অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিং কী?

অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের সাহায্যে, অ্যান্টিবডিগুলির আণবিক আকার, ফার্মাকোকাইনেটিক্স, ইমিউনোজেনিসিটি, বাঁধাইয়ের সখ্যতা, নির্দিষ্টতা এবং প্রভাবক কার্যকারিতা পরিবর্তন করা সম্ভব হয়েছে। অ্যান্টিবডি সংশ্লেষণের পরে, অ্যান্টিবডিগুলির নির্দিষ্ট বাঁধাই তাদের ক্লিনিকাল রোগ নির্ণয় এবং চিকিৎসায় অত্যন্ত মূল্যবান করে তোলে। অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের মাধ্যমে, তারা ওষুধ এবং ডায়াগনস্টিক প্রাথমিক বিকাশের চাহিদা পূরণ করতে পারে।

অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের উদ্দেশ্য হল অত্যন্ত নির্দিষ্ট, স্থিতিশীল ফাংশন ডিজাইন এবং উৎপাদন করা যা প্রাকৃতিক অ্যান্টিবডি অর্জন করতে পারে না, যা থেরাপিউটিক অ্যান্টিবডি উৎপাদনের ভিত্তি স্থাপন করে।

অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ে বিস্তৃত প্রকল্প অভিজ্ঞতার সাথে, আলফা লাইফটেক একাধিক প্রজাতির জন্য কাস্টমাইজড মনোক্লোনাল এবং পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডি পরিষেবা প্রদান করতে পারে, সেইসাথে ফেজ ডিসপ্লে অ্যান্টিবডি লাইব্রেরি নির্মাণ এবং স্ক্রিনিং পরিষেবা প্রদান করতে পারে। আলফা লাইফটেক গ্রাহকদের দক্ষ, অত্যন্ত নির্দিষ্ট এবং স্থিতিশীল অ্যান্টিবডি তৈরির জন্য মানসম্পন্ন বায়োসিমিলার অ্যান্টিবডি এবং রিকম্বিন্যান্ট প্রোটিন পণ্য, পাশাপাশি সংশ্লিষ্ট পরিষেবা প্রদান করতে পারে। ব্যাপক অ্যান্টিবডি, প্রোটিন প্ল্যাটফর্ম এবং ফেজ ডিসপ্লে সিস্টেম ব্যবহার করে, আমরা অ্যান্টিবডি উৎপাদনের আপস্ট্রিম এবং ডাউনস্ট্রিম কভার করে পরিষেবা প্রদান করি, যার মধ্যে অ্যান্টিবডি হিউম্যানাইজেশন, অ্যান্টিবডি পরিশোধন, অ্যান্টিবডি সিকোয়েন্সিং এবং অ্যান্টিবডি যাচাইকরণের মতো প্রযুক্তিগত পরিষেবা অন্তর্ভুক্ত রয়েছে।

অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের অগ্রণী পর্যায় দুটি প্রযুক্তির সাথে সম্পর্কিত:

--রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তি

--হাইব্রিডোমা প্রযুক্তি

অ্যান্টিবডি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের দ্রুত বিকাশ তিনটি গুরুত্বপূর্ণ প্রযুক্তির সাথে সম্পর্কিত:

--জিন ক্লোনিং প্রযুক্তি এবং পলিমারেজ চেইন বিক্রিয়া

--প্রোটিন প্রকাশ: রিকম্বিন্যান্ট প্রোটিনগুলি ইস্ট, রড-আকৃতির ভাইরাস এবং উদ্ভিদের মতো প্রকাশ ব্যবস্থা দ্বারা উত্পাদিত হয়

--কম্পিউটার সাহায্যপ্রাপ্ত কাঠামোগত নকশা

প্রথম প্রজন্মের অ্যান্টিবডিগুলিকে কাইমেরিক অ্যান্টিবডি তৈরির জন্য মানবিকীকরণ করা হয়েছিল, যেখানে মাউস মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির পরিবর্তনশীল অঞ্চলটি মানুষের IgG অণুর ধ্রুবক অঞ্চলের সাথে সংযুক্ত ছিল। দ্বিতীয় প্রজন্মের মাউস মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডির অ্যান্টিজেন বাইন্ডিং অঞ্চল (CDR) মানুষের IgG-তে প্রতিস্থাপন করা হয়েছিল। CDR অঞ্চল ব্যতীত, অন্যান্য সমস্ত অ্যান্টিবডি প্রায় মানুষের অ্যান্টিবডি, এবং মানুষের চিকিৎসার জন্য মাউস ক্লোন অ্যান্টিবডি ব্যবহার করার সময় মানব অ্যান্টি-মাউস অ্যান্টিবডি (HAMA) প্রতিক্রিয়া এড়াতে প্রচেষ্টা করা হয়েছিল।

 

একটি ফেজ ডিসপ্লে লাইব্রেরি তৈরি করার জন্য, প্রথম ধাপ হল অ্যান্টিবডি এনকোডিং জিনগুলি প্রাপ্ত করা, যা ইমিউনাইজড প্রাণীর বি কোষ থেকে বিচ্ছিন্ন করা যেতে পারে (ইমিউন লাইব্রেরি নির্মাণ), সরাসরি অ-ইমিউনাইজড প্রাণী থেকে নিষ্কাশিত করা যেতে পারে (প্রাকৃতিক লাইব্রেরি নির্মাণ), অথবা এমনকি অ্যান্টিবডি জিনের টুকরো দিয়ে ইন ভিট্রো একত্রিত করা যেতে পারে (সিন্থেটিক লাইব্রেরি নির্মাণ)। তারপর, জিনগুলি পিসিআর দ্বারা প্রশস্ত করা হয়, প্লাজমিডে ঢোকানো হয় এবং উপযুক্ত হোস্ট সিস্টেমে প্রকাশ করা হয় (ইস্ট এক্সপ্রেশন (সাধারণত পিচিয়া প্যাস্টোরিস), প্রোক্যারিওটিক এক্সপ্রেশন (সাধারণত ই. কোলাই), স্তন্যপায়ী কোষের এক্সপ্রেশন, উদ্ভিদ কোষের এক্সপ্রেশন এবং রড-আকৃতির ভাইরাস দ্বারা সংক্রামিত পোকামাকড় কোষের এক্সপ্রেশন)। সবচেয়ে সাধারণ হল ই. কোলাই এক্সপ্রেশন সিস্টেম, যা ফেজের সাথে একটি নির্দিষ্ট এনকোডিং অ্যান্টিবডি ক্রমকে একীভূত করে এবং ফেজ শেল প্রোটিনগুলির একটি (pIII বা pVIII) এনকোড করে। ব্যাকটিরিওফেজের পৃষ্ঠে প্রদর্শিত এবং প্রদর্শিত জিন ফিউশন। এই প্রযুক্তির মূল বিষয় হল একটি ফেজ ডিসপ্লে লাইব্রেরি তৈরি করা, যা প্রাকৃতিক লাইব্রেরির তুলনায় সুবিধাজনক কারণ এটির নির্দিষ্ট বাঁধাই থাকতে পারে। পরবর্তীকালে, অ্যান্টিজেন স্পেসিফিসিটি সহ অ্যান্টিবডিগুলি একটি জৈবিক নির্বাচন প্রক্রিয়ার মাধ্যমে পরীক্ষা করা হয়, লক্ষ্য অ্যান্টিজেনগুলি স্থির করা হয়, আনবাউন্ড ফেজগুলি বারবার ধুয়ে ফেলা হয় এবং আরও সমৃদ্ধকরণের জন্য আবদ্ধ ফেজগুলি ধুয়ে ফেলা হয়। তিন বা ততোধিক রাউন্ড পুনরাবৃত্তির পরে, উচ্চ নির্দিষ্টতা এবং উচ্চ অ্যাফিনিটি অ্যান্টিবডিগুলি পৃথক করা হয়।

চিত্র ৩: অ্যান্টিবডি লাইব্রেরি নির্মাণ এবং স্ক্রিনিং

রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তি অ্যান্টিবডি টুকরো তৈরি করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। ফ্যাব অ্যান্টিবডিগুলিকে প্রাথমিকভাবে গ্যাস্ট্রিক প্রোটেজ দ্বারা হাইড্রোলাইজ করা যেতে পারে (ফ্যাব ') 2 টুকরো তৈরি করতে, যা পরে প্যাপেইন দ্বারা হজম হয়ে পৃথক ফ্যাব টুকরো তৈরি করে। Fv টুকরোটিতে VH এবং VL থাকে, যা ডাইসালফাইড বন্ধনের অনুপস্থিতির কারণে দুর্বল স্থিতিশীলতা রাখে। অতএব, VH এবং VL 15-20 অ্যামিনো অ্যাসিডের একটি ছোট পেপটাইডের মাধ্যমে একসাথে সংযুক্ত হয়ে প্রায় 25KDa আণবিক ওজনের একটি একক শৃঙ্খল পরিবর্তনশীল টুকরো (scFv) অ্যান্টিবডি তৈরি করে।

ক্যামেলিডে (উট, লিয়ামা এবং আলপাকা) জীবদেহের অ্যান্টিবডি গঠনের গবেষণায় স্পষ্টভাবে প্রমাণিত হয়েছে যে অ্যান্টিবডিগুলির কেবল ভারী শৃঙ্খল থাকে এবং কোনও হালকা শৃঙ্খল থাকে না, তাই তাদের ভারী শৃঙ্খল অ্যান্টিবডি (hcAb) বলা হয়। ভারী শৃঙ্খল অ্যান্টিবডিগুলির পরিবর্তনশীল ডোমেনকে একক ডোমেন অ্যান্টিবডি বা ন্যানোবডি বা VHH বলা হয়, যার আকার 12-15 kDa। মনোমার হিসাবে, তাদের কোনও ডাইসালফাইড বন্ধন নেই এবং তারা খুব স্থিতিশীল, অ্যান্টিজেনের প্রতি খুব বেশি আকর্ষণ রয়েছে।

চিত্র ৫: হেভি চেইন অ্যান্টিবডি এবং ভিএইচএইচ/ন্যানোবডি

কোষ মুক্ত প্রকাশ প্রাকৃতিক বা সিন্থেটিক ডিএনএর প্রকাশ ব্যবহার করে ইন ভিট্রো প্রোটিন সংশ্লেষণ অর্জন করে, সাধারণত ই. কোলাই এক্সপ্রেশন সিস্টেম ব্যবহার করে। এটি দ্রুত প্রোটিন তৈরি করে এবং প্রচুর পরিমাণে রিকম্বিন্যান্ট প্রোটিন তৈরি করার সময় কোষের উপর বিপাকীয় এবং সাইটোটক্সিক বোঝা এড়ায়। এটি এমন প্রোটিনও তৈরি করতে পারে যা সংশ্লেষণ করা কঠিন, যেমন যেগুলি অনুবাদের পরে পরিবর্তন করা বা ঝিল্লি প্রোটিন সংশ্লেষণ করা কঠিন।