خدمة بناء خطوط الخلايا المستقرة
لطالما انخرطت شركة ألفا لايف تيك في مجال تطوير عمليات بناء سلالات الخلايا المستقرة. وقد بنت منصةً مثاليةً لبناء سلالات الخلايا المستقرة، تضم أكثر من 300 نوع من الخلايا السرطانية والخلايا الأولية، ما يُمكّنها من إنتاج سلالات خلايا مستقرة، مع توفير الوقت اللازم للبحث العلمي أو أبحاث المشاريع، وتسهيل الإنتاج اللاحق. كما تُقدم ألفا لايف تيك لعملائها خدماتٍ مثل تطوير عمليات السلالات، وفحص السلالات، وبناء السلالات، وإنتاج البروتينات المُعاد تركيبها، وإنتاج الأجسام المضادة، مما يُوفر أساسًا بحثيًا للأدوية الجديدة.
لدى شركة ألفا لايف تيك منصة خلوية مُصابة بالفيروسات العكوسة، تُمكّنها من تخصيص العملية التجريبية لأنواع مختلفة من سلالات الخلايا المُتحولة المستقرة. استخدمنا تقنية تعطيل الجينات لبناء سلالات خلوية مُعطلة باستخدام CRISPR/Cas9. واستُخدمت تقنيتا الإفراط في التعبير الجيني وتثبيط الجينات لتثبيت سلالات التحويل. يُكمل تكامل موقع الجينات المُحدد خدمات بناء سلالات الخلايا المُتكاملة باستخدام الرؤوس.
مقدمة لبناء خط الخلية المستقرة
يُقصد بالسلالة الخلوية المستقرة السلالة الخلوية التي تُدمج الجينات الغريبة في جينوم الخلية المضيفة، مما يُتيح التعبير الجيني للجينات الغريبة بشكل مستقر في الخلية المضيفة لفترة طويلة. يتمثل المبدأ في اختزال الجين الغريب إلى ناقل ذي مقاومة معينة، ثم نقله إلى الخلايا المضيفة، ودمجه في كروموسوم المضيف، وفحص جينات المقاومة الموجودة في الناقل للحصول على سلالات خلوية مستقرة ذات تعبير عالٍ عن البروتين المستهدف أو تثبيط مستقر للجين المستهدف، بما يُلبي متطلبات التجربة.
تحتوي شركة Alpha Lifetech على ورشة تخزين مستقلة، ونظام مثالي لتجميد الخلايا وإدارة التخزين، وأكثر من 300 نوع من الخلايا السرطانية والخلايا الأولية لتختار من بينها، مخصصة لأبحاثك العلمية.
عملية بناء خط الخلية المستقرة

طريقة بناء خط الخلية المستقر
تتضمن طرق بناء خط الخلية المستقر الفحص بوساطة الفيروس العصوي، والفحص بوساطة الترانسبوزون، والفحص بوساطة CRISPR/Cas9، والفحص البلازميدي.
يُعدّ الفيروس البطيء من أكثر الطرق شيوعًا لبناء سلالات خلوية مستقرة. يتميز هذا النهج بإصابة جميع أنواع الخلايا تقريبًا ودمج المادة الوراثية في جينوم الخلية المضيفة لضمان استقرار التعبير الجيني على مدى فترة طويلة. ومع ذلك، فإن هذا النظام يعاني من بعض القيود، كما أن الفيروس البطيء لديه قدرة محدودة على التغليف، لذا فهو غير مناسب لنسخ الجينات ذات مناطق النسخ الطويلة.
بالمقارنة مع الفيروس العصوي، لا يوجد أي قيود على حجم الجينات في الفيروس العصوي، ومع التحسين المستمر للتكنولوجيا، تحسنت كفاءة إدخال الجينات عدة مرات. لكن عيبه هو صعوبة نقل بعض القيود على الخلايا الأولية والخلايا.
يحتوي CRISPR/Cas9 على تعديل جينات crispr وتعديل جينات crispr. يشير تعديل جينات crispr إلى إحداث قطع في شريطي الحمض النووي، مما يؤدي إلى فقدان وظيفة الجين المستهدف. أما تعديل جينات crispr فيشير إلى إدخال شظايا الحمض النووي الغريبة إلى جينات محددة، والتي يمكن استخدامها لإصلاح الجينات المعيبة أو إدخال جينات وظيفية جديدة.
يُعدّ فحص البلازميد أبسطَ مخططٍ لبناء سلالات الخلايا، إذ يتطلب فقط نقل البلازميد المستهدف بنجاح إلى الخلية، ثم استخدام المقاومة المقابلة في الفحص طويل الأمد. ومن ثمّ، يُصبح احتمال الحصول على سلالات خلوية مستقرة أمرًا مُحددًا.
طرق بناء خطوط الخلايا المستقرة المختلفة
طريقة الوساطة | نظام الفيروسة البطيئة | نظام الترانسبوزون | بوساطة CRISP/Cas9 | فحص البلازميد |
---|---|---|---|---|
سعة الناقل | 5 كيلوبايت | 10 كيلوبايت | 5 كيلوبايت | 10 كيلوبايت |
الكفاءة الوسيطة | عالي | طبيعي | طبيعي | قليل |
الجدول الزمني | 1-2 أسابيع | 3-4 أسابيع | 3-4 أسابيع | 4-6 أسابيع |
ميزة | سريع وفعال | الأمن والاستقرار | تكامل النقطة الثابتة | تكلفة أقل |
عيب | مخاطر السلامة البيولوجية | وفرة التعبير طبيعي | نقل CAS9 صعب ومكلف | انخفاض الكفاءة وعدم الاستقرار |
الصعوبات التقنية في بناء خطوط الخلايا المستقرة
قبل توسيع نطاق العملية، يُستخدم مفاعل حيوي صغير لتحديد معايير مثل الغاز، ونظام سائل الزراعة، والحد الأدنى من الإجهاد الهيدروديناميكي المطبق على الخلايا، وما إلى ذلك، لضمان زراعة الخلايا على نطاق واسع. ومع ذلك، حتى مع تحديد معايير العملية المقابلة، ستكون بيئة المفاعلات الحيوية الكبيرة في المُنتِج غير متساوية، ومن السهل أن تفشل. تتمتع ألفا لايف تيك بخبرة سنوات طويلة في زراعة الخلايا على نطاق واسع، مما يُمكّنها من تجنب الأخطاء إلى حد ما، وتقليل المخاطر، وتحسين معدل النجاح بشكل كبير. في الوقت نفسه، تضمن ألفا لايف تيك اتساق المواد الخام ودفعات الوسائط المستخدمة، مما يُقلل من معدل فشل زراعة الخلايا على نطاق واسع.
تمتلك ألفا لايف تيك منصة شاملة لتطوير خطوط الخلايا المستقرة لضمان استقرارها أثناء الإنتاج. كما نقدم خدمات مخصصة لتلبية احتياجاتكم.
محتوى خدمة إنشاء خطوط الخلايا المستقرة
محتوى | الجدول الزمني |
ثقافة خط الخلايا HEK293 المقدمة من قبل العميل. | 3-5 شهور |
بناء بلازميد sgRNA-Cas9 (مع الجين الفحصي G418). | |
تم نقل sgRNA-Cas9 ونموذج الحمض النووي الإصلاحي معًا إلى خط الخلية HEK293. | |
فحص خط الخلايا وحيدة النسيلة (جين GFP استنساخ إيجابي للطرق). | |
التسليم: ناقل، سلالة إدخال جين GFP، نتائج التسلسل، جميع البيانات الخام، تقرير المختبر |

يمكن تتبع الخلايا
يتم شراء الخلايا من المنظمات المهنية مثل ATCC ويمكن أن توفر دليلاً على تلبية احتياجات متطلبات التسجيل الخاصة بك.

ميزة الإنتاج
تتمتع شركة Alpha Lifetech بخبرة لسنوات عديدة في تلبية احتياجات التطوير المتنوعة؛ لدينا مجموعة متنوعة من الخلايا، وورشة تخزين مستقلة، وتجميد مثالي للخلايا، ونظام إدارة التخزين.

مراقبة جودة المشروع
يخضع كل مشروع لعمليات مراقبة جودة صارمة لضمان تسليم خطوط الخلايا التي تلبي المعايير العالية للعملاء.

الميزة التقنية
بالإضافة إلى المهندسين ذوي الخبرة الواسعة في مجال الخلايا، لدينا خوارزميات متطورة في مجال التكنولوجيا لتحسين ظروف المفاعل وتعديل معلمات العملية.
إذا كان لديك أي أسئلة، فلا تتردد في الاتصال بنا في أي وقت.
Leave Your Message
0102