Уводзіны ў бібліятэкі сінтэзаваных антыцелаў

Бібліятэка сінтэзаваных антыцелаў, таксама вядомая як бібліятэка De novo, — гэта сінтэтычны метад, які выкарыстоўвае такія метады, як сінтэз ДНК або фагавы дысплей, для распрацоўкі і сінтэзу поўных варыябельных абласцей антыцелаў, уключаючы каркасныя вобласці і CDR, без абапіраючыся на наіўныя бібліятэкі антыцелаў.

Бібліятэка паўсінтэтычных антыцелаў ствараецца шляхам спалучэння натуральных бібліятэк антыцелаў з сінтэтычнай разнастайнасцю. Звычайна гэта ўключае сінтэз алігануклеатыдаў ДНК для атрымання набору розных камплементарных вызначальных участкаў (CDR), якія затым аб'ядноўваюцца з пастаянным каркасам антыцелаў, атрыманым з прыродных крыніц, такіх як В-клеткі чалавека або жывёл. Сінтэзаваны CDR уносіць разнастайнасць у бібліятэку, у выніку чаго антыцелы накіраваны на шырокі спектр эпітопаў. Бібліятэка паўсінтэтычных антыцелаў забяспечвае кампраміс паміж натуральнай разнастайнасцю імуннай сістэмы і кантраляванай разнастайнасцю, дасягнутай з дапамогай сінтэтычных метадаў.

Розніца паміж наіўнымі і сінтэтычнымі бібліятэкамі антыцелаў залежыць ад крыніцы генаў імунаглабулінаў. Тым часам розніца паміж паўсінтэзаванай і сінтэзаванай бібліятэкай антыцелаў заключаецца ў тым, што першая складаецца з часткі сегментаў наіўных антыцелаў, такіх як лёгкі або цяжкі ланцуг, і толькі адзін з іх сінтэзуецца in vitro; у той час як сінтэзаваная бібліятэка цалкам атрымліваецца ў выніку штучнага сінтэзу з дапамогай ПЛР in vitro.

Альфа Лайфтэк можа забяспечыць

Кампанія «Альфа Лайфтэк»можа прапанаваць бібліятэку паўсінтэзаваных/сінтэзаваных антыцелаў жывёл і людзей на аснове нашай прафесійнай платформы для выяўлення антыцелаў. Дзякуючы шматгадоваму вопыту ў генетычнай мадыфікацыі і стварэнні бібліятэк, можна стварыць сінтэзаваныя бібліятэкі, здольныя вырабляць сінтэтычныя антыцелы з афіннасцю і спецыфічнасцю, якія перавышаюць магчымасці натуральных антыцелаў.Альфа ЛайфтэкЭксперты з гонарам паведамляюць, што мы можам гарантаваць высокі ўзровень поспеху ў стварэнні бібліятэкі антыцелаў, якая змяшчае 10^8 – 10^10 незалежных клонаў.

Кампанія «Альфа Лайфтэк»з гонарам прапануе комплексныя паслугі па стварэнні бібліятэк антыцелаў, каб задаволіць разнастайныя патрэбы даследчыкаў па ўсім свеце, у тым ліку антыцелы scFv, Fab, VHH і індывідуальныя бібліятэкі. Наша мэта — зразумець і задаволіць патрэбы розных кліентаў і дапамагчы ў вырашэнні любых будучых і новых праблем у даследчай працы.

Працэс будаўніцтва бібліятэк сінтэзаваных антыцелаў

Дызайн
Этап праектавання ўключае выбар каркасных структур антыцелаў і рэгіёнаў, якія вызначаюць камплементарнасць (CDR), на аснове існуючых паслядоўнасцей антыцелаў або структурных дадзеных. Сінтэтычныя CDR-антыцелы таксама могуць быць распрацаваны для ўвядзення спецыфічных функцыянальных магчымасцей або паляпшэння ўласцівасцей звязвання.

Сінтэз
Сінтэтычная ДНК, якая кадуе распрацаваныя паслядоўнасці антыцелаў, уключаючы як каркасныя вобласці, так і CDR, сінтэзуецца з выкарыстаннем хімічных або ферментатыўных метадаў.

Асамблея
Сінтэзаваныя фрагменты ДНК збіраюцца ў вектары экспрэсіі антыцелаў з выкарыстаннем такіх метадаў, як ПЛР, лігаванне або зборка па Гібсану. Затым гэтыя вектары можна ўводзіць у экспрэсійныя сістэмы, такія як бактэрыяльныя, дрожджавыя або млекакормячыя клеткі, для вытворчасці антыцелаў.

Адбор і адбор
Сканструяваныя бібліятэкі антыцелаў праходзяць скрынінг і адбор на наяўнасць антыцелаў з патрэбнымі ўласцівасцямі з выкарыстаннем метадаў высокапрадукцыйнага скрынінгу. У залежнасці ад фармату бібліятэкі і прымянення, гэта можа ўключаць такія метады, як фагавы дысплей, дысплей дрожджаў або дысплей рыбасом.

Паслуга па будаўніцтве бібліятэк сінтэзаваных антыцелаў

Кампанія «Альфа Лайфтэк»прадастаўляе кліентам універсальныя паслугі па распрацоўцы і сінтэзе бібліятэк антыцелаў шляхам лігіравання рэпертуараў генаў цяжкіх і лёгкіх ланцугоў V у фагавы вектар з выкарыстаннем сістэмы спецыфічнай рэкамбінацыі Cre-lox для стварэння рэпертуару Fab, якія адлюстроўваюцца на фагу, які складаецца з 6,5 × 10^10 клонаў. Бібліятэка дала антыцелы супраць шматлікіх антыгенаў, некаторыя з якіх мелі нанамалярную афіннасць. Стварэнне бібліятэкі чалавечых антыцелаў заснавана на тэхналогіі фагавага дысплея M13 (паказана на малюнку ніжэй).