Система за фагов дисплей
Alpha Lifetech е изградила перфектна стабилна система за фагово показване, която спестява време за научни изследвания или проектни изследвания и улеснява последващото производство.
СВЪРЖЕТЕ СЕ С НАС01
Система за фагов дисплей
Alpha Lifetech е силно ангажирана с технологията за фагов дисплей в продължение на много години. Alpha Lifetech е изградила перфектна стабилна платформа за фагов дисплей, която спестява време за научни изследвания или проектни изследвания и улеснява последващото производство. Предлагаме множество системи за фагов дисплей, от които клиентите могат да избират, включително M13 фаг, T7 фаг, T4 фаг и λ фаг. В зависимост от вашите експериментални нужди, можете да изберете подходящата система за фагов дисплей. Alpha Lifetech може също да предостави на клиентите услуги като производство на vhh антитела, scfv антитела и Fab антитела.
Въведение във фаговия дисплей
Технологията на фагов дисплей е техника, която използва фаги (вирус, който заразява бактерии), за да търси функционално свързващи молекули на специфични протеини или пептиди. Техниките за изграждане на библиотеки с фагови антитела включват изграждане на библиотеки с Fab антитела, scFv антитела, vhh антитела и др. Според видовете бактериофаги, те могат да бъдат разделени на бактериофаг m13, T7 бактериофаг, T4 бактериофаг, λ бактериофаг и други бактериофаги. Според вида на библиотеката, тя може да бъде разделена на библиотека със случайни пептиди, cDNA библиотека, библиотека с антитела и протеинова библиотека. Технологията на фагов дисплей е лесна за работа и евтина за употреба и включва Fab фагов дисплей, scfv фагов дисплей и vhh фагов дисплей. Тази техника обаче ограничава разнообразието от молекулярна генетика в библиотеката, тъй като не може да експресира твърде дълги последователности.
Технологията за фагов дисплей е способна да формира физическа връзка между показваната молекула и ДНК последователността, кодираща показваната молекула, а аминокиселинната последователност на специфичен конюгат може да бъде определена мигновено чрез ДНК секвениране на желания фрагмент във фаговия геном.
В момента технологията за фагов дисплей се използва широко. Сред тях има значителни постижения в изследването и разработването на нови ваксини (евтини и ефикасни синтетични ваксини), разработването на антителни лекарства (скрининг на ензимни инхибитори), клетъчната сигнална трансдукция (скрининг на симулирани епитопи) и изследването на антигенни епитопи (приготвяне на моноклонални антитела).
Принцип на фаговия дисплей
Фаговият дисплей е молекулярна технология, базирана на генетична модификация на фагова ДНК, която свързва целевия фрагмент с фаговия обвиващ протеин и по този начин го експресира на повърхността на фага. Чуждата ДНК последователност се въвежда на специфично място в нуклеотидната последователност на фаговия геном, което кодира фагов обвиващ протеин (фиг.1).
Когато възникне фагова инфекция, фаговият ген започва да се експресира в бактериалния гостоприемник и вмъкнатият целеви фрагмент се показва на повърхността на фага като комбинация от свързания ген, кодиращ обвивния протеин, и клонираната последователност.
Фиг.1 Архитектура на вириона на бактериофаг M13 и принцип на технологията на фагов дисплей.(Източник: Фагов дисплей и други технологии за пептиден дисплей | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Системи за фагов дисплей
Филаментозните фаги са най-често използваната система за фагов дисплей, а системите за фагов дисплей могат да бъдат конструирани с помощта на други фаги. Такива системи могат да показват относително големи пептиди или да скринират кДНК библиотеки по-ефективно от системите, базирани на филаментозни фаги.
Фиг. 2 Видове бактериофаги, използвани във фаговия дисплей.(Източник: Фагов дисплей и други технологии за пептиден дисплей | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Предимство на системата за фагов дисплей
Системите за фагов дисплей обикновено използват нишковидни фаги, включително M13, fd и f1. В сравнение с фагите M13, фагите T7 бактериофаги са съставени от двуверижна ДНК, която показва по-голяма стабилност и е по-малко склонна към мутации по време на репликация. Фагът T7, като носител, расте бързо и може да образува плаки в рамките на 3 часа, което спестява много време за клониране и скрининг.
Конструирането на T7 фагови библиотеки е използвано за повърхностна и неповърхностна генна експресия и за конструиране на дисплейни библиотеки от пептиди, кДНК, геномна ДНК и антитела. Това позволява T7 фагът да се използва не само като антимикробен агент, но и за скрининг на лекарствени мишени при скрининг на органи (като мозък, черен дроб и бял дроб), скрининг на мишени за разпознаване на антитела, изследвания на физиологични механизми и др. Той може да се използва и за диагностициране и лечение на различни заболявания.
Други форми на бактериофаги
Селективно инфекциозен фаг
За разлика от традиционния фагов дисплей, селективният инфекциозен фаг (SIP) свързва взаимодействията между производствения протеин и лиганд директно с фаговата инфекция и експанзия, без да са необходими стъпки на елуиране.
Фиг. 3 Селективно инфекциозен фаг (SIP).(Източник: Фагов дисплей и други технологии за пептиден дисплей | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Ландшафтни фаги
Ландшафтните фаги се причиняват от хиляди копия на чужди пептиди, разположени около тръбни капсиди в свръхплътни повтарящи се модели, а поливалентното им представяне води до селекция с висок афинитет, така че е невъзможно да се направи разлика между висок и нисък афинитет на пептидните лиганди.
Фиг. 4 Идеята за ландшафтните фаги. (Източник: Фагов дисплей и други технологии за пептиден дисплей | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Системи за множество фагови дисплеи
M13 фаг, T7 фаг, T4 фаг, λ фагова дисплейна система, от която клиентите да избират.
Високопроизводителна скринингова способност
Можем да използваме фагови дисплейни системи, за да изградим бързо мащабни фагови библиотеки и да постигнем високопроизводителни скринингови експерименти.
Персонализирана услуга за фагов дисплей
Клиентите могат да персонализират комплексни услуги според изискванията на проекта, като например скрининг на антитела с висок афинитет и др.
Широк обхват на приложение
Прилага се в области като инженерство на антитела, пептидно и протеиново инженерство, откриване и разработване на лекарства, изследвания на взаимодействията на протеини и др.
Ако имате някакви въпроси, моля, не се колебайте да се свържете с нас по всяко време.
Leave Your Message
16.07.2018 г. 
0102