Тэхналагічная платформа гібрыдом
«Альфа Лайфтэк» мае багаты вопыт у галіне распрацоўкі антыцелаў. За гады працы «Альфа Лайфтэк» стварыла комплексную платформу для распрацоўкі антыцелаў (у тым ліку распрацоўку манаклональных антыцелаў, полікланальных антыцелаў, рэкамбінантных манаклональных антыцелаў і іншыя паслугі па падрыхтоўцы і распрацоўцы антыцелаў).
«Альфа Лайфтэк» прадастаўляе кліентам якасныя прадукты і паслугі па ачыстцы антыцелаў і рэкамбінантных антыцелаў, а падрыхтаваныя антыцелы валодаюць высокай спецыфічнасцю і добрай стабільнасцю. Для ачысткі антыцелаў з розных крыніц, такіх як моноклональные антыцелы трусоў, авечак, курэй і мышэй, а таксама паслугі па афіннай ачыстцы бялкоў A/G і паслугі па падзеле антыцелаў, можна выкарыстоўваць розныя прыборы і абсталяванне для ачысткі.
Абапіраючыся на розныя метады падрыхтоўкі антыцелаў, такія як тэхналогія гібрыдомных клетак, Alpha Lifetech можа прадастаўляць індывідуальныя паслугі па падрыхтоўцы манаклональных і полікланальных антыцелаў розных відаў. Акрамя таго, можа быць прадастаўлены шэраг паслуг, ад высокапрадукцыйнага секвенавання, падрыхтоўкі антыцелаў, ачысткі антыцелаў да праверкі антыцелаў. Мы выбіраем метад ачысткі ў залежнасці ад канкрэтных мэтаў кліента. Абапіраючыся на комплексныя платформы, такія як платформа для распрацоўкі антыцелаў і бялковая платформа, Alpha Lifetech ахоплівае паслугі па вытворчасці антыцелаў, ачыстцы антыцелаў, высокапрадукцыйнаму секвенаванню антыцелаў, праверцы антыцелаў і іншыя тэхнічныя паслугі.
Гібрыдомная тэхналогія
Для атрымання монакланальных антыцелаў можна выкарыстоўваць гібрыдомную тэхналогію. Шляхам зліцця клетак селязёнкі імунізаваных мышэй з міеломнымі клеткамі людзей або мышэй утвараюцца гібрыдомныя клеткі, якія вылучаюць спецыфічныя антыцелы. Атрыманыя монакланальныя антыцелы, атрыманыя з мышэй, могуць быць выкарыстаны ў навуковых даследаваннях, такіх як імунаферментны аналіз, радыёімуналагічны аналіз, імунагістахімія, праточная цытаметрыя, ачыстка бялкоў і г.д. Узоры монакланальных антыцелаў ўключаюць асцыт, гібрыдомны супернатант і г.д. Узор, атрыманы шляхам увядзення гібрыдомных клетак у брушную поласць жывёл і выкарыстання фізіялагічнага асяроддзя брушной поласці жывёлы для выпрацоўкі антыцелаў, называецца асцытным узорам. Гібрыдомныя клеткі, уведзеныя ў брушную поласць жывёл, могуць размнажацца і вылучаць монакланальныя антыцелы, якія могуць назапашвацца ў асцыце. З-за магчымасці наяўнасці прымешак (жывёльных бялкоў, гармонаў і г.д.) у гэтых антыцелах патрабуецца ачыстка. Зыходзячы з сакрэтуючай функцыі В-лімфацытаў, монакланальныя антыцелы часта вылучаюцца ў культуральнае асяроддзе пры культываванні гібрыдомных клетак. Вадкасць, якая змяшчае монакланальныя антыцелы ў культуральным асяроддзі, называецца гібрыдомным супернатантам. Чысціня моноклональных антыцелаў у супернатанце адносна высокая, але для атрымання ў вялікіх маштабах патрабуецца дадатковая ачыстка, паколькі яны атрымліваюцца шляхам культывавання in vitro.
Ачыстка антыцелаў дазваляе вылучыць антыцелы высокай чысціні з комплексаў. У цяперашні час афінная ачыстка антыцелаў, а таксама падзел і ачыстка антыцелаў з'яўляюцца распаўсюджанымі метадамі ачысткі антыцелаў, у асноўным уключаючы ачыстку бялку A/G, іонаабменную храматаграфію, гель-фільтрацыю, асаджэнне і храматаграфію гідрафобнага ўзаемадзеяння. Сярод іх паслуга афіннай ачысткі бялку A/G шырока папулярная ў розных сферах прымянення ачысткі антыцелаў. Працэс падрыхтоўкі манаклональных антыцелаў кампаніяй Alpha Lifetech на аснове гібрыдомнай тэхналогіі паказаны на малюнку 1.
Мал.1 Дыяграма працэсу падрыхтоўкі манаклональных антыцелаў на аснове гібрыдомнай тэхналогіі.
Кан'югат антыцелаў і лекаў і тэхналогія гібрыдом
Кан'югат антыцелаў і лекаў (ADC) — гэта новы біялагічны агент, які хімічна злучае антыцелы з цытатаксічнымі прэпаратамі. Кан'югат антыцелаў і лекаў спалучае спецыфічную здольнасць антыцелаў да распазнавання з магутным знішчальным эфектам цытатаксічных прэпаратаў і дакладна дастаўляе цытатаксічныя прэпараты ў пухлінныя клеткі праз антыцелы, тым самым дасягаючы дакладнага лячэння. Частка антыцелаў у прэпаратах ADC часта атрымліваюць з дапамогай тэхналогіі гібрыдом або іншых метадаў вытворчасці антыцелаў, такіх як тэхналогія геннай інжынерыі антыцелаў. Тэхналогія гібрыдом забяспечвае высакаякасную сыравіну для антыцелаў для прэпаратаў ADC. Прэпараты ADC і моноклональные антыцелы, атрыманыя з дапамогай тэхналогіі гібрыдом, адыгрываюць важную ролю ў такіх галінах, як лячэнне раку. Іх можна выкарыстоўваць асобна або ў спалучэнні для павышэння тэрапеўтычнай эфектыўнасці.
Манаклональныя антыцелы, атрыманыя з дапамогай гібрыдомнай тэхналогіі, валодаюць высокай спецыфічнасцю, могуць дакладна звязвацца і распазнаваць спецыфічныя антыгены і могуць вырабляцца ў вялікіх маштабах. Дзякуючы тэхналогіі секвенавання гібрыдом, гены антыцелаў у клетках гібрыдом можна вылучыць і секвенаваць для атрымання адпаведных паслядоўнасцей, што карысна для наступнай экспрэсіі антыцелаў. Манаклональныя антыцелы, атрыманыя з дапамогай гібрыдомнай тэхналогіі, могуць быць выкарыстаны для выяўлення спецыфічных маркераў захворванняў, такіх як пухлінныя маркеры, вірусныя антыгены і г.д., што забяспечвае моцную падтрымку для ранняй дыягностыкі захворванняў. Акрамя таго, яны таксама могуць быць выкарыстаны ў такіх эксперыментах, як імунаблотынг і імунагістахімія, для вывучэння экспрэсіі, лакалізацыі, структуры і функцыі бялкоў.
тэхналогія гібрыдомы Вытворчасць антыцелаў Працоўны працэс абслугоўвання
| Крокі | Змест паслугі | Храналогія |
| Крок 1: Імунізацыя жывёл | (1) Імунізацыя жывёл 4 разы, бустарная імунізацыя 1 доза, усяго 5 доз імунізацыі. (2) Перад імунізацыяй была сабрана адмоўная сыроватка, і пасля чацвёртай дозы быў праведзены ІФА для вызначэння тытра сыроваткі. (3) Калі тытр антыцелаў у сыроватцы крыві пасля чацвёртай дозы адпавядае патрабаванням, за 7 дзён да здачы крыві будзе ўведзена адна дадатковая доза імунізацыі. Калі ён не адпавядае патрабаванням, будзе прадоўжана звычайная імунізацыя. (4) Кваліфікаваная патэнцыя, клеткі селязёнкі вылучаюць для зліцця клетак. | 10-12 тыдняў |
| Крок 2: Зліццё і скрынінг | (1) Зліццё: Пасля імунізацыі клеткі селязёнкі мышэй збіралі і злівалі з клеткамі міеломы. (2) Праліферацыя і скрынінг: Атрыманыя гібрыдомныя клеткі былі падвергнуты праліферацыі і скрынінгу метадам ELISA для атрымання высокаэфектыўных клонаў. | 6 тыдняў |
| Крок 3: Субклон | Субкланаванне 15-25 станоўчых матчыных клетак з выкарыстаннем метаду абмежаванага развядзення і, нарэшце, вызначэнне 10-15 станоўчых клонаў | 3-4 тыдні |
| Крок 4: Атрыманне асцыту і ачыстка антыцелаў | (1) Атрыманне асцыту: для атрымання асцыту ў мышэй выкарыстоўваецца 10-15 гібрыдомных штамаў (калі атрымана вялікая колькасць гібрыдомных штамаў, яны будуць адпраўлены ў клетачнай форме) (2) Ідэнтыфікацыя асцыту: выяўленне асцыту метадам ІФА, эфектыўнасць (бялок/вірус > 10^5, малая малекула/пептыд > 10^4) для далейшай ачысткі (3) Ачыстка бялку A/G: Ачыстка асцыту | 3-4 тыдні |
| Крок 5: Дастаўка | (1) Забяспечце 3-5 штамаў гібрыдомных моноклональных антыцелаў. (2) Кожная гібрыдомная клетка змяшчае 1 мг ачышчаных антыцелаў (ачыстка асцыту). (3) Справаздача аб эксперыментальным працэсе | 1 тыдзень |