خدمة بناء مكتبات نايف فاب

تقديم خدمة بناء المكتبات من Naïve Fabرائع

تقنية عرض العاثيات هي تقنية فحص مخبرية تُستخدم لاختيار الأجسام المضادة المستهدفة من مكتبة واسعة من الأجسام المضادة وعرضها على سطح العاثيات. يُستخدم نظام عرض العاثيات M13، الذي يتكون من خمسة بروتينات غلافية، على نطاق واسع حاليًا لهذا الغرض. تتمثل الوظيفة الرئيسية لبروتين الغلاف P III في الفحص، حيث يمكن إدخال الجين المستهدف فيه، كما أن نطاق النواقل المستخدمة فيه واسع جدًا. في عام 1985، طُوّرت تقنية عرض العاثيات كتقنية لدراسة محددات المستضدات. تعتمد هذه التقنية بشكل أساسي على إدخال جينات خارجية في بروتينات غلاف العاثيات باستخدام الهندسة الوراثية، بحيث يُعرض البروتين المُشفّر بواسطة الجين الخارجي كبروتين اندماجي دون تغيير بنيته أو نشاطه. بعد ذلك، ومن خلال جولات متعددة من الفحص، يتم اختيار الأجسام المضادة عالية التخصص القادرة على الارتباط بالجزيء المستهدف. بعد سنوات من التطوير، لم تقتصر تقنية عرض العاثيات على دراسة مواقع ارتباط المستضدات فحسب، بل امتدت لتشمل مجالات أخرى مثل نقل الإشارات الخلوية، ومواقع التعرف على البروتينات، وتطوير الأدوية. ومع الانتشار الواسع لهذه التقنية، أصبح بالإمكان تشخيص العديد من الأمراض بفضلها، لما تتميز به من سرعة، وتكلفة منخفضة نسبيًا، وسعة تخزين كبيرة. ومن خلال فحص ببتيدات العاثيات التي ترتبط بمستضدات محددة، يُمكن تطوير أجسام مضادة جديدة أو تحسين الأجسام المضادة الموجودة.

تُعدّ أجزاء Fab، المعروفة أيضًا باسم أجزاء ربط المستضد، مناطق أساسية في بنية الأجسام المضادة قادرة على الارتباط بالمستضدات. تتكون أجزاء Fab من جزء من السلسلتين الخفيفة والثقيلة للجسم المضاد، واللتان ترتبطان بروابط ثنائية الكبريتيد. تحتوي السلسلة الخفيفة على منطقة متغيرة (VL) ومنطقة ثابتة (CL)، بينما تحتوي السلسلة الثقيلة على منطقة متغيرة (VH) وجزء من المنطقة الثابتة (CH1). تُشكّل VL وVH مواقع ربط المستضد (CDRs) من خلال التفاعلات الكارهة للماء والروابط الهيدروجينية. يتميز الوزن الجزيئي لأجزاء Fab بصغره النسبي، حيث يتراوح عادةً بين 47 و55 كيلو دالتون، مما يمنحها قدرة جيدة على اختراق الأنسجة وانخفاضًا في قدرتها على إثارة الاستجابة المناعية. تحتفظ أجزاء Fab بقدرتها الكاملة على ربط المستضد، ويمكنها الارتباط بمستضدات محددة بألفة عالية. نظرًا لعدم وجود أجزاء Fc في أجزاء Fab، لا يتم تحفيز الاستجابات المناعية التي تتوسطها أجزاء Fc، كما تقل احتمالية حدوث تفاعلات فرط الحساسية. يُتيح الوزن الجزيئي الأصغر لجزيئات Fab اختراق حواجز الأنسجة بسهولة أكبر والوصول إلى المواقع المستهدفة. كما أن عمر النصف لجزيئات Fab في الجسم الحي قصير نسبيًا، مما يُساعد على تقليل الآثار الجانبية المحتملة للأدوية. ويمكن إنتاج أجسام Fab المضادة من خلال التحلل الإنزيمي، وتقنيات الهندسة الوراثية، وتقنية عرض العاثيات.

مكتبة Fab الساذجة، والمعروفة أيضًا بمكتبة Fab الطبيعية، هي نوع من مكتبات الأجسام المضادة في تقنية عرض العاثيات. تُنشأ هذه المكتبات الساذجة عن طريق استنساخ أجزاء من جينات الأجسام المضادة من الخلايا الليمفاوية البائية الطبيعية غير المحصنة، وتحديدًا أجزاء VH-CH وVL-CL، المرتبطة معًا بروابط ثنائية الكبريتيد لتكوين أجزاء Fab. تحتوي هذه المكتبات الساذجة على عدد كبير من تسلسلات الأجسام المضادة التي لم تتعرض للمستضدات أو تخضع لفحص الجهاز المناعي، مما يمنحها قدرة واسعة على الارتباط بالمستضدات وتنوعًا كبيرًا.

بإمكان شركة ألفا لايفتك توفير

تتمتع شركة ألفا لايفتك بخبرة واسعة في اكتشاف الأجسام المضادة باستخدام تقنية عرض العاثيات. منصة عرض العاثيات لدينا راسخة ومُجربة، وقد استخدمناها بنجاح مع أنواع مختلفة من العاثيات. تُعد منصة العاثيات M13 الأكثر استخدامًا في هذا المجال، كما أنها تُستخدم على نطاق واسع في العديد من المجالات البحثية. تتوفر لدينا مجموعة متنوعة من خدمات عرض العاثيات عبر نظامي العاثيات T4 وT7، والتي قد تُقدم خيارات واعدة مختلفة بناءً على مزاياها الخاصة.

تتمتع شركة ألفا لايف تك بخبرة طويلة في مجال الأجسام المضادة، وقد أنشأت منصة شاملة لاكتشاف الأجسام المضادة، تشمل اكتشاف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، وتطوير الأجسام المضادة متعددة النسيلة، وتطوير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المؤتلفة، بالإضافة إلى خدمات تحضير وتطوير أنواع مختلفة من الأجسام المضادة. وبفضل تقنيات ومنصات تحضير الأجسام المضادة المتنوعة، تقدم ألفا لايف تك خدمات مخصصة للأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة من مختلف الأنواع. إلى جانب إنتاج الأجسام المضادة من نوع Fab، نوفر أيضًا سلسلة من خدمات تنقية الأجسام المضادة من نوع Fab، وتسلسل الأجسام المضادة، والتحقق من صحتها، وغيرها. نضمن لعملائنا منتجات وخدمات أجسام مضادة وبروتينات مؤتلفة عالية الجودة. نستطيع تحضير أجسام مضادة ذات فعالية عالية، وخصوصية قوية، وثبات ممتاز. تمتلك ألفا لايف تك مجموعة متنوعة من أجهزة ومعدات تنقية الأجسام المضادة من نوع Fab، والتي توفر خدمات تنقية الأجسام المضادة من مصادر مختلفة مثل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من الأرانب والأغنام والدجاج والفئران، بالإضافة إلى خدمات تنقية الأجسام المضادة بتقنية تقارب البروتين A/G، وخدمات فصل وتنقية الأجسام المضادة. وسنختار طريقة التنقية بناءً على الغرض المحدد للعميل. وبفضل نظام المنصة المتكامل الذي يضم منصة الأجسام المضادة ومنصة البروتينات وغيرها، فإننا نغطي خدمات الإنتاج الأولية والنهائية للأجسام المضادة بتقنية Fab، ونقدم خدمات فنية تشمل تحضير الأجسام المضادة، وتنقيها، وفصلها، وتنقيها، وتسلسلها، والتحقق من صحتها، وغيرها.

خدمة بناء مكتبة الأجسام المضادة Naïve Fab

تُعزل الخلايا اللمفاوية البائية من الدم المحيطي لحيوانات غير مُحصَّنة، ونظرًا لعدم تحصين هذه الخلايا، فإن تسلسلات جينات الأجسام المضادة التي تحتويها متنوعة. تم تضخيم أجزاء الجينات التي تُشفِّر الأجسام المضادة VH-CH وVL-CL من الخلايا اللمفاوية البائية باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وتحتوي هذه الأجزاء على المناطق المتغيرة للأجسام المضادة. يُدمج جزء جين الجسم المضاد المُضخَّم مع جين بروتين غلاف العاثية، ويُعبَّر عنه، ويُعرض على سطح العاثية. يمكن لكل عاثية أن تحمل تسلسلًا محددًا من الأجسام المضادة، ويمكن تضخيمها وفحصها على نطاق واسع في المختبر، مما يؤدي إلى بناء مكتبة أجسام مضادة تحتوي على عدد كبير من تسلسلات الأجسام المضادة المختلفة.

سير عمل بناء مكتبة الأجسام المضادة الساذجة

خطوات	مواصفة	الجدول الزمني
الخطوة 1: استخلاص الخلايا البائية	يتم تكوين مجموعة متنوعة من الخلايا البائية من دم الحيوانات	يوم واحد
الخطوة الثانية: عزل الحمض النووي الريبي	يتم استخلاص الحمض النووي الريبوزي (RNA) من هذه الخلايا البائية، مع التركيز على الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA).	يوم واحد
الخطوة 3: تخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA)	باستخدام النسخ العكسي، يتم تحويل الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) إلى الحمض النووي التكميلي (cDNA).	يوم واحد
الخطوة الرابعة: تضخيم المناطق المتغيرة	ثم يتم تضخيم المناطق المتغيرة للسلاسل الثقيلة (VH) والخفيفة (VL) للأجسام المضادة باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).	يوم واحد
الخطوة 5: بناء مكتبة الأجسام المضادة Fab	ترتبط منطقتا VH وVL بمناطق ثابتة لتشكيل أجزاء Fab	يومين
الخطوة السادسة: استنساخ مكتبة الأجسام المضادة Fab	يتم استنساخ أجزاء Fab في نواقل عرض العاثيات.	3 أيام
الخطوة 7: عرض العاثيات	يتم عرض مكتبة Fab على سطح العاثيات، ثم يتم إجراء فحص عالي الإنتاجية	أسبوع واحد