Платформа за разработване на антитела на фагов дисплей

Въз основа на цялостната конструкция на платформена система на платформа за антитела, Alpha Lifetech може да предостави технически услуги от подготовка на антитела, пречистване на антитела, секвениране на антитела и др.

СВЪРЖЕТЕ СЕ С НАС

Платформа за разработване на антитела на фагов дисплей

Alpha Lifetech, със своя богат проектен опит в откриването на антитела, може да предостави персонализирани услуги за моноклонални и поликлонални антитела за множество видове, както и изграждане на библиотека с антитела и услуги за скрининг. Alpha Lifetech може да предостави на клиентите продукти с антитела и рекомбинантни антитела с гарантирано качество, както и съответните услуги за изготвяне на ефективни, високо специфични и стабилни антитела. Чрез използването на всеобхватни платформи за антитела и инженеринг на антитела, ние предоставяме услуги, обхващащи нагоре и надолу по веригата на производството на антитела, включително технически услуги като подготовка на антитела, пречистване, секвениране на антитела и валидиране.

Alpha Lifetech разполага със зряла платформа за откриване на антитела, която предоставя на клиентите набор от услуги, включително имунитет на животни, конструиране и скрининг на библиотека с антитела на фагов дисплей, секвениране на антитела, експресия на антитела, пречистване на антитела, валидиране на антитела и етикетиране на антитела на базата на хибридомна технология, технология за единични В клетки, технология за фагово показване и др. Alpha Lifetech разполага със стандартна производствена линия и в допълнение към услугите за подготовка на антитела могат да бъдат предоставени и поддържащи услуги като хуманизиране на антитела, съзряване на афинитета на антитела, дизайн и разработване на лекарства за ADC и проектиране на последваща последователност на CAR-T. В същото време Alpha Lifetech конструира библиотека с антитела, базирана на M13, T4 и T7 технологични платформи за показване на фаги, с капацитет за съхранение до 10^8-10^9. Положителният процент, процентът на вмъкване и разнообразието на библиотеката могат да достигнат над 90%.

Технология на фагов дисплей

Производството на моноклонални антитела първоначално беше подготвено с помощта на технология за хибридомни моноклонални антитела за производство на миши хибридомни моноклонални антитела. По-специално, чрез сливане на клетки от далак от имунизирани мишки с миеломни клетки от хора или мишки, се образуват хибридомни клетки, които отделят специфични хибридомни моноклонални антитела. Чрез хуманизирана модификация на миши моноклонални антитела и генно инженерна модификация на антителата, за да им се даде постоянен човешки имуноглобулин регион, тяхната имуногенност може да бъде намалена. Създаването на моноклонални антитела се използва широко в биомедицински и клинични приложения.

Alpha Lifetech може да предостави услуги за инженеринг на антитела на едно гише от проектиране на протокол за предклинични изследвания до откриване на конюгати на антитела с лекарства (ADC) и валидиране на животни. Конюгатите на лекарства с антитела (ADC) могат да доставят химиотерапевтични лекарства до раковите клетки. След свързване със специфични цели, експресирани върху раковите клетки, ADC освобождава цитотоксични лекарства в раковите клетки. Alpha Lifetech може също да предостави на клиентите цялостни услуги за съзряване на афинитета на антитела. С усъвършенствана оптимизация на мутациите и високопроизводителна технология за скрининг на фагов дисплей, антитела с определен афинитет първо се скринират и след това се въвеждат аминокиселинни мутации, за да се генерират различни варианти. Впоследствие антителата с висок афинитет бяха оценени и скринирани чрез скрининг техники. След множество кръгове на оптимизация и структурен анализ, в крайна сметка бяха получени антитела с по-висок афинитет и по-силна специфичност.

Alpha Lifetech може да конструира различни видове библиотеки за показване на фаги на антитела, включително имунни библиотеки, собствени библиотеки, полусинтетични библиотеки и синтетични библиотеки. Въз основа на високия капацитет на библиотеките с антитела могат да се получат високо специфични антитела. Могат да бъдат предоставени множество фагемидни вектори като pMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, както и щамове като TG1 E. coli, XL1 Blue и ER2738. В допълнение към капацитета на библиотеката до 10^9, скоростта на вмъкване на целеви фрагменти на библиотеката също е висока, създавайки достатъчни условия за скрининг на антитела, които удовлетворяват клиентите. Диаграмата на услугата за подготовка на антитела на Alpha Lifetech, базирана на технологията за фагов дисплей, е показана на Фигура 1.

Фиг.1 Диаграма на процеса за приготвяне на моноклонални антитела на базата на технология за фагов дисплей.

Работен процес за производство на антитела на фагов дисплей

стъпки	Съдържание на услугата	Хронология
Стъпка 1: Имунизация на животните	(1) Имунизация на животните 4 пъти, бустер имунизация 1 доза, общо 5 имунизирани дози. (2) Беше събран отрицателен серум преди имунизацията и беше извършен ELISA на четвъртата доза за откриване на серумния титър. (3) Ако титърът на серумните антитела на четвъртата доза отговаря на изискванията, една допълнителна доза имунизация ще бъде приложена 7 дни преди вземането на кръв. Ако не отговаря на изискванията, ще продължи рутинната имунизация. (4) Квалифицирана ефективност, вземане на кръв и отделяне на моноцити	10 седмици
Стъпка 2: Приготвяне на cDNA	(1) PBMC тотална екстракция на РНК (комплект за екстракция на РНК) (2) Високопрецизен RT-PCR препарат на cDNA (комплект за обратна транскрипция)	1 ден
Стъпка 3: Изграждане на библиотека с антитела	(1) Използвайки cDNA като матрица, гените бяха амплифицирани чрез два кръга на PCR. (2) Фагово конструиране и трансформация: генно снаждане на фагемиден вектор, електропорационна трансформация на TG1 гостоприемни бактерии, конструиране на библиотека с антитела. (3) Идентификация: Произволно изберете 24 клонинга, положителен процент на PCR идентификация + процент на вмъкване. (4) Приготвяне на асистиран фаг: амплификация на фаг M13+пречистване. (5) Спасяване на библиотека с фагов дисплей	3-4 седмици
Стъпка 4: Скрининг на библиотека с антитела (3 кръга)	(1) Стандартен 3-кръгов скрининг (твърдофазов скрининг): скрининг под налягане за отстраняване на неспецифични антитела до максималната възможна степен. (2) Избран бактериофаг за амплификация на единичен клон+IPTG индуцирана експресия+ELISA откриване на положителни клонове. (3) Всички положителни клонове бяха избрани за генно секвениране.	4-5 седмици

Предимство на технологията за показване на фаги

Alpha Lifetech има богат опит в областта на разработването на антитела. През годините Alpha Lifetech създаде цялостна платформа за разработване на антитела.

Услуги за поддръжка

Ние можем да предоставим различни услуги за изграждане на имунни библиотеки на базата на животни и услуги за скрининг на библиотека с естествени антитела според нуждите на клиента

Множество цели

Предлагат се услуги за откриване на множество целеви антитела: протеини, пептиди, малки молекули, вируси, мембранни протеини, иРНК и др.

Множество вектори

Персонализирана услуга за изграждане на библиотека, ние можем да предоставим различни бактериофагни вектори, включително PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, и да ги модифицираме според нуждите на клиента

Зряла платформа

Капацитетът за съхранение може да достигне 10 ^ 8-10 ^ 9, нивата на вмъкване са над 90%, а афинитетът на антителата, получени чрез скрининг, обикновено е на ниво nM pM

Свързана УСЛУГА

Множество стратегии за развитие на антитела

Служба за разработване на моноклонални антитела

Технологична платформа Hybridoma

Платформа за сортиране на единични B клетки

Платформа за разработване на антитела на фагов дисплей

разработване на моноклонални антитела-Alpha Lifetech

Служба за разработване на моноклонални антитела

Ние можем да предоставим висококачествени, високочисти и високоспецифични услуги за разработване на моноклонални антитела, включително производство на миши моноклонални антитела и заешки моноклонални антитела

Технологична платформа Hybridoma

Включително програма за имунизация, услуги за подготовка на антитела, пречистване на антитела, високопроизводително секвениране на антитела, валидиране на антитела и др.

Платформа за сортиране на единични B клетки

Alpha Lifetech има предимства във времето за скрининг и получаване на висококачествени антитела. Той може да осигури антигенен дизайн, синтез и модификация, животински имунитет, скрининг за обогатяване на единични B клетки, секвениране на единични клетки.