Платформа за разработване на антитела с фагов дисплей
Технология за фагов дисплей

Работен процес за производство на антитела чрез фагов дисплей
| Стъпки | Съдържание на услугата | Хронология |
|---|---|---|
| Стъпка 1: Имунизация на животни | (1) Имунизация на животни 4 пъти, бустерна имунизация 1 доза, общо 5 имунизирани дози. (2) Събран е отрицателен серум преди имунизация и е извършен ELISA тест за откриване на серумния титър при четвъртата доза. (3) Ако титърът на серумните антитела от четвъртата доза отговаря на изискванията, ще бъде приложена една допълнителна доза имунизация 7 дни преди вземането на кръв. Ако не отговаря на изискванията, рутинната имунизация ще продължи. (4) Квалифицирана ефикасност, вземане на кръв и отделяне на моноцити | 10 седмици |
| Стъпка 2: Приготвяне на кДНК | (1) Екстракция на тотална РНК от PBMC (комплект за екстракция на РНК) (2) Висококачествена RT-PCR подготовка на кДНК (комплект за обратна транскрипция) | 1 ден |
| Стъпка 3: Изграждане на библиотека с антитела | (1) Използвайки кДНК като матрица, гените бяха амплифицирани чрез два кръга PCR. (2) Фагово конструиране и трансформация: генно сплайсинг на фагемиден вектор, електропорационна трансформация на TG1 гостоприемни бактерии, конструиране на библиотека с антитела. (3) Идентификация: Случайно избрани 24 клона, процент на положителна PCR идентификация + процент на вмъкване. (4) Асистирана подготовка на фаги: амплификация + пречистване на фаги M13. (5) Спасяване на библиотека с фагов дисплей | 3-4 седмици |
| Стъпка 4: Скрининг на библиотека с антитела (3 кръга) | (1) Стандартен 3-кръгов скрининг (твърдофазен скрининг): скрининг под налягане за отстраняване на неспецифични антитела в максимална възможна степен. (2) Амплификация на единичен клон, селектиран бактериофаг + IPTG индуцирана експресия + ELISA детекция на положителни клонове. (3) Всички положителни клонове бяха селектирани за генно секвениране. | 4-5 седмици |
Услуги за поддръжка
Можем да предоставим различни услуги за изграждане на имунни библиотеки на животинска основа и услуги за скрининг на библиотеки с естествени антитела според нуждите на клиента.
Множество цели
Предлагат се услуги за откриване на множество целеви антитела: протеини, пептиди, малки молекули, вируси, мембранни протеини, иРНК и др.
Множество вектори
Персонализирана услуга за изграждане на библиотеки, ние можем да предоставим различни бактериофагни вектори, включително PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, и да ги модифицираме според нуждите на клиента.
Платформа за възрастни
Капацитетът за съхранение може да достигне 10^8-10^9, скоростите на вмъкване са над 90%, а афинитетът на антителата, получени чрез скрининг, обикновено е на ниво nM/pM.
Услуга за разработване на моноклонални антитела
Можем да предоставим висококачествени, високочисти и високоспецифични услуги за разработване на моноклонални антитела, включително производството на миши моноклонални антитела и заешки моноклонални антитела.
Технологична платформа за хибридоми
Включително програма за имунизация, услуги за приготвяне на антитела, пречистване на антитела, високопроизводително секвениране на антитела, валидиране на антитела и др.
Платформа за сортиране на единични B-клетки
Alpha Lifetech има предимства по отношение на времето за скрининг и получаването на висококачествени антитела. Може да осигури дизайн, синтез и модификация на антигени, животински имунитет, скрининг за обогатяване на единични B-клетки, секвениране на единични клетки.
Платформа за разработване на антитела с фагов дисплей
Alpha Lifetech може да предостави технически услуги за разработване на антитела с фагов дисплей, от подготовка на антитела, пречистване на антитела, секвениране на антитела и др.






16.07.2018 г. 

