خدمة تطوير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

شركة ألفا لايف تيك المحدودةيمكن أن يوفر التنبؤ بالبروتينات، وتخليق الببتيدات، والتعبير عن البروتين، وإنتاج الأجسام المضادة متعددة النسائل أو أحادية النسيلة، بالإضافة إلى تنقية الأجسام المضادة من مزارع الخلايا أو سائل الاستسقاء أو المصل الكامل.

شركة ألفا لايف تيك المحدودةلدينا خبرة واسعة في تزويد عملائنا بخدمات متنوعة لخطوط الخلايا المستقرة، بما في ذلك خلايا الهيبريدوما، وخطوط الخلايا المعدلة جينياً، وخطوط الخلايا ذات التعبير الجيني المنخفض، وخطوط الخلايا ذات التعبير الجيني المرتفع. نسعى جاهدين لتقديم خدمات متقدمة ومخصصة لخطوط الخلايا لكل عميل، وخدماتنا موثوقة ومجربة.

استراتيجية تطوير الأجسام المضادة

1. تصميم المستضد وإعداده
قد تكون هذه المستضدات بروتينات أو ببتيدات أو جزيئات أخرى. يتطلب تصميم المُستضدات المناعية منهجًا شاملًا يدمج المعرفة ببنية المستضد وعلم المناعة وأنظمة توصيله. تمتلك شركة ألفا لايفتك تقنية تصميم المستضدات التي تُمكّنها من تصميم مُستضدات مناعية للعملاء المحتاجين.
توفر شركة ألفا لايف تيك منتجات البروتينات المؤتلفة لعملائها. لدينا مجموعة متنوعة من أنظمة التعبير البروتيني، مثل نظام التعبير في بكتيريا الإشريكية القولونية، ونظام التعبير في الخميرة، ونظام التعبير في الحشرات باستخدام الفيروسات الباكولية، ونظام التعبير في الثدييات، وغيرها، لإنتاج البروتينات المؤتلفة التي تحتاجونها لأبحاثكم.

2. تحصين الحيوانات
بإمكان شركة ألفا لايفتك توفير مولدات المناعة للعملاء، كما تتوفر حيوانات محصنة مثل الفئران والأرانب والأغنام والألبكة وخنازير غينيا والهامستر وما إلى ذلك لتختار من بينها.

3. طرق إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

●إنتاج الخلايا الجذعية الوسيطة بتقنية الهيبريدوما
الخلية الهجينة هي خلية هجينة تنتج عن اندماج نوعين من الخلايا، وهما خلايا المايلوما الفأرية وخلايا البلازما (الخلايا اللمفاوية البائية)، حيث تستطيع الخلية غير المتجانسة إنتاج أجسام مضادة بشكل مستمر ضد المستضد المطلوب في المختبر. يتكون إنتاج سلالة خلايا هجينة من ثلاثة أجزاء: تصميم المستضد (الهابتينات، والجزيئات الصغيرة، والببتيدات)، وتحصين الحيوانات، ودمج الخلايا، وفحص المستنسخات الإيجابية. باستخدام منهجيات تحصين فريدة، نحصل على كفاءة عالية للغاية في دمج الخلايا (من 1 إلى 10 خلايا هجينة لكل ألف خلية بائية) ومستويات عالية من الأجسام المضادة، مما يزيد من معدل نجاحنا في الاختبارات التحليلية اللاحقة التي تشمل الفحص الكيميائي الحيوي، والفحوصات الخلوية في المختبر، والدراسات على الحيوانات.

●إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة بتقنية عرض العاثيات
تُوفر تقنية عرض العاثيات طريقةً أخرى لإنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. تُعزل الخلايا الليمفاوية البائية من دم الحيوانات، ويُستخلص منها الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA). يُحوّل هذا الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) إلى حمض نووي تكميلي (cDNA) عبر تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، مما يُضخّم جميع أجزاء VH وVL. تُستنسخ هذه الأجزاء بعد ذلك في ناقل، عادةً على شكل أجزاء متغيرة أحادية السلسلة (scFv)، إلى جانب بروتين PIII الخاص بالعاثية. يُستخدم هذا التركيب لاحقًا لإصابة بكتيريا الإشريكية القولونية (E. coli)، مما يؤدي إلى إنشاء مكتبة تحتوي على ما يقارب 10^10 خلية من خلال التلقيح بعاثية مساعدة. تستطيع الإشريكية القولونية بعد ذلك إفراز العاثية التي تحمل أجزاء VH وVL كجزء من غلافها. بعد ذلك، يُمكن اختيار أجزاء VH وVL مُحددة تستهدف المستضد المطلوب، واستخدامها لإعادة تلقيح الإشريكية القولونية بالعاثية. ثم تُعزل الخلايا الحاملة للبلازميد وتُخضع للتسلسل.

4. فحص الاندماج

●دمج الخلايا واختيارها
تُدمج خلايا B المحصودة مع خلايا الورم النخاعي المتعدد، وهي خلايا سرطانية قادرة على التكاثر بلا حدود في المزارع الخلوية. ويتم هذا الدمج عادةً باستخدام تقنية مثل دمج البولي إيثيلين جلايكول (PEG).
بعد الاندماج، تُزرع خلايا الهيبريدوما في وسط انتقائي يسمح فقط للهيبريدوما بالبقاء على قيد الحياة. يحتوي هذا الوسط عادةً على أمينوبتيرين، الذي يمنع نمو خلايا المايلوما غير المندمجة.

●الفحص والمتابعة
تُفحص خلايا الهيبريدوما الناتجة للكشف عن إنتاج الأجسام المضادة النوعية للمستضد المستهدف. ويتم ذلك عادةً باستخدام تقنيات مثل المقايسة المناعية الإنزيمية المرتبطة (ELISA)، والتلطيخ الغربي، والترسيب المناعي، وقياس التدفق الخلوي.

بمجرد تحديد خلايا الهيبريدوما المنتجة للأجسام المضادة، يتم استنساخها لإنتاج مجموعة من الخلايا المتطابقة. وهذا يضمن أن يكون الجسم المضاد الذي تنتجه كل خلية هيبريدوما متطابقًا.

5. التحقق من وظائف الأجسام المضادة
توفر شركة Alpha Lifetech التحقق الوظيفي للأجسام المضادة، مثل لطخة ويسترن، أو الكيمياء المناعية، أو المقايسات الوظيفية، لتوصيف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة وتأكيد خصوصية الأجسام المضادة، وتقاربها، ووظائفها.

6. تحسين الأجسام المضادة
يمكن تنقية الأجسام المضادة من المادة الطافية للمزرعة باستخدام تقنيات مثل كروماتوغرافيا التقارب للبروتين A أو البروتين G، كما يمكن لشركة Alpha Lifetech توفير طرق تعديل الأجسام المضادة لتحسين تقارب الأجسام المضادة.

7. إنتاج الأجسام المضادة
بإمكان شركة ألفا لايفتك تقييم الأجسام المضادة المرشحة لتطبيقات الفحص عالي الإنتاجية والإنتاج على نطاق واسع.