Платформа за фагов дисплей с пептидна библиотека
Базирайки се на технологията за фагов дисплей, Alpha Lifetech може да предостави на клиентите си висококачествени услуги за изграждане и скрининг на библиотеки с пептиди за фагов дисплей.
СВЪРЖЕТЕ СЕ С НАС01
Платформа за фагов дисплей с пептидна библиотека
Базирана на технологията за фагов дисплей, Alpha Lifetech може да предостави на клиентите си висококачествени услуги за изграждане и скрининг на библиотеки с пептиди за фагов дисплей, включително линейни 7-пептидни библиотеки, линейни 9-пептидни библиотеки, линейни 10-пептидни библиотеки, линейни 15-пептидни библиотеки, линейни 12-пептидни библиотеки, циклични 7-пептидни библиотеки и други пептидни библиотеки. Разнообразието на библиотеките, процентът на вмъкване и положителният процент могат да достигнат над 90%, за да отговорят на различните нужди на различните клиенти за библиотеки с пептиди за фагов дисплей.
Фаговите дисплейни библиотеки се използват широко в биомедицинските изследвания и приложения. Например, в инженерството на антитела и разработването на антитела, фаговите дисплейни библиотеки могат да се използват за скрининг и подобряване на варианти на антитела; при скрининг на лекарства и откриване на лекарствени мишени, фаговите дисплейни библиотеки могат да се използват за търсене на протеини или пептиди с лекарствен потенциал. В изследванията на ваксини, фаговите дисплейни библиотеки могат да се използват за селекция на ваксинни антигени и разработване на ваксини. Освен това, фаговите дисплейни библиотеки могат да се използват и в много области, като например изследвания на взаимодействията на протеини, диагностика и лечение на рак.
Технология за фагов дисплей
Технологията за фагов дисплей е технология, която слива гена на целевия протеин с гена на повърхностния протеин на фага и прави целевия протеин присъстващ на повърхността на фага под формата на слят протеин чрез генна експресия. Тези протеини, показани на повърхността на фага, могат да поддържат относителна пространствена структура и биологична активност и могат да бъдат скринирани, открити и разпознати чрез взаимодействие със специфични антитела или други молекули. Обектите на показване на технологията за фагов дисплей включват антитяло, фрагмент от антитяло, пептиден сегмент, кДНК и др.
Системата за фагов дисплей включва главно M13 фагова дисплейна система (като PⅢ дисплейна система, PⅧ дисплейна система и др.), λ фагова дисплейна система, T4 фагова дисплейна система, T7 фагова дисплейна система и др. Всяка от тези системи има свои собствени характеристики и е подходяща за различни изследователски нужди. Поради своите лизогенни свойства, M13 фагът не лизира гостоприемната клетка след инфектирането ѝ, което му позволява непрекъснато да репликира и експресира чужди фрагменти в гостоприемната клетка, подходящи за дългосрочен скрининг и стабилна експресия. Поради краткия си жизнен цикъл и високата ефективност на репликация, T7 фагът може бързо да произведе голям брой потомствени фаги, което е подходящо за високопроизводителен скрининг и бърза експресия.
| M13 фаг | Т7 фаг | |
|---|---|---|
| 1. Морфологична структура | Филаментен фаг | Полиедричен фаг |
| 2. Генетичен материал | Кръгова едноверижна ДНК молекула | Линейна, двуверижна, терминално излишна ДНК |
| 3. Репликация и инфекция | Лизогенните фаги, събрани в периплазма, могат да бъдат секретирани от бактериалните мембрани, без да лизират клетките гостоприемници. | Вирулентните фаги, потомство на фаги, събрани в бактериалната цитоплазма, се освобождават чрез лизис на клетъчната мембрана. |
| 4. Система за показване | Конструирана е дисплейна система, използваща капсидни протеини pIII и PVIII, подходяща за показване на чужди пептиди/протеини с различни размери. | Системата за показване е конструирана с 10B капсиден протеин, който не изисква процес на секреция и е подходящ за показване на пептиди/протеини, които имат инхибиторен ефект върху процеса на секреция. |
| 5. Предимство на приложението | Подходящ е за показване и дългосрочен скрининг на пептиди с малки молекули. | Той има предимства в бързата експресия и високопроизводителния скрининг на макромолекулни протеини. |
Видове библиотеки с пептиди за фагов дисплей
Alpha Lifetech има опит в изграждането и скрининга на пептидни библиотеки за фагов дисплей и разполага с разнообразие от типове пептидни библиотеки, от които да избирате. Според дължината на пептида, той може да бъде разделен на 7 пептидни библиотеки, 9 пептидни библиотеки, 10 пептидни библиотеки, 12 пептидни библиотеки и 15 пептидни библиотеки. Според пространствената конформация на полипептидите, той може да бъде разделен на линейна фагова пептидна библиотека и циклична фагова пептидна библиотека.
Линейна фагова пептидна библиотека
Пептидният ген се вмъква в кодиращия регион на обвивния протеин на фаговия геном, обикновено pIII или PVIII, и се представя като линейна права верига. Линейните пептиди с линейна верига могат лесно да се разградят in vivo и тяхната способност за свързване и стабилност могат да бъдат засегнати.
библиотека от циклични фагови пептиди
Модифицираният пръстенен пептид ще образува фиксирана конформация под действието на дисулфидни връзки или други свързващи връзки, което не само значително ще подобри метаболитната стабилност и бионаличността, но и ще отговори по-добре на изискванията за свързване на конформацията рецептор-лиганд (антитяло-антиген).
Процес на библиотека с пептиди за фагов дисплей
Селекция на фаги
Фаги от тип M13 или фаги от тип T7 обикновено се избират като носители.
Изграждане на библиотека с пептиди за фагов дисплей
Конструиране на фагов вектор, способен да съдържа кодираща последователност на чужд протеин или полипептид, която обикновено включва промотор, селективни маркери и подходящи регулаторни елементи. Вмъкването на кодиращата последователност на чужд протеин или пептид във фагов носител, обикновено чрез методи на рязане и лигиране с рестрикционни ензими. Конструираният фагов вектор се трансформира в клетката гостоприемник, което позволява на фага да репликира и експресира чужди протеини или пептиди в клетката. Фагови библиотеки, съдържащи множество различни чужди протеини или пептиди, се приготвят чрез обширна трансформация и амплификация.
Скрининг на пептидна библиотека с фагов дисплей
Фиксирайте целевите молекули (като протеини, рецептори или антитела) върху твърдофазен носител. Инкубирайте конструираната фагова пептидна библиотека с фиксирана мишена, за да позволите на пептидите върху фага да се свържат с целевата молекула. По време на този процес несвързаните бактериофаги се отстраняват чрез промиване, като се запазват бактериофагите, които се свързват с мишената, а бактериофагите с висок афинитет се елуират. Възстановените бактериофаги се амплифицират чрез инфектиране на Escherichia coli и след това се подлагат на следващия кръг на скрининг. Обикновено са необходими 3-5 кръга на скрининг, за да се получат пептиди с висока ефективност на свързване.
Дизайн и синтез на пептиди
Синтезирайте пептиди въз основа на скринингови сайтове.
Фиг.1 Конструиране и процес на скрининг на библиотека с фагови пептиди
Платформа за изграждане на библиотека с пептиди за фагов дисплей
Alpha Lifetech разполага с редица технологии за изграждане на пептидни библиотеки. Ние предлагаме основно услуги за изграждане на T7 пептидни библиотеки и M13 пептидни библиотеки според фаговите типове.
ПРОЧЕТЕТЕ ОЩЕ
Платформа за скрининг на библиотека с пептиди за фагов дисплей
Alpha Lifetech има богат опит в скрининга на пептидни фагови библиотеки, предоставяйки силна техническа подкрепа за откриване на лекарства с малки молекули, клинична диагностика, лечение на заболявания и биологични изследвания.
ПРОЧЕТЕТЕ ОЩЕ 
Ако имате някакви въпроси, моля, не се колебайте да се свържете с нас по всяко време.
Leave Your Message
0102