Leave Your Message
слайд1

Платформа за разработване на антитела с фагов дисплей

Въз основа на цялостната конструкция на платформата за антитела, Alpha Lifetech може да предоставя технически услуги, от подготовка на антитела, пречистване на антитела, секвениране на антитела и др.

СВЪРЖЕТЕ СЕ С НАС
01

Платформа за разработване на антитела с фагов дисплей


Alpha Lifetech, с богатия си опит в проектите за откриване на антитела, може да предостави персонализирани услуги за моноклонални и поликлонални антитела за множество видове, както и услуги за изграждане на библиотеки с антитела и скрининг. Alpha Lifetech може да предостави на клиентите си качествени продукти с антитела и рекомбинантни антитела, както и съответните услуги за приготвяне на ефикасни, високо специфични и стабилни антитела. Чрез използване на всеобхватни платформи за антитела и инженеринг на антитела, ние предоставяме услуги, обхващащи производството на антитела нагоре и надолу по веригата, включително технически услуги като подготовка на антитела, пречистване, секвениране на антитела и валидиране.

Alpha Lifetech разполага с развита платформа за откриване на антитела, която предоставя на клиентите набор от услуги, включително имунитет при животни, изграждане и скрининг на библиотеки с антитела за фагов дисплей, секвениране на антитела, експресия на антитела, пречистване на антитела, валидиране на антитела и маркиране на антитела, базирани на хибридомна технология, технология на единични B клетки, технология на фагов дисплей и други. Alpha Lifetech разполага със стандартна производствена линия и в допълнение към услугите за подготовка на антитела, могат да се предоставят и поддържащи услуги като хуманизиране на антитела, афинитетно узряване на антитела, проектиране и разработване на лекарства с ADC и последващ дизайн на CAR-T секвенции. В същото време Alpha Lifetech е изградила библиотека с антитела, базирана на платформи с технология за фагов дисплей M13, T4 и T7, с капацитет за съхранение до 10^8-10^9. Честотата на положителни мутации, честотата на вмъкване и разнообразието на библиотеката могат да достигнат над 90%.

Технология за фагов дисплей

Производството на моноклонални антитела първоначално е било осъществено с помощта на технология за хибридомни моноклонални антитела за получаване на миши хибридомни моноклонални антитела. По-конкретно, чрез сливане на клетки от далак от имунизирани мишки с миеломни клетки от хора или мишки се образуват хибридомни клетки, които секретират специфични хибридомни моноклонални антитела. Чрез хуманизирана модификация на миши моноклонални антитела и генно инженерна модификация на антителата, за да им се придаде постоянен човешки имуноглобулинов регион, тяхната имуногенност може да бъде намалена. Инженерството на моноклонални антитела се използва широко в биомедицинските и клиничните приложения.

Alpha Lifetech може да предостави услуги за цялостно инженерство на антитела, от проектиране на протоколи за предклинични изследвания до откриване на конюгати на антитела и лекарства (ADC) и валидиране върху животни. Конюгатите на антитела и лекарства (ADC) могат да доставят химиотерапевтични лекарства до раковите клетки. След свързване със специфични мишени, експресирани върху раковите клетки, ADC освобождава цитотоксични лекарства в раковите клетки. Alpha Lifetech може също да предостави на клиентите си цялостни услуги за афинитетно зреене на антитела. С усъвършенствана оптимизация на мутации и високопроизводителна технология за скрининг на фагов дисплей, антитела с определен афинитет първо се скринират, а след това се въвеждат аминокиселинни мутации, за да се генерират различни варианти. Впоследствие, антитела с висок афинитет бяха оценени и скринирани с помощта на скринингови техники. След множество кръгове на оптимизация и структурен анализ, в крайна сметка бяха получени антитела с по-висок афинитет и по-силна специфичност.

Alpha Lifetech може да конструира различни видове фагови дисплейни библиотеки с антитела, включително имунни библиотеки, естествени библиотеки, полусинтетични библиотеки и синтетични библиотеки. Въз основа на високия капацитет на антителните библиотеки могат да се получат високоспецифични антитела. Могат да се осигурят множество фагемидни вектори като pMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, както и щамове като TG1 E. coli, XL1 Blue и ER2738. В допълнение към капацитета на библиотеката до 10^9, скоростта на вмъкване на целеви фрагменти в библиотеката също е висока, което създава достатъчни условия за скрининг на антитела, които удовлетворяват клиентите. Блок-схемата на услугата за подготовка на антитела на Alpha Lifetech, базирана на технология за фагов дисплей, е показана на Фигура 1.

фагов дисплей - Alpha Lifetech
Фиг.1 Диаграма на процеса за приготвяне на моноклонални антитела, базирани на технология за фагов дисплей.

Работен процес за производство на антитела чрез фагов дисплей

Стъпки Съдържание на услугата Хронология
Стъпка 1: Имунизация на животни
(1) Имунизация на животни 4 пъти, бустерна имунизация 1 доза, общо 5 имунизирани дози.
(2) Събран е отрицателен серум преди имунизация и е извършен ELISA тест за откриване на серумния титър при четвъртата доза.
(3) Ако титърът на серумните антитела от четвъртата доза отговаря на изискванията, ще бъде приложена една допълнителна доза имунизация 7 дни преди вземането на кръв. Ако не отговаря на изискванията, рутинната имунизация ще продължи.
(4) Квалифицирана ефикасност, вземане на кръв и отделяне на моноцити
10 седмици
Стъпка 2: Приготвяне на кДНК
(1) Екстракция на тотална РНК от PBMC (комплект за екстракция на РНК)
(2) Висококачествена RT-PCR подготовка на кДНК (комплект за обратна транскрипция)
1 ден
Стъпка 3: Изграждане на библиотека с антитела
(1) Използвайки кДНК като матрица, гените бяха амплифицирани чрез два кръга PCR.
(2) Фагово конструиране и трансформация: генно сплайсинг на фагемиден вектор, електропорационна трансформация на TG1 гостоприемни бактерии, конструиране на библиотека с антитела.
(3) Идентификация: Случайно избрани 24 клона, процент на положителна PCR идентификация + процент на вмъкване.
(4) Асистирана подготовка на фаги: амплификация + пречистване на фаги M13.
(5) Спасяване на библиотека с фагов дисплей
3-4 седмици
Стъпка 4: Скрининг на библиотека с антитела (3 кръга)
(1) Стандартен 3-кръгов скрининг (твърдофазен скрининг): скрининг под налягане за отстраняване на неспецифични антитела в максимална възможна степен.
(2) Амплификация на единичен клон, селектиран бактериофаг + IPTG индуцирана експресия + ELISA детекция на положителни клонове.
(3) Всички положителни клонове бяха селектирани за генно секвениране.
4-5 седмици

Предимство на технологията за фагов дисплей

Alpha Lifetech има богат опит в областта на разработването на антитела. През годините Alpha Lifetech е изградила цялостна платформа за разработване на антитела.

реклама01

Услуги за поддръжка

Можем да предоставим различни услуги за изграждане на имунни библиотеки на животинска основа и услуги за скрининг на библиотеки с естествени антитела според нуждите на клиента.

реклама02

Множество цели

Предлагат се услуги за откриване на множество целеви антитела: протеини, пептиди, малки молекули, вируси, мембранни протеини, иРНК и др.

реклама03

Множество вектори

Персонализирана услуга за изграждане на библиотеки, ние можем да предоставим различни бактериофагни вектори, включително PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, и да ги модифицираме според нуждите на клиента.

adv04-1

Платформа за възрастни

Капацитетът за съхранение може да достигне 10^8-10^9, скоростите на вмъкване са над 90%, а афинитетът на антителата, получени чрез скрининг, обикновено е на ниво nM/pM.

Свързана УСЛУГА

Стратегии за разработване на множество антитела

разработване на моноклонални антитела - Alpha Lifetech

Услуга за разработване на моноклонални антитела

Можем да предоставим висококачествени, високочисти и високоспецифични услуги за разработване на моноклонални антитела, включително производството на миши моноклонални антитела и заешки моноклонални антитела.

хибридомни клетки - Alpha Lifetech

Технологична платформа за хибридоми

Включително програма за имунизация, услуги за приготвяне на антитела, пречистване на антитела, високопроизводително секвениране на антитела, валидиране на антитела и др.

скрининг на B-клетки - Alpha Lifetech

Платформа за сортиране на единични B-клетки

Alpha Lifetech има предимства по отношение на времето за скрининг и получаването на висококачествени антитела. Може да осигури дизайн, синтез и модификация на антигени, животински имунитет, скрининг за обогатяване на единични B-клетки, секвениране на единични клетки.

фагов дисплей - Alpha Lifetech

Платформа за разработване на антитела с фагов дисплей

Alpha Lifetech може да предостави технически услуги за разработване на антитела с фагов дисплей, от подготовка на антитела, пречистване на антитела, секвениране на антитела и др.

Ако имате някакви въпроси, моля, не се колебайте да се свържете с нас по всяко време.

Leave Your Message

Препоръчана услуга

0102