخدام تقنيات البيولوجيا الجزيئية، مثل الفصل الكهربائي الهلامي، والتلطيخ الغربي، وما إلى ذلك، للكشف عن المركبات المتكونة بعد ارتباط الأبتامر بالجزيء المستهدف، أو الكشف عن التغيرات في مستوى التعبير عن الجزيء المستهدف الناتجة عن الأبتامر.

(2) اختبار على مستوى الخلية: باستخدام تقنية زراعة الخلايا، يتم حضانة الأبتاميرات مع الخلايا المستهدفة لمراقبة التغيرات البيولوجية مثل شكل الخلية والتكاثر والاستماتة، وتقييم النشاط البيولوجي للأبتاميرات.

(3) اختبار النموذج الحيواني: في النماذج الحيوانية المناسبة، يتم إعطاء الأبتاميرات الحمضية النووية عن طريق الحقن أو إعطاء الدواء، ويتم مراقبة المؤشرات الفسيولوجية والتغيرات المرضية للحيوانات لتقييم النشاط البيولوجي وسلامة الأبتاميرات في الجسم الحي.