خدمة تطوير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

شركة ألفا لايف تيكيمكن أن توفر التنبؤ بالنمط الجيني، وتخليق الببتيد، والتعبير عن البروتين، وإنتاج الأجسام المضادة متعددة النسائل أو أحادية النسيلة، فضلاً عن تنقية الأجسام المضادة من مزارع الخلايا، أو سائل الاستسقاء، أو المصل الكامل.

شركة ألفا لايف تيكنتمتع بخبرة واسعة في تقديم خدمات سلالات الخلايا المستقرة للعملاء، بما في ذلك خلايا الورم الهجين، وسلالات تعديل الجينوم، وسلالات تثبيط الجينات، وسلالات زيادة التعبير الجيني. نسعى جاهدين لتقديم خدمات سلالات الخلايا المخصصة والمتطورة لكل عميل، وخدماتنا موثوقة ومجربة.

استراتيجية تطوير الأجسام المضادة

1. تصميم المستضد وإعداده
يمكن أن تكون هذه المستضدات بروتينات أو ببتيدات أو جزيئات أخرى. يتطلب تصميم المستضدات نهجًا شاملًا يجمع بين معرفة بنية المستضد وعلم المناعة وأنظمة التوصيل. تمتلك ألفا لايف تيك تقنية تصميم مستضدات تُمكّنها من تصميم مستضدات للعملاء المحتاجين.
توفر ألفا لايف تيك منتجات بروتينية مُعاد تركيبها ليختار منها عملاؤنا. لدينا مجموعة متنوعة من أنظمة التعبير البروتيني، مثل نظام التعبير عن الإشريكية القولونية، ونظام التعبير عن الخميرة، ونظام التعبير عن فيروس العصوية والحشرات، ونظام التعبير عن الثدييات، وغيرها، لإنتاج البروتينات المُعاد تركيبها التي تحتاجها للأبحاث.

2. تحصين الحيوانات
يمكن لشركة Alpha Lifetech توفير المواد المولدة للمناعة للعملاء، والحيوانات المحصنة مثل الفئران والأرانب والأغنام واللاما وخنازير غينيا والهامستر وما إلى ذلك متاحة للاختيار من بينها.

3.طرق إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

●إنتاج Mabs بواسطة تقنية Hybridoma
الورم الهجين هو خلية هجينة تُنتج عن اندماج نوعين من الخلايا، وهما سلالة خلايا الورم النقوي الفأري وخلايا البلازما (الخلايا الليمفاوية ب)، حيث تستطيع الخلية متغايرة الزيجوت إنتاج أجسام مضادة مستمرة ضد المستضد المطلوب في المختبر. يتكون إنتاج سلالة خلايا الورم الهجين من ثلاثة أجزاء: تصميم المستضد (الناشبات، والجزيئات الصغيرة، والببتيدات)، وتحصين الحيوانات، واندماج الخلايا، وفحص النسيلة الإيجابية. باستخدام منهجيات تحصين فريدة، نحصل على كفاءة اندماج خلايا عالية بشكل استثنائي (من 1 إلى 10 أورام هجينة لكل ألف خلية بائية) ومستويات عالية من الأجسام المضادة، مما يزيد من معدل نجاحنا في الاختبارات التحليلية اللاحقة التي تشمل الفحص الكيميائي الحيوي، والاختبارات الخلوية المختبرية، والدراسات على الحيوانات.

●إنتاج Mabs بواسطة تقنية عرض البكتيريا العاثية
يُقدم عرض البكتيريا طريقة أخرى لتوليد الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. تُعزل الخلايا الليمفاوية البائية من دم الحيوان، ويُستخرج منها الحمض النووي الريبوزي المرسال (mRNA). ومن خلال تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، يُحوّل هذا الحمض النووي الريبوزي المرسال إلى الحمض النووي الريبوزي التكميلي (cDNA)، الذي يُضخّم جميع أجزاء VH وVL. ثم تُستنسخ هذه الأجزاء في ناقل، عادةً على شكل شظايا متغيرة أحادية السلسلة (scFv)، إلى جانب بروتين PIII الخاص بالبكتيريا. بعد ذلك، يُستخدم هذا التركيب لإصابة الإشريكية القولونية، مما يُنتج مكتبة تحتوي على حوالي 10^10 خلية من خلال التلقيح ببكتيريا مساعدة. بعد ذلك، تُفرز الإشريكية القولونية البكتيريا التي تحمل أجزاء VH وVL كجزء من غلافها. بعد ذلك، يُمكن اختيار أجزاء VH وVL مُحددة تستهدف المُستضد المطلوب، واستخدامها لإعادة تلقيح الإشريكية القولونية بالبكتيريا. ثم تُعزل الخلايا التي تحتوي على البلازميد وتُسلسل.

4.فحص الاندماج

●اندماج الخلايا واختيارها
تُدمج الخلايا البائية المُحصودة بعد ذلك مع خلايا المايلوما، وهي خلايا سرطانية قادرة على التكاثر بشكل غير محدود في المزرعة. يُحقق هذا الاندماج عادةً باستخدام تقنية مثل دمج البولي إيثيلين جلايكول (PEG).
بعد الاندماج، تُزرع خلايا الورم الهجين في وسط انتقائي يسمح فقط للأورام الهجينة بالبقاء. يحتوي الوسط عادةً على الأمينوبترين، الذي يمنع نمو خلايا الورم النقوي غير المندمجة.

●الفرز والتشبيك
تُفحص خلايا الورم الهجين الناتجة بحثًا عن إنتاج أجسام مضادة خاصة بالمستضد المستهدف. يُجرى ذلك عادةً باستخدام تقنيات مثل اختبار الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، واختبار ويسترن بلوت، والترسيب المناعي، وقياس التدفق الخلوي.

بمجرد تحديد خلايا الورم الهجين المُنتجة للأجسام المضادة، تُستنسخ لإنتاج مجموعة من الخلايا المتطابقة. هذا يضمن تطابق الجسم المضاد الذي تُنتجه كل خلية هجينة.

5. التحقق من وظائف الأجسام المضادة
توفر شركة Alpha Lifetech التحقق من صحة وظائف الأجسام المضادة، مثل النقل الغربي، أو الكيمياء المناعية، أو الاختبارات الوظيفية، لتوصيف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة وتأكيد خصوصية الأجسام المضادة، وتقاربها، ووظيفتها.

6. تحسين الأجسام المضادة
يمكن لـ Alpha Lifetech أيضًا توفير طرق تعديل الأجسام المضادة لتحسين تقارب الأجسام المضادة من خلال تنقية الأجسام المضادة من السائل العلوي للثقافة باستخدام تقنيات مثل كروماتوغرافيا تقارب البروتين A أو البروتين G.

7. إنتاج الأجسام المضادة
يمكن لشركة Alpha Lifetech تقييم الأجسام المضادة المرشحة لتطبيقات الفحص عالية الإنتاجية والإنتاج على نطاق واسع.