Sabit Hüceyrə Xətləri Tikinti Xidməti

Alpha Lifetech uzun illərdir ki, sabit hüceyrə xəttinin qurulması prosesinin inkişafı sahəsində dərindən məşğuldur. O, elmi tədqiqat və ya layihə tədqiqatları üçün vaxta qənaət etməklə yanaşı, sonrakı istehsalı asanlaşdıraraq sabit hüceyrə xətləri təmin edə bilən 300-dən çox növ şiş hüceyrəsi və ilkin hüceyrələri özündə birləşdirən mükəmməl sabit hüceyrə xəttinin qurulması prosesi platforması qurmuşdur. Alpha Lifetech həmçinin müştərilərə ştamm prosesinin inkişafı, ştamm skrininqi, ştammın qurulması, rekombinant protein və antikor istehsalı kimi xidmətlər göstərə bilər və yeni dərmanlar üçün tədqiqat əsasını təmin edə bilər.

Alpha Lifetech, müxtəlif növ hüceyrə sabit transmutasiya ştammları üçün eksperimental prosesi fərdiləşdirə bilən lentivirusla yoluxmuş hüceyrə platformasına malikdir. CRISPR/Cas9 nokaut hüceyrə xətlərini qurmaq üçün gen nokaut texnologiyasından istifadə etdik. Transmutasiya ştammlarını sabitləşdirmək üçün gen həddindən artıq ifadəsi və gen susdurma üsullarından istifadə edildi. Gen sahəsinə xas inteqrasiya, vertex inteqrasiya hüceyrə xəttinin qurulması xidmətlərini tamamlayır.

Sabit hüceyrə xətti quruluşuna giriş

Sabit hüceyrə xətti, xarici genləri sahib hüceyrə genomuna inteqrasiya edən hüceyrə xəttinə aiddir ki, xarici genlər sahib hüceyrədə uzun müddət sabit şəkildə ifadə oluna bilsin. Prinsip, xarici geni müəyyən bir müqavimətə malik bir vektora endirmək, sahib hüceyrələri transfeksiya etmək, xarici geni sahib xromosomuna inteqrasiya etmək və vektorda olan müqavimət genlərini skrep etmək, hədəf zülalının yüksək ifadəsinə və ya təcrübənin tələblərinə cavab verən hədəf genin sabit susdurulmasına malik sabit hüceyrə xətləri əldə etməkdir.

Alpha Lifetech şirkətinin elmi tədqiqatlarınıza həsr olunmuş müstəqil saxlama emalatxanası, mükəmməl hüceyrə dondurması və saxlama idarəetmə sistemi və seçim edə biləcəyiniz 300-dən çox şiş hüceyrəsi və ilkin hüceyrə növü var.

Sabit hüceyrə xəttinin qurulması prosesi

Sabit hüceyrə xəttinin qurulması metodu

Sabit hüceyrə xəttinin qurulması metodlarına lentivirus vasitəçiliyi ilə, transpozon vasitəçiliyi ilə, CRISPR/Cas9 vasitəçiliyi ilə və plazmid skrininqi daxildir.

lentivirus vasitəçiliyi ilə aparılan müalicə, sabit hüceyrə xətlərinin qurulması üçün ən çox istifadə edilən üsullardan biridir. Bu yanaşma, demək olar ki, bütün növ hüceyrələri yoluxdurmaq və uzun müddət ərzində sabit ifadə üçün genetik materialı ana hüceyrə genomuna inteqrasiya etmək üstünlüyünə malikdir. Lakin, bu sistemin müəyyən məhdudiyyətləri var və lentivirusun məhdud qablaşdırma tutumu var, buna görə də uzun transkripsiya bölgələri olan genlərin transkripsiyası üçün uyğun deyil.

Lentivirus vasitəçiliyi ilə müqayisədə, transpozon vasitəçiliyi ilə gen ölçüsündə heç bir məhdudiyyət yoxdur və texnologiyanın davamlı optimallaşdırılması ilə transpozon daxiletməsinin səmərəliliyi bir neçə dəfə artırılıb. Dezavantajı, ilkin hüceyrələrə və hüceyrələrə müəyyən məhdudiyyətlərin transfeksiya edilməsinin çətin olmasıdır.

CRISPR/Cas9 vasitəçiliyi ilə crispr geninin nokautu və crispr geninin döyülməsi baş verir. Crispr geninin nokautu, hədəf genin funksiyasının itirilməsi ilə nəticələnən DNT-nin ikiqat zəncirli kəsilməsini nəzərdə tutur. Crispr geninin döyülməsi, qüsurlu genləri bərpa etmək və ya yeni funksional genlər daxil etmək üçün istifadə edilə bilən yad DNT fraqmentlərini müəyyən genlərə aid edir.

Plazmid skrininqi ən ibtidai hüceyrə xətti quruluş sxemidir və yalnız hədəf plazmidin hüceyrəyə uğurla transfeksiya edilməsi və uzunmüddətli skrininqdə müvafiq müqavimətdən istifadə edilməsi kifayətdir. Sonra sabit hüceyrə xətlərinin əldə edilməsinin müəyyən bir ehtimalı var.

Müxtəlif sabit hüceyrə xətlərinin qurulması üsulları

Vasitəçilik Metodu	Lentivirus Sistemi	Transpozon Sistemi	CRISP/Cas9 vasitəçiliyi ilə	Plazmid Skrininqi
Daşıyıcı Tutumu	5 kb	10 kb	5 kb	10 kb
Vasitəçilik Səmərəliliyi	Yüksək	Normal	Normal	Aşağı
Xronologiya	1-2 həftə	3-4 həftə	3-4 həftə	4-6 həftə
Üstünlük	Sürətli və səmərəli	Təhlükəsizlik və sabitlik	Sabit nöqtə inteqrasiyası	Daha aşağı qiymət
Çatışmazlıq	Biotəhlükəsizlik riski	İfadə bolluğu normal	CAS9 transduksiyası çətin və baha başa gəlir	Aşağı səmərəlilik və qeyri-sabitlik

Sabit hüceyrə xətlərinin qurulmasında texniki çətinliklər

Prosesi miqyaslandırmadan əvvəl, çarpaz miqyaslı becərməni təmin etmək üçün qaz, becərmə mayesi sistemi, hüceyrələrə tətbiq olunan minimum hidrodinamik stress və s. kimi parametrləri müəyyən etmək üçün kiçik bir bioreaktordan istifadə olunur. Bununla belə, müvafiq proses parametrləri müəyyən edilsə belə, istehsalçıdakı böyük bioreaktorların mühiti qeyri-bərabər olacaq və sıradan çıxması asandır. Alpha Lifetech, prosesin miqyaslandırılması becərməsində uzun illər təcrübəyə malikdir ki, bu da müəyyən dərəcədə səhvlərin qarşısını ala, riskləri azalda və uğur nisbətini xeyli artıra bilər. Eyni zamanda, Alpha Lifetech, istifadə olunan xammalın və mühit partiyalarının ardıcıllığını təmin edir və hüceyrə becərmə prosesinin miqyaslandırılmasının sıradan çıxma nisbətini azaldır.

Alpha Lifetech, istehsal zamanı hüceyrə xətlərinin sabitliyini təmin etmək üçün hərtərəfli sabit hüceyrə xətti prosesi inkişaf platformasına malikdir. Həmçinin ehtiyaclarınızı ödəmək üçün sizə fərdiləşdirilmiş xidmətlər də təqdim edə bilərik.

Sabit Hüceyrə Xətləri Tikinti Xidmətinin məzmunu

Məzmun	Xronologiya
Müştəri tərəfindən təmin edilən HEK293 hüceyrə xəttinin becərilməsi.	3-5 aylar
sgRNA-Cas9 plazmidinin qurulması (skrininq geni G418 ilə).
sgRNA-Cas9 və təmir DNT şablonu HEK293 hüceyrə xəttinə birgə köçürüldü.
Monoklonal hüceyrə xətti müayinəsi (GFP geni) döyən müsbət klon).
Çatdırılma: Vektor, GFP geninin nokaut ştammı, ardıcıllıq nəticələri, bütün xam məlumatlar, laboratoriya hesabatı

Hüceyrələr izlənilə bilər

Hücrələr ATCC kimi peşəkar təşkilatlardan alınır və qeydiyyat tələblərinizə cavab verən sübut təqdim edə bilər.

İstehsal üstünlüyü

Alpha Lifetech müxtəlif inkişaf ehtiyaclarını ödəmək üçün uzun illər təcrübəyə malikdir; Bizdə müxtəlif hüceyrələr, müstəqil saxlama emalatxanası, mükəmməl hüceyrə dondurması və saxlama idarəetmə sistemimiz var.

layihənin keyfiyyətinə nəzarət

Hər bir layihə, müştərilərə yüksək standartlara cavab verən mobil xətlərin çatdırılmasını təmin etmək üçün ciddi keyfiyyətə nəzarət proseslərindən keçir.

Texniki üstünlük

Geniş mobil təcrübəyə malik mühəndislərlə yanaşı, reaktor şəraitini yaxşılaşdırmaq və proses parametrlərini dəyişdirmək üçün inkişaf etmiş texnoloji təkamül alqoritmlərimiz də mövcuddur.

Hər hansı bir sualınız varsa, istənilən vaxt bizimlə əlaqə saxlamaqdan çəkinməyin.

Leave Your Message

Seçilmiş Xidmət

0102