تُقدّم شركة ألفا لايف تيك حلولاً شاملة لجميع احتياجاتك البحثية، بدءًا من اختيار العاثيات المستخدمة في العرض وحتى تسلسل الجيل التالي (NGS). كما تُقدّم ألفا لايف تيك خدمات تنقية الأجسام المضادة من نوع Fab.

تتمثل إحدى الطرق في تثبيت المستضد على سطح الجسم، حيث يمكن امتصاصه على السطح المُنشَّط عبر تفاعلات غير تساهمية متعددة. يُخفَّف المستضد بمحلول منظف لا يحتوي على مواد مُتداخلة، ويكون الرقم الهيدروجيني له أعلى من 9 لزيادة الشحنة الكلية لجزيء البروتين وتعزيز التفاعل المحب للماء مع السطح، ثم يُضاف إلى صفيحة التقطير لحضنه مع مكتبة الأجسام المضادة Fab الخاصة بالعاثيات. يرتبط Fab بالمستضد على الطور الصلب، مما يجعل ارتباطه مستقرًا. بعد ذلك، تُشطف العاثيات غير المرتبطة، ويُزال خط العاثيات باستخدام مذيب مُحدد. تُكرر هذه الخطوات عدة مرات. بعد 3 إلى 4 جولات من الفرز، تُحضَّر عاثيات مرتبطة بـ Fab، ويُحدَّد الجسم المضاد المرتبط بـ Fab الذي تم فرزه، وتكون المستنسخات الإيجابية المُستحصلة قابلة للذوبان. تُقيَّم خصوصية الجسم المضاد Fab باستخدام تقنية Western Blot والكيمياء النسيجية المناعية. كما تُقيَّم ألفة الجسم المضاد Fab باستخدام تقنية BLI. بعد الحصول على المستنسخ المستهدف، تم التحقق من النتائج بواسطة تقنية التسلسل NGS لتنقية الأجسام المضادة Fab.

ومع ذلك، فإن هذه الطريقة لها قيود: (1) لا يمكن امتصاص المستضدات ذات الوزن الجزيئي المنخفض، مثل الهابتينات أو الببتيدات، على السطح بمفردها وتحتاج إلى اقترانها ببروتينات حاملة؛ سيتغير تركيب المستضد، ولن يتعرف الجسم المضاد على المستضد الحر في المحلول.

يتمثل أحد الأساليب الأخرى في ربط المستضد المستهدف بالبيوتين، باستخدام ستربتأفيدين ثابت لالتقاط المستضد السطحي. يمكن إضافة البيوتين إلى البروتينات عبر تفاعلات كيميائية على السلاسل الجانبية، كما يمكن تصنيع الهابتينات والببتيدات القصيرة مع إضافة البيوتين إليها. قبل إضافة المستضدات المُبيوتينية، يجب معالجة المكتبة مسبقًا وحضنها مع حبيبات دقيقة مغلفة بالستربتأفيدين لربط مُقترن الستربتأفيدين. تم حضن المكتبة مع محلول مستضد مُبيوتيني، ثم أُضيفت حبيبات مغناطيسية. على الرغم من أن البيوتين قد يؤثر على الخصائص الفيزيائية والكيميائية للمستضدات، إلا أن هذه الطريقة قادرة على امتصاص المستضدات التي تُظهر تغيرات في بنيتها.