منصة تطوير الأجسام المضادة ثنائية التخصص

تُقدّم شركة ألفا لايف تك لعملائها منتجات وخدمات عالية الجودة في مجال اكتشاف الأجسام المضادة وإنتاج البروتينات المؤتلفة. نُحضّر أجسامًا مضادة ذات فعالية عالية، وخصوصية قوية، وثبات ممتاز. تمتلك ألفا لايف تك مجموعة متنوعة من أجهزة ومعدات تنقية الأجسام المضادة، مما يُتيح لنا تقديم خدمات تنقية الأجسام المضادة من مصادر مُتعددة، مثل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المُستخلصة من الأرانب والأغنام والدجاج والفئران، بالإضافة إلى خدمات تنقية الأجسام المضادة بتقنية تقارب البروتين A/G، وخدمات فصل وتنقية الأجسام المضادة. وبفضل منصتنا المتكاملة لاكتشاف الأجسام المضادة، ومنصات البروتينات، وغيرها، نُغطي جميع مراحل إنتاج الأجسام المضادة، بدءًا من تحضير الأجسام المضادة، مرورًا بتنقية الأجسام المضادة ثنائية الخصوصية، وفصل وتنقية الأجسام المضادة، وتسلسل الأجسام المضادة، والتحقق من صحتها، وغيرها، مما يُتيح استخدامها في العلاج بالأجسام المضادة ثنائية الخصوصية.

الأجسام المضادة وحيدة النسيلة هي غلوبولينات مناعية تُنتجها خلية بائية واحدة، وتتميز بتخصصها العالي تجاه المستضدات أو الحواتم. بدأ إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة باستخدام تقنية التهجين الخلوي لإنتاج أجسام مضادة من الفئران. وبالتحديد، يتم ذلك عن طريق دمج خلايا الطحال من فئران مُحصّنة مع خلايا ورم نقوي من الإنسان أو الفئران، فتتكون خلايا التهجين الخلوي التي تُفرز أجسامًا مضادة نوعية. تُستخدم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المُنتجة من الفئران بشكل أساسي في البحوث الحيوانية وتشخيص الأمراض بعد تنقيتها. إلا أن استجابة الجسم البشري المناعية للبروتينات الغريبة المُستخلصة من الفئران تُشكل قيودًا كبيرة على التطبيق السريري لإنتاج هذه الأجسام المضادة. لاحقًا، تم استخدام تقنية "التأنيس" لإنتاج أجسام مضادة وحيدة النسيلة من الفئران، واستُخدمت تقنية الهندسة الوراثية لتعديل هذه الأجسام المضادة بحيث تحتوي على منطقة ثابتة من الغلوبولين المناعي البشري، مما يقلل من قدرتها على إثارة استجابة مناعية. يُعرف هذا النوع من الأجسام المضادة أيضًا باسم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المؤنسنة. بالإضافة إلى ذلك، يُطلق على استخدام الخلايا البشرية لإنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة اسم تحضير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة البشرية الكاملة. تُستخدم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة على نطاق واسع في التطبيقات الطبية الحيوية والسريرية. في البحوث الطبية، يمكن استخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة كمعدلات مناعية، ويمكن استخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة العلاجية في العلاج الكيميائي للسرطان وعلاج العدوى الفيروسية، ويُستخدم تطوير اقترانات الأجسام المضادة وحيدة النسيلة بشكل أساسي في علاج السرطان.

مقدمة عن الأجسام المضادة ثنائية التخصص

في عام 1960، طُرح مفهوم الأجسام المضادة ثنائية التخصص. تُعرف هذه الأجسام المضادة، أو الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ثنائية التخصص، بأنها أجسام مضادة مُصنّعة باستخدام تقنية الهندسة الوراثية. وباعتبارها أجسامًا مضادة مُهندسة، تنتمي الأجسام المضادة ثنائية التخصص عادةً إلى فئة IgG الفرعية، وتحتوي على جزء رابط للمستضد يستهدف الوحدة الفرعية CD3. تمتلك هذه الأجسام المضادة موقعين محددين لربط المستضدات، مما يسمح لها بالارتباط والتعرف في آنٍ واحد على مستضدين مختلفين، أو على موقعين مختلفين من المستضد نفسه. بالمقارنة مع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، تتميز الأجسام المضادة ثنائية التخصص بموقع إضافي لربط المستضدات، مما يمنحها تخصصًا وقدرة استهداف أقوى، وبالتالي يمكنها استهداف الخلايا السرطانية بدقة أكبر وتقليل السمية غير المستهدفة. تستطيع هذه الأجسام المضادة أداء وظائف بيولوجية متعددة في الوقت نفسه، مثل استقطاب الخلايا المناعية، وحجب مسارات الإشارات، وقتل الخلايا السرطانية مباشرةً. في البداية، كانت تُحضّر الأجسام المضادة ثنائية التخصص بشكل أساسي من خلال الاقتران الكيميائي أو دمج الخلايا، ولكن ربما كان هذا الأسلوب بطيئًا نظرًا للتركيب العشوائي وصعوبة عزل التركيبة المستهدفة. مع التطور المستمر لتكنولوجيا الهندسة الوراثية، تم تطوير العديد من منصات التكنولوجيا الجديدة، مثل العقد في الثقوب (KIH) و CrossMab و DVD Ig وما إلى ذلك. تعمل هذه المنصات على حل المشكلات بشكل فعال مثل عدم تطابق السلسلة الثقيلة والسلسلة الخفيفة، وتحسين تجانس وإنتاجية الأجسام المضادة ثنائية التخصص.

الشكل 1: نظرة عامة تخطيطية مبسطة لآليات العمل المقترحة للأجسام المضادة ثنائية التخصص (bsAbs) في التجارب السريرية لعلاج الأورام.(مصدر الصورة: مراجعة للأجسام المضادة ثنائية التخصص وتركيبات الأجسام المضادة في علم الأورام والتحديات السريرية - ساينس دايركت)

تقنية إنتاج الأجسام المضادة ثنائية التخصص

تشمل الطرق الرئيسية لإنتاج الأجسام المضادة ثنائية التخصص: الاقتران الكيميائي، والهجين الخلوي رباعي المصادر، والهندسة الوراثية. تعتمد طريقة الاقتران الكيميائي على ربط جزيئين كاملين من IgG أو جزيئين من F(ab')2 لتكوين أجسام مضادة ثنائية التخصص باستخدام عوامل اقتران كيميائي مثل الفثاليميد وحمض ثنائي ثيوأسيل بنزويك. تتميز هذه الطريقة ببساطتها وسهولة تطبيقها، إلا أنها قد تُلحق الضرر بموقع ارتباط المستضد، مما يُقلل من فعالية الجسم المضاد، كما أن عامل الاقتران نفسه قد يكون له درجة معينة من التأثير المسرطن. أما طريقة الهجين الخلوي رباعي المصادر، فتعتمد على دمج الخلايا الجسدية من سلالتين مختلفتين من خلايا الهجين الخلوي للتعبير عن IgG الفأري المقابل. ومن خلال تقنية الهندسة الوراثية، يُمكن تعديل الأجسام المضادة وراثيًا لتكوين أجسام مضادة ثنائية التخصص. تم بناء جسمين مضادين أحاديي النسيلة مختلفين، ثم تم فصل أجزاء Fab أو المناطق المتغيرة للسلسلة الثقيلة والخفيفة من كل جسم مضاد على حدة. ومن خلال تفاعل الربط المتقاطع أو تقنية إعادة تركيب السلسلة، تم دمج الجزأين لتكوين جسم مضاد ثنائي التخصص. على الرغم من تعقيد تقنية الهندسة الوراثية، إلا أنها تُعدّ حاليًا الطريقة الأكثر شيوعًا لإنتاج الأجسام المضادة ثنائية التخصص، وذلك لتعديل بنية ووظيفة هذه الأجسام. عند تصميم الأجسام المضادة ثنائية التخصص، يُمكن الاستفادة من مبدأ التفاعل المتبادل بين الأجسام المضادة، إلا أن هذا التفاعل قد يُسبب تفاعلات غير نوعية، لذا يجب أخذه بعين الاعتبار عند تطبيق تصميم الأجسام المضادة ثنائية التخصص عمليًا، كما هو الحال في العلاج بالأجسام المضادة ثنائية التخصص.

تنقية الأجسام المضادة ثنائية التخصص

تنقية الأجسام المضادة ثنائية التخصص هي عملية عزل وتنقية الأجسام المضادة المستهدفة عالية النقاء. تُستخدم طريقتان لإزالة بعض الشوائب الذائبة: الطرد المركزي والترشيح العميق. في البداية، يُلتقط الجسم المضاد ثنائي التخصص المستهدف بواسطة كروماتوغرافيا التقارب. بالنسبة للأجسام المضادة ثنائية التخصص الشبيهة بـ IgG، تُستخدم كروماتوغرافيا التقارب القائمة على البروتين A، بينما بالنسبة للأجسام المضادة ثنائية التخصص غير الشبيهة بـ IgG، يمكن استخدام كروماتوغرافيا التقارب القائمة على السلسلة الخفيفة. بعد ذلك، يُحضن الجسم المضاد في ظروف حموضة منخفضة لفترة زمنية محددة، مما يؤدي إلى تعطيل بنية البروتين على سطح غلاف الفيروس، وبالتالي فقدان قدرته على إصابة الخلايا. يُجرى ترشيح عميق وسيط لإزالة المزيد من الشوائب مثل بروتينات الخلية المضيفة (HCP). يتم تحسين نقاء الأجسام المضادة من خلال طرق مثل كروماتوغرافيا التبادل الأيوني، وتُزال أي فيروسات متبقية من خلال تقنيات الترشيح النانوي أو الترشيح الفائق. أخيرًا، تُركز العينة ويُستبدل بمحلول منظم مناسب.

سير عمل خدمة إنتاج الأجسام المضادة ثنائية التخصص

خطوات	محتوى الخدمة	الجدول الزمني
تخليق الجينات	توليد ما يصل إلى 3 مخططات تصميم مختلفة للتسلسلات، وتوليد بلازميدات الحمض النووي للأجسام المضادة المؤتلفة من الصفر	2-3 أسابيع
اختبار على نطاق صغير	إنتاج بروتينات الأجسام المضادة ثنائية التخصص ← التعبير على نطاق صغير في خطوط الخلايا الثديية ← التحقق بواسطة SDS-PAGE ← تحليل الارتباط مع مستضدات البروتين المؤتلف بواسطة ELISA ← مقارنة المستنسخات بالأجسام المضادة الأصلية	5-6 أسابيع
تعريف	التعبير عن أول جسمين مضادين ثنائيي التخصص كاملين ← تحليل الارتباط بواسطة اختبار ELISA ← تقييم الأجسام المضادة التي تتعرف عليها الأجسام المضادة للفأر بواسطة اختبار ELISA	أسبوع واحد
إنتاج الأجسام المضادة	إنتاج الأجسام المضادة على نطاق واسع	3-4 أسابيع

مزايانا

نحن نغطي خدمات الإنتاج الأولية والنهائية للأجسام المضادة، ويمكننا تقديم خدمات فنية بدءًا من تحضير الأجسام المضادة، وتنقية الأجسام المضادة ثنائية التخصص، وفصل الأجسام المضادة وتنقيتها، وتسلسل الأجسام المضادة، والتحقق من صحة الأجسام المضادة، وما إلى ذلك، والتي يمكن استخدامها في العلاج بالأجسام المضادة ثنائية التخصص.

تعبير عالٍ

ارتفاع مستوى التعبير البروتيني في خلايا CHO.
تخزين مستقر

أكثر من أسبوعين في المصل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية.
لا توجد مشكلة في الذوبان

>30 ملغم/مل
خطوط الخلايا المستقرة

تم تطوير العديد من خطوط الخلايا المستقرة التي تحتوي على مستضدات ورمية للتحقق من صحة العديد من الأجسام المضادة ثنائية التخصص