خدمة بناء مكتبة Naïve Fab

مقدمة لخدمة إنشاء مكتبة Naïve Fabفاب

تقنية عرض العاثيات هي تقنية فحص في المختبر يمكنها اختيار الأجسام المضادة المستهدفة من مكتبة كبيرة من الأجسام المضادة وعرضها على سطح العاثيات البكتيرية. يُستخدم نظام عرض العاثيات M13، الذي يتكون من خمسة بروتينات قفيصة، على نطاق واسع حاليًا للعرض. تتمثل الوظيفة الرئيسية لبروتين القفيصة P Ⅲ في الفحص، ويمكن إدخال الجين المستهدف في P Ⅲ، كما أن نطاق ناقلاته القابلة للتطبيق واسع جدًا أيضًا. في عام 1985، تم إنشاء تقنية عرض العاثيات كتقنية لدراسة مستضدات المستضد. يتضمن عرض العاثيات بشكل أساسي إدخال جينات خارجية في بروتينات قفيصة العاثية من خلال تقنية الهندسة الوراثية، بحيث يمكن عرض البروتين المشفر بواسطة الجين الخارجي كبروتين اندماج دون تغيير بنيته ونشاطه. بعد ذلك، من خلال جولات متعددة من الفحص، يتم اختيار الأجسام المضادة عالية التخصص التي يمكنها الارتباط بالجزيء المستهدف. بعد سنوات من التطوير، طُبّقت تقنية عرض العاثيات ليس فقط في دراسة مُستضدات البكتيريا، بل أيضًا في مجالات مثل نقل إشارات الخلايا، ومواقع التعرف على البروتينات، وتطوير الأدوية. ومع انتشار استخدام تقنية عرض العاثيات، يُمكن تحديد العديد من الأمراض من خلال هذه التقنية، التي تتميز بالسرعة والتكلفة المنخفضة نسبيًا وسعة المكتبة الكبيرة. ومن خلال فحص ببتيدات العاثيات التي ترتبط بمستضدات محددة، يُمكن تطوير أجسام مضادة جديدة أو تحسين الأجسام المضادة الموجودة.

شظايا Fab، المعروفة أيضًا بشظايا ربط المستضد، هي مناطق رئيسية في تراكيب الأجسام المضادة، قادرة على الارتباط بالمستضدات. تتكون شظايا Fab من جزء من سلسلتي الجسم المضاد الخفيف والثقيل، واللتين ترتبطان بروابط ثنائية الكبريتيد. تحتوي السلسلة الخفيفة على منطقة متغيرة (VL) ومنطقة ثابتة (CL)، بينما تحتوي السلسلة الثقيلة على منطقة متغيرة (VH) وجزء من المنطقة الثابتة (CH1). تُشكل VL وVH مواقع ربط المستضد (CDRs) من خلال تفاعلات كارهة للماء وروابط هيدروجينية. الوزن الجزيئي لشظايا Fab صغير نسبيًا، يتراوح عادةً بين 47 و55 كيلو دالتون، مما يمنحها اختراقًا جيدًا للأنسجة ومناعة منخفضة. تحتفظ شظايا Fab بقدرتها الكاملة على ربط المستضد، ويمكنها الارتباط بمستضدات محددة بألفة عالية. نظرًا لنقص شظايا Fc في شظايا Fab، لا تُحفز التفاعلات المناعية التي تُسببها شظايا Fc، كما يقل احتمال حدوث تفاعلات فرط الحساسية. يسمح الوزن الجزيئي الأصغر لشظايا Fab باختراق حواجز الأنسجة والوصول إلى المواقع المستهدفة بسهولة أكبر. كما أن عمر النصف لشظايا Fab في الجسم الحي قصير نسبيًا، مما يساعد على تقليل الآثار الجانبية المحتملة للأدوية. ويمكن إنتاج أجسام مضادة لـ Fab من خلال التحليل المائي الإنزيمي، وتقنيات الهندسة الوراثية، وتقنية عرض البكتيريا العاثية.

مكتبة Naïve Fab، المعروفة أيضًا باسم مكتبة Fab الطبيعية، هي نوع من مكتبات الأجسام المضادة في تقنية عرض العاثيات. بُنيت هذه المكتبات عن طريق استنساخ شظايا جينات الأجسام المضادة من الخلايا الليمفاوية البائية الطبيعية غير المحصنة، وخاصة شظايا VH-CH وVL-CL، والتي ترتبط ببعضها البعض بروابط ثنائية الكبريتيد لتكوين شظايا Fab. تحتوي هذه المكتبات على عدد كبير من تسلسلات الأجسام المضادة التي لم تتعرض للمستضدات ولم تخضع لفحص الجهاز المناعي، مما يجعلها تتمتع بإمكانية ارتباط واسعة بالمستضد وتنوع كبير.

يمكن لشركة ألفا لايف تيك أن تقدم

تتمتع شركة ألفا لايف تيك بخبرة واسعة في اكتشاف الأجسام المضادة لعرض العاثيات. منصة عرض العاثيات لدينا راسخة، وقد تمكنا من استخدامها لأنواع مختلفة من العاثيات. منصة عاثيات M13 هي الأكثر استخدامًا لعرض العاثيات، كما تُستخدم على نطاق واسع في العديد من مجالات البحث. تتوفر مجموعة متنوعة من خدمات عرض العاثيات عبر نظامي عاثيات T4 وT7، والتي قد توفر خيارات واعدة مختلفة حسب مزاياها الخاصة.

تتمتع ألفا لايف تيك بخبرة طويلة في مجال الأجسام المضادة، وقد بنت منصة شاملة لاكتشاف الأجسام المضادة، بدءًا من اكتشاف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، وتطوير الأجسام المضادة متعددة النسيلة، وتطوير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المؤتلفة، وصولًا إلى أنواع مختلفة من خدمات تحضير وتطوير الأجسام المضادة. بالاعتماد على تقنيات ومنصات تحضير الأجسام المضادة المتنوعة، تقدم ألفا لايف تيك خدمات مخصصة للأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة من مختلف الأنواع. بالإضافة إلى إنتاج الأجسام المضادة في مرحلة التصنيع (fab)، نقدم أيضًا سلسلة من خدمات تنقية الأجسام المضادة في مرحلة التصنيع (fab)، وتسلسلها، والتحقق من صحتها، وغيرها. نقدم لعملائنا منتجات وخدمات مضمونة الجودة من الأجسام المضادة والبروتينات المؤتلفة. كما نحضر أجسامًا مضادة بكفاءة عالية، وخصوصية عالية، وثباتًا جيدًا. تمتلك ألفا لايف تيك مجموعة متنوعة من أجهزة ومعدات تنقية الأجسام المضادة في مرحلة التصنيع (fab)، والتي توفر خدمات تنقية الأجسام المضادة من مصادر متنوعة، مثل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للأرانب والأغنام والدجاج والفئران، بالإضافة إلى خدمات تنقية تقارب البروتين A/G، وخدمات فصل وتنقية الأجسام المضادة. نختار طريقة التنقية بناءً على غرض العميل المحدد. بناءً على بناء نظام منصة شامل لمنصة الأجسام المضادة ومنصة البروتين، نغطي جميع خدمات التصنيع الأولية والنهائية للأجسام المضادة، ونقدم خدمات تقنية تشمل تحضير الأجسام المضادة، وتنقيتها، وفصلها وتنقيتها، وتسلسلها، والتحقق من صحتها، وغيرها.

خدمة إنشاء مكتبة الأجسام المضادة Naïve Fab

تُعزل الخلايا الليمفاوية البائية من الدم المحيطي للحيوانات غير المُحصَّنة، ولأن هذه الخلايا الليمفاوية البائية غير مُحصَّنة، فإن تسلسلات جينات الأجسام المضادة التي تحتويها متباينة. ضُخِّمت شظايا الجينات المُشفِّرة للأجسام المضادة VH-CH وVL-CL من الخلايا الليمفاوية البائية بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وتحتوي هذه الشظايا الجينية على مناطق مختلفة من الأجسام المضادة. يُدمج شظية جين الجسم المضاد المُضخَّم مع جين بروتين غلاف العاثية، ويُعبَّر عنه، ويُعرَض على سطح العاثية. يمكن لكل عاثية بكتيرية أن تحمل تسلسلًا محددًا من الأجسام المضادة، ويمكن تضخيمها وفحصها على نطاق واسع في المختبر، مما يؤدي إلى بناء مكتبة أجسام مضادة تحتوي على عدد كبير من تسلسلات الأجسام المضادة المختلفة.

سير عمل إنشاء مكتبة الأجسام المضادة Naïve Fab

خطوات	مواصفة	الجدول الزمني
الخطوة 1: استخراج الخلايا البائية	إنشاء مجموعة متنوعة من الخلايا البائية التي يتم جمعها من دم الحيوان	يوم واحد
الخطوة 2: عزل الحمض النووي الريبي	يتم استخراج الحمض النووي الريبوزي من هذه الخلايا البائية، مع التركيز على الحمض النووي الريبوزي المرسال	يوم واحد
الخطوة 3: تخليق الحمض النووي التكميلي	باستخدام النسخ العكسي، يتم تحويل mRNA إلى DNA مكمل (cDNA)	يوم واحد
الخطوة 4: تضخيم المناطق المتغيرة	يتم بعد ذلك تضخيم المناطق المتغيرة من السلاسل الثقيلة (VH) والخفيفة (VL) من الجسم المضاد باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل	يوم واحد
الخطوة 5: إنشاء مكتبة الأجسام المضادة Fab	ترتبط مناطق VH وVL بمناطق ثابتة لتشكيل شظايا Fab	يومين
الخطوة 6: استنساخ مكتبة الأجسام المضادة Fab	يتم استنساخ شظايا Fab في متجهات عرض البكتيريا	3 أيام
الخطوة 7: عرض البكتيريا العاثية	يتم عرض مكتبة Fab على سطح العاثيات، ثم إجراء فحص عالي الإنتاجية	اسبوع واحد