Phage Display Antikor İnkişaf Platforması

Alpha Lifetech antikor kəşfi sahəsində geniş layihə təcrübəsi ilə çoxsaylı növlər üçün fərdiləşdirilmiş monoklonal və poliklonal antikor xidmətləri, həmçinin antikor kitabxanasının qurulması və skrininq xidmətləri göstərə bilər. Alpha Lifetech müştərilərə effektiv, yüksək spesifik və stabil antikorların hazırlanması üçün keyfiyyətli zəmanətli antikor və rekombinant antikor məhsulları, həmçinin müvafiq xidmətlər təqdim edə bilər. Kompleks antikor platformalarından və antikor mühəndisliyindən istifadə etməklə biz antikor istehsalının yuxarı və aşağı axınını əhatə edən xidmətlər, o cümlədən anticisimlərin hazırlanması, təmizlənməsi, antikor sıralaması və validasiyası kimi texniki xidmətlər təqdim edirik.

Alpha Lifetech müştərilərə heyvan toxunulmazlığı, fag nümayişi antikor kitabxanasının qurulması və skrininqi, antikor ardıcıllığının təyini, antikor ifadəsi, antikorların təmizlənməsi, antikorların yoxlanılması və hibridoma texnologiyasına əsaslanan antikorların etiketlənməsi, tək B hüceyrə texnologiyası, faq nümayişi texnologiyası və sair daxil olmaqla bir sıra xidmətlər təqdim edən yetkin antikor kəşf platformasına malikdir. Alpha Lifetech standart istehsal xəttinə malikdir və antikor hazırlama xidmətlərinə əlavə olaraq, antikorların humanistləşdirilməsi, antikor yaxınlığının yetişməsi, ADC dərmanının dizaynı və inkişafı və CAR-T sonrakı ardıcıllıq dizaynı kimi dəstəkləyici xidmətlər də təmin edilə bilər. Eyni zamanda, Alpha Lifetech M13, T4 və T7 fag displey texnologiyası platformalarına əsaslanan və 10^8-10^9-a qədər saxlama qabiliyyətinə malik antikor kitabxanası qurdu. Kitabxananın müsbət nisbəti, daxiletmə nisbəti və müxtəlifliyi 90%-dən çox ola bilər.

Fag nümayişi texnologiyası

Monoklonal antikor istehsalı ilkin olaraq siçan hibridoması monoklonal antikor istehsal etmək üçün hibridom monoklonal antikor texnologiyasından istifadə etməklə hazırlanmışdır. Xüsusilə, immunlaşdırılmış siçanların dalaq hüceyrələrini insan və ya siçanların miyelom hüceyrələri ilə birləşdirərək, spesifik hibridom monoklonal antikor antikorlarını ifraz edən hibridoma hüceyrələri əmələ gəlir. Siçan monoklonal antikorlarının humanistləşdirilmiş modifikasiyası və onlara daimi insan immunoqlobulin bölgəsini vermək üçün antikorların gen mühəndisliyi modifikasiyası ilə onların immunogenliyini azaltmaq olar. Monoklonal antikor mühəndisliyi biotibbi və klinik tətbiqlərdə geniş istifadə olunur.

Alpha Lifetech, klinikadan əvvəlki tədqiqat protokolu dizaynından antikor dərman konjugatlarının (ADC) kəşfinə və heyvanların təsdiqinə qədər birdəfəlik antikor mühəndisliyi xidmətləri göstərə bilər. Antikor dərman konjugatları (ADC) xərçəng hüceyrələrinə kemoterapi dərmanlarını çatdıra bilər. Xərçəng hüceyrələrində ifadə edilən xüsusi hədəflərə bağlandıqdan sonra ADC xərçəng hüceyrələrinə sitotoksik dərmanlar buraxır. Alpha Lifetech, həmçinin müştərilərə hərtərəfli antikor yaxınlığının yetişməsi xidmətləri təqdim edə bilər. Qabaqcıl mutasiyanın optimallaşdırılması və yüksək məhsuldarlıqlı faq ekranı skrininq texnologiyası ilə əvvəlcə müəyyən yaxınlığa malik antikorlar yoxlanılır, sonra isə müxtəlif variantlar yaratmaq üçün amin turşusu mutasiyaları təqdim edilir. Sonradan yüksək yaxınlıqlı antikorlar skrininq üsullarından istifadə edilərək qiymətləndirilmiş və skrininq edilmişdir. Çoxsaylı optimallaşdırma və struktur analizindən sonra daha yüksək yaxınlıq və daha güclü spesifikliyə malik antikorlar əldə edildi.

Alpha Lifetech immun kitabxanalar, yerli kitabxanalar, yarı sintetik kitabxanalar və sintetik kitabxanalar da daxil olmaqla müxtəlif növ antikor fag nümayişi kitabxanalarını qura bilər. Antikor kitabxanalarının yüksək tutumuna əsaslanaraq yüksək spesifik antikorlar əldə edilə bilər. pMECS, pComb3X və pCANTAB 5E kimi çoxsaylı fagemid vektorları, həmçinin TG1 E. coli, XL1 Blue və ER2738 kimi suşlar təmin edilə bilər. 10^9-a qədər kitabxana tutumuna əlavə olaraq, kitabxananın hədəf fraqmentinin daxil olma dərəcəsi də yüksəkdir və müştəriləri qane edən antitellərin yoxlanılması üçün kifayət qədər şərait yaradır. Alpha Lifetech-in fag displey texnologiyasına əsaslanan antikor hazırlama xidmətinin sxemi Şəkil 1-də göstərilmişdir.

Fig.1 Fage displey texnologiyası əsasında monoklonal anticisimlərin hazırlanması prosesi diaqramı.

Phage Display Antikor İstehsal İş Akışı

Addımlar	Xidmət məzmunu	Zaman qrafiki
Addım 1: Heyvanların immunizasiyası	(1) Heyvanların immunizasiyası 4 dəfə, gücləndirici immunizasiya 1 doza, cəmi 5 doza immunlaşdırılır. (2) İmmunizasiyadan əvvəl mənfi zərdab toplandı və serum titrini aşkar etmək üçün dördüncü dozada ELISA aparıldı. (3) Dördüncü dozanın serum antikor titri tələblərə cavab verirsə, qan toplanmasından 7 gün əvvəl əlavə bir immunizasiya dozası tətbiq olunacaq. Tələblərə cavab vermədikdə, adi immunizasiya davam etdiriləcək. (4) Kvalifikasiya edilmiş potensial, qan toplama və monositlərin ayrılması	10 həftə
Addım 2: cDNT Hazırlanması	(1) PBMC Total RNT Extraction (RNT Extraction Kit) (2) cDNA-nın yüksək dəqiqlikli RT-PCR hazırlanması (əks transkripsiya dəsti)	1 gün
Addım 3: Antikor Kitabxanasının tikintisi	(1) Şablon kimi cDNA istifadə edərək, genlər iki dövrə PCR ilə gücləndirildi. (2) Fajın qurulması və transformasiyası: gen birləşən fagemid vektoru, TG1 host bakteriyalarının elektroporasiya transformasiyası, antikor kitabxanasının qurulması. (3) İdentifikasiya: Təsadüfi olaraq 24 klon seçin, PCR identifikasiyası müsbət nisbət + daxiletmə dərəcəsi. (4) Yardımlı faq hazırlığı: M13 faqın gücləndirilməsi+təmizləmə. (5) Phage displey kitabxana xilasetmə	3-4 həftə
Addım 4: Antikor Kitabxanasının Skrinqi (3 tur)	(1) Defolt 3-raundlu skrininq (bərk fazalı skrininq): qeyri-spesifik antikorları maksimum mümkün həddə çıxarmaq üçün təzyiq skrininqi. (2) Tək klon gücləndirici bakteriofaq seçildi+IPTG ilə induksiya edilən ifadə+müsbət klonların ELISA aşkarlanması. (3) Bütün müsbət klonlar gen ardıcıllığı üçün seçilmişdir.	4-5 həftə

Fage Ekran Texnologiyasının Üstünlüyü

Alpha Lifetech antikorların inkişafı sahəsində zəngin təcrübəyə malikdir. Bu illər ərzində Alpha Lifetech hərtərəfli antikor inkişaf platforması qurdu.

Dəstək Xidmətləri

Müştərinin ehtiyaclarına uyğun olaraq müxtəlif heyvan əsaslı immun kitabxana tikinti xidmətləri və təbii antikor kitabxanası skrininq xidmətləri göstərə bilərik

Çoxsaylı Hədəf

Bir çox hədəf antikor kəşfi xidmətləri mövcuddur: zülallar, peptidlər, kiçik molekullar, viruslar, membran zülalları, mRNT və s.

Çox Vektorlar

Fərdi kitabxana tikinti xidməti, biz PMECS, pComb3X və pCANTAB 5E daxil olmaqla müxtəlif bakteriofaq vektorlarını təmin edə və müştəri ehtiyaclarına uyğun olaraq dəyişdirə bilərik.

Yetkin Platforma

Saxlama tutumu 10 ^ 8-10 ^ 9-a çata bilər, daxiletmə nisbətləri hamısı 90% -dən yuxarıdır və skrininq nəticəsində əldə edilən antikorların yaxınlığı ümumiyyətlə nM pM səviyyəsindədir.

Əlaqədar XİDMƏT

Çoxlu Antikor İnkişaf Strategiyaları

Monoklonal Antikor İnkişafı Xidməti

Hybridoma Texnologiya Platforması

Tək B Hüceyrə Çeşidləmə Platforması

Phage Display Antikor İnkişaf Platforması

monoklonal antikor inkişafı - Alpha Lifetech

Monoklonal Antikor İnkişafı Xidməti

Siçan monoklonal anticisimlərinin və dovşan monoklonal anticisimlərinin istehsalı da daxil olmaqla yüksək keyfiyyətli, yüksək saflıqda və yüksək spesifik monoklonal anticisimlərin hazırlanması xidmətlərini təmin edə bilərik.

Hybridoma Texnologiya Platforması

O cümlədən immunizasiya proqramı, antikor hazırlama xidmətləri, antikorların təmizlənməsi, antikorların yüksək ötürücülük sıralaması, antikorların yoxlanılması və s.

Tək B Hüceyrə Çeşidləmə Platforması

Alpha Lifetech skrininq müddətində və yüksək keyfiyyətli antikorların əldə edilməsində üstünlüklərə malikdir. Antigen dizaynını, sintezini və modifikasiyasını, heyvan toxunulmazlığını, tək B hüceyrə zənginləşdirmə skrininqini, tək hüceyrə ardıcıllığını təmin edə bilər.