Antikor dərmanlarının qabaqcılı olan monoklonal antikor (mAb), xərçəng, yoluxucu xəstəliklərin müalicəsi, öz dərman inkişaf bazarı üçün 100-dən çox monoklonal antikor təsdiqlənmiş və özünəməxsus terapevtik dəyərini nümayiş etdirir. Yeni nəsil antikor inkişaf texnologiyası olan tək B hüceyrəli antikor texnologiyası, hibridoma və faj nümayişindən sonra antikor istehsal texnologiyasında bir irəliləyiş olan tək B hüceyrələrindən antikorları səmərəli və tez bir zamanda təcrid edə bilər. Tək B hüceyrə çeşidləmə texnologiyası dovşan, siçan, dəvə, qoyun və toyuq kimi bir çox növə qarşı antikor generasiyası üçün istifadə edilə bilər. Tək B hüceyrə texnologiyası yüksək spesifiklik, yüksək aktivlik və yüksək yaxınlıq kimi üstün üstünlüklərə malikdir. Tək B hüceyrə çeşidləmə platformasına əsaslanan Alpha Lifetech, müayinə vaxtı və yüksək keyfiyyətli antikorların əldə edilməsində üstünlüklərə malikdir. Müştərilərin müxtəlif ehtiyaclarını ödəmək üçün antigen dizaynı, sintezi və sintezi, heyvan immuniteti, tək B hüceyrə zənginləşdirmə müayinəsi, tək hüceyrə ardıcıllığı, yüksək məhsuldarlıq müayinəsi, ifadəsi və təmizlənməsi, funksional yoxlama kimi tək dayanacaqlı texniki xidmətlər təmin edə bilər.

Təcrübə heyvanlarına (məsələn, siçanlar, dovşanlar və s.) immun stimulyasiyası üçün uyğun antigeni seçin ki, onlar antigenə qarşı spesifik antikorlar istehsal edə bilsinlər.

Heyvan immunizasiyası antikor generasiyasının ilkin mərhələsidir. Heyvan immunizasiyası orqanizmin özünün humoral immun cavab mexanizmindən istifadə etməklə həyata keçirilir. Antigenlərin davamlı stimullaşdırılması yolu ilə heyvanlar güclü immun cavabı yaradır və sonra spesifik antigenlərə qarşı spesifik antikorlar ifraz edirlər.

B hüceyrələri immun heyvanların periferik qanından, dalağından və ya limfa düyünlərindən təcrid olunmuşdur. Bu B hüceyrələri spesifik antigenlərə qarşı antikor istehsal etmək üçün immunoloji cəhətdən stimullaşdırılıb.

Fiziki və ya kimyəvi üsullarla (məsələn, sıxlıq qradiyenti ilə santrifüqləmə, maqnit muncuqlarının ayrılması və s.) B hüceyrələrinin zənginləşdirilməsi, çirk hüceyrələrinin çıxarılması, B hüceyrələrinin saflığını və sonrakı ayrılmanın səmərəliliyini artırır.

Flüoresansla Aktivləşdirilmiş Hüceyrə Çeşidləməsi (FACS), Maqnit Hüceyrə Ayrılması (MACS), Mikroflüidik Hüceyrə Çeşidləməsi (MCS) və ya digər yüksək məhsuldarlıqlı skrininq üsulları, antigenə xas etiketləmə ilə birlikdə, hədəf antikorlar istehsal etmək üçün zənginləşdirilmiş B hüceyrələrindən fərdi B hüceyrələrini skrininq etmək üçün istifadə edilə bilər.

Tək bir B hüceyrəsi qarışıq B hüceyrə populyasiyasından təcrid edildikdə, onun antikor genləri tək hüceyrə ardıcıllıq texnologiyası ilə ardıcıllıqlanmalı və ağır zəncir dəyişkən bölgəsinin (VH) və yüngül zəncir dəyişkən bölgəsinin (VL) DNT ardıcıllıq məlumatlarını əldə etmək üçün təhlil edilməlidir. Tək hüceyrə ardıcıllıq texnologiyası əsasən üç mərhələdən ibarətdir: tək hüceyrə izolyasiyası, hüceyrədaxili nuklein turşusunun gücləndirilməsi və ardıcıllıq təhlili. Tək hüceyrə ardıcıllığının prinsipi yüksək məhsuldarlıq ardıcıllığı üçün yüksək əhatə dairəsinə malik tam bir genom və ya transkriptom əldə etmək üçün təcrid olunmuş tək hüceyrələrin iz bütöv genom DNT-sini və ya RNT-sini gücləndirməkdir.

Yüksək məhsuldarlıqlı skrininq vasitəsilə eyni anda minlərlə B hüceyrəsinin antikor gen ardıcıllığı əldə edilə bilər ki, bu da antikor kəşfinin sürətini xeyli sürətləndirir. Bu ardıcıllıq məlumatları antikor kitabxanasının qurulması və skrininqi üçün əlavə olaraq istifadə edilə bilər.

Şəkil 2 Tək B hüceyrələrinin tutulmasının, kitabxana quruluşunun, yüksək məhsuldarlıqlı skrininqin və ardıcıllığın sxematik diaqramı.(İstinad mənbəyi: Kütləvi şəkildə paralel tək hüceyrəli B-hüceyrə reseptor ardıcıllığı müxtəlif antigen-reaktiv antikorların sürətli aşkarlanmasına imkan verir.)

(1)Rekombinant zülal: ≥2.5 mq, zülal saflığı >85%, zülal molekulyar çəkisi 10 kDa-dan çox, həll olunan zülal konsentrasiyası 0.5 ilə 5 mq/ml arasındadır. Antigen affinitet təmizlənməsi tələb olunarsa, əlavə 10 mq rekombinant zülal tələb olunur.

(2) Polipeptidlər və kiçik molekullar: Çılpaq peptid ≥10 mq, peptid təmizliyi >90%, ən azı 10 AA, KLH/BSA/OVA və ya digər daşıyıcı zülalları birləşdirir; Kiçik molekullar əvvəlcədən struktur qiymətləndirmə tələb edir.