Што такое распрацоўка антыцелаў?
Распрацоўка антыцелаў уключае ўвядзенне сайта злучэння антыцелаў (зменных абласцей) у мноства архітэктур, уключаючы бі- і мультыспецыфічныя фарматы, якія дадаткова ўплываюць на тэрапеўтычныя ўласцівасці, што прыводзіць да далейшых пераваг і поспехаў у лячэнні пацыентаў.
З дапамогай інжынерыі антыцелаў стала магчымым змяніць малекулярны памер, фармакокінетыку, імунагеннасць, афіннасць звязвання, спецыфічнасць і эфектарную функцыю антыцелаў. Пасля сінтэзу антыцелаў спецыфічнае звязванне антыцелаў робіць іх вельмі каштоўнымі ў клінічнай дыягностыцы і лячэнні. З дапамогай распрацоўкі антыцелаў яны могуць задаволіць патрэбы ранняй распрацоўкі лекаў і дыягностыкі.
Мэтай распрацоўкі антыцелаў з'яўляецца распрацоўка і вытворчасць высокаспецыфічных, стабільных функцый, якіх натуральныя антыцелы не могуць дасягнуць, закладваючы аснову для вытворчасці тэрапеўтычных антыцелаў.
Кампанія Alpha Lifetech з вялікім вопытам праектавання ў галіне распрацоўкі антыцелаў можа прадастаўляць індывідуальныя паслугі па вытворчасці моноклональных і поліклональных антыцелаў для розных відаў, а таксама паслугі па стварэнні бібліятэкі антыцелаў на фагавым дысплеі і скрынінгу. Alpha Lifetech можа прадастаўляць кліентам якасныя біяпадобныя антыцелы і рэкамбінантныя бялковыя прадукты, а таксама адпаведныя паслугі для вытворчасці эфектыўных, высокаспецыфічных і стабільных антыцелаў. Выкарыстоўваючы комплексныя платформы антыцелаў, бялкоў і фагавых дысплейных сістэм, мы прадстаўляем паслугі, якія ахопліваюць уверх і далей па вытворчасці антыцелаў, у тым ліку такія тэхнічныя паслугі, як гуманізацыя антыцелаў, ачыстка антыцелаў, секвеніраванне антыцелаў і праверка антыцелаў.
Развіццё інжынерыі антыцелаў
Першапраходчы этап распрацоўкі антыцелаў звязаны з дзвюма тэхналогіямі:
--Тэхналогія рэкамбінантнай ДНК
--Гибридомная тэхналогія
Хуткае развіццё інжынерыі антыцелаў звязана з трыма важнымі тэхналогіямі:
--Тэхналогія кланавання генаў і палімеразнай ланцуговай рэакцыі
--Экспрэсія бялку: Рэкамбінантныя вавёркі вырабляюцца такімі сістэмамі экспрэсіі, як дрожджы, палачкападобныя вірусы і расліны.
--Камп'ютэрнае праектаванне структур
Тэхналогіі, якія выкарыстоўваюцца ў распрацоўцы антыцелаў
Гибридомная тэхналогія
Адным з найбольш распаўсюджаных спосабаў атрымання моноклональных антыцелаў з выкарыстаннем гибридомной тэхналогіі з'яўляецца імунізацыя мышэй для атрымання В-лімфацытаў, якія зліваюцца з увекавечанымі миеломными клеткамі для стварэння гибридомных клеткавых ліній, а затым праводзіцца скрынінг на адпаведныя моноклональные антыцелы супраць адпаведных антыгенаў.
Гуманізацыя антыцелаў
Першае пакаленне антыцелаў было гуманізавана для вытворчасці хімерных антыцелаў, дзе варыябельная вобласць моноклональных антыцелаў мышы была звязана з канстантнай вобласцю малекул IgG чалавека. Вобласць звязвання антыгена (CDR) мышынага моноклонального антыцела другога пакалення была перасаджана ў IgG чалавека. За выключэннем вобласці CDR, усе іншыя антыцелы з'яўляюцца амаль чалавечымі антыцеламі, і былі прыкладзены намаганні, каб пазбегнуць індукцыі рэакцыі чалавечых антымышыных антыцелаў (HAMA) пры выкарыстанні мышыных клонавых антыцелаў для лячэння чалавека.


Малюнак 1: Структура хімерных антыцелаў, Малюнак 2: Структура гуманізаваных антыцелаў
Тэхналогія фагавага дысплея
Каб пабудаваць бібліятэку фагавага дысплея, першым крокам з'яўляецца атрыманне генаў, якія кадуюць антыцелы, якія можна вылучыць з B-клетак імунізаваных жывёл (канструкцыя імуннай бібліятэкі), вылучыць непасрэдна з неімунізаваных жывёл (канструкцыя натуральнай бібліятэкі) або нават сабраць in vitro з фрагментамі гена антыцелаў (канструкцыя сінтэтычнай бібліятэкі). Затым гены ампліфікуюцца з дапамогай ПЦР, устаўляюцца ў плазміды і экспрэсуюцца ў адпаведных сістэмах гаспадароў (экспрэсія дрожджаў (звычайна Pichia pastoris), экспрэсія пракарыётаў (звычайна E. coli), экспрэсія клетак млекакормячых, экспрэсія клетак раслін і экспрэсія клетак насякомых, заражаных палачкападобнымі вірусамі). Найбольш распаўсюджанай з'яўляецца сістэма экспрэсіі кішачнай палачкі, якая інтэгруе спецыфічную паслядоўнасць антыцелаў, якія кадуюць, у фаг і кадуе адзін з бялкоў абалонкі фага (pIII або pVIII). Зліццё генаў І адлюстроўваецца на паверхні бактэрыяфагаў. Ядро гэтай тэхналогіі заключаецца ў стварэнні бібліятэкі фагавага дысплея, якая мае перавагу перад натуральнымі бібліятэкамі ў тым, што можа мець спецыфічнае звязванне. Пасля антыцелы са спецыфічнасцю да антыгена правяраюцца ў працэсе біялагічнай селекцыі, антыгены-мішэні фіксуюцца, незвязаныя фагі шматразова вымываюцца, а звязаныя фагі вымываюцца для далейшага ўзбагачэння. Пасля трох і больш цыклаў паўтарэння выдзяляюцца антыцелы высокай спецыфічнасці і высокага сродства.

Малюнак 3: Будаўніцтва і скрынінг бібліятэкі антыцелаў
Тэхналогія рэкамбінантных антыцелаў
Для стварэння фрагментаў антыцелаў можна выкарыстоўваць тэхналогію рэкамбінантнай ДНК. Антыцелы Fab першапачаткова могуць быць гідралізаваны толькі страўнікавай пратэазай для атрымання фрагментаў (Fab ') 2, якія затым пераварваюцца папаінам для атрымання асобных фрагментаў Fab. Фрагмент Fv складаецца з VH і VL, якія валодаюць нізкай стабільнасцю з-за адсутнасці дисульфидных сувязяў. Такім чынам, VH і VL звязаны паміж сабой праз кароткі пептыд з 15-20 амінакіслот з адукацыяй антыцела з адзінкавым зменлівым фрагментам ланцуга (scFv) з малекулярнай масай прыкладна 25 кДа.

Малюнак 4: антыцелы Fab і фрагмент антыцелаў Fv
Вывучэнне структуры антыцелаў у Camelidae (Camel, LIama і Alpaca) высветліла, што антыцелы маюць толькі цяжкія ланцугі і не маюць лёгкіх ланцугоў, таму іх называюць антыцеламі да цяжкіх ланцугоў (hcAb). Варыябельны дамен антыцелаў цяжкай ланцуга называецца аднадаменнымі антыцеламі або нанацеламі або VHH памерам 12-15 кДа. Як манамеры, яны не маюць дисульфидных сувязяў і вельмі стабільныя, з вельмі высокім сродством да антыгенаў.

Малюнак 5: Антыцелы да цяжкіх ланцугоў і VHH/нанацела
Бесклеточная сістэма экспрэсіі
Бесклеткавая экспрэсія выкарыстоўвае экспрэсію натуральнай або сінтэтычнай ДНК для дасягнення сінтэзу бялку in vitro, звычайна з выкарыстаннем сістэмы экспрэсіі E. coli. Ён хутка вырабляе бялкі і пазбягае метабалічнай і цітотоксіческой нагрузкі на клеткі пры вытворчасці вялікай колькасці рэкамбінантных бялкоў in vivo. Ён таксама можа вырабляць бялкі, якія цяжка сінтэзаваць, напрыклад, тыя, якія цяжка мадыфікаваць пасля трансляцыі, або сінтэзаваць мембранныя вавёркі.
01/
Распрацоўка тэрапеўтычных антыцелаў
Атрыманне моноклональных антыцелаў (mAbs).
Выпрацоўка биспецифических антыцелаў
Распрацоўка кан'югацыі антыцелаў (ADC).
200 +
Праект і рашэнне
02/
Імунатэрапія
Выяўленне кантрольных кропак
Клеткавая тэрапія CAR-T
03/
Распрацоўка вакцыны
04/
Мэтавая распрацоўка лекаў
Распрацоўка біяпадобных антыцелаў
800 +
Біяпадобныя антыцелы
05/
Выпрацоўка нейтралізуючых антыцелаў
-----Выпрацоўка нейтралізацыйных поліклональных антыцелаў
Нейтралізуючыя поликлональные антыцелы валодаюць высокай аффинностью і могуць распазнаваць некалькі эпитопов на антыгенах, узмацняючы тым самым іх здольнасць да звязвання з антыгенамі і выяўляючы высокую аффинность. Нейтралізуючыя поліклональныя антыцелы маюць шырокае прымяненне ў біямедыцынскіх даследаваннях, напрыклад, у даследаваннях функцый бялкоў, клеткавых сігнальных даследаваннях і вывучэнні патагенезу захворвання.
-----Выпрацоўка моноклональных антыцелаў нейтралізацыі
Нейтралізуючыя моноклональные антыцелы непасрэдна нейтралізуюць вірусныя часціцы, прадухіляючы пранікненне віруса ў клеткі і рэплікацыю, эфектыўна інгібіруючы распаўсюджванне і заражэнне вірусам і валодаючы высокай эфектыўнасцю і эфектыўнасцю. Нейтралізуючыя моноклональные антыцелы звычайна выкарыстоўваюцца для вывучэння вірусных эпітопаў і ўзаемадзеяння паміж вірусамі і клеткамі гаспадара, забяспечваючы тэарэтычную аснову для прафілактыкі вірусаў, кантролю і лячэння.
Leave Your Message
0102