Hybridoma Technology Platform
Alpha Lifetech pruža kupcima proizvode i usluge antitijela i rekombinantnih antitijela osiguranog kvaliteta.
KONTAKTIRAJTE NAS01
Hybridoma Technology Platform
Alpha Lifetech ima bogato iskustvo u oblasti razvoja antitijela. Tokom godina, Alpha Lifetech je uspostavio sveobuhvatnu platformu za razvoj antitijela (uključujući razvoj monoklonskih antitijela, razvoj poliklonskih antitijela, razvoj rekombinantnih monoklonskih antitijela i druge usluge pripreme i razvoja antitijela).
Alpha Lifetech pruža kupcima proizvode i usluge antitijela i rekombinantnih antitijela osiguranog kvaliteta, a pripremljena antitijela imaju jaku specifičnost i dobru stabilnost. Višestruki instrumenti i oprema za pročišćavanje antitijela mogu se koristiti za pružanje usluga prečišćavanja antitijela iz različitih izvora kao što su monoklonska antitijela zeca, ovaca, piletina, miša, kao i usluge pročišćavanja afiniteta proteina A/G i usluge odvajanja antitijela.
Na osnovu različitih tehnika pripreme antitijela kao što je tehnologija hibridomskih ćelija, Alpha Lifetech može pružiti prilagođene usluge za monoklonska i poliklonska antitijela različitih vrsta. Osim toga, može se pružiti i niz usluga od sekvenciranja visoke propusnosti, pripreme antitijela, pročišćavanja antitijela do validacije antitijela. Odabrat ćemo metodu prečišćavanja na osnovu specifične namjene kupca. Zasnovan na sveobuhvatnim sistemima platforme kao što su platforma za razvoj antitela i platforma za proteine, Alpha Lifetech pokriva usluge proizvodnje antitela uzvodno i nizvodno, obezbeđujući prečišćavanje antitela, sekvenciranje antitela visokog protoka, validaciju antitela i druge tehničke usluge.
Hybridoma Technology
Hybridoma tehnologija se može koristiti za pripremu monoklonskih antitijela. Spajanjem ćelija slezene imuniziranih miševa sa ćelijama mijeloma ljudi ili miševa, formiraju se ćelije hibridoma koje luče specifična antitijela. Generirana monoklonska antitijela dobivena od miša mogu se koristiti u naučnim istraživanjima kao što su enzimski imunosorbentni test, radioimunotest, imunohistohemija, protočna citometrija, pročišćavanje proteina, itd. Uzorci monoklonskih antitijela uključuju ascites, hibridoma supernatant dobijen u uzorku abdohibromina itd. šupljine životinja i korištenje fiziološkog okruženja trbušne šupljine životinje za proizvodnju antitijela naziva se uzorak ascitesa. Ćelije hibridoma ubrizgane u trbušnu šupljinu životinja mogu proliferirati i lučiti monoklonska antitijela, koja se mogu akumulirati u ascitesu. Zbog mogućnosti pojave nečistoća (životinjskih proteina, hormona itd.) u ovim antitijelima, potrebno je pročišćavanje. Na osnovu funkcije sekrecije B limfocita, monoklonska antitijela se često izlučuju u medij kulture prilikom kultivacije hibridomskih stanica. Tečnost koja sadrži monoklonska antitijela u mediju kulture naziva se supernatant hibridoma. Čistoća monoklonskih antitela u supernatantu je relativno visoka, ali je potrebno dalje prečišćavanje za pripremu velikih razmera jer se dobijaju kroz in vitro kulturu.
Prečišćavanje antitijela može izolirati antitijela visoke čistoće iz kompleksa. Trenutno, afinitetno pročišćavanje antitela i odvajanje i prečišćavanje antitela su uobičajene metode prečišćavanja antitela, uglavnom uključujući prečišćavanje proteina A/G, hromatografiju izmene jona, gel filtraciju, precipitaciju i hromatografiju hidrofobne interakcije. Među njima, usluga pročišćavanja afiniteta proteina A/G je široko popularna u različitim aplikacijama za pročišćavanje antitijela. Proces Alpha Lifetech-a za pripremu monoklonskih antitijela na bazi hibridomske tehnologije prikazan je na slici 1.
Slika 1. Dijagram procesa za pripremu monoklonskih antitela zasnovanih na hibridomskoj tehnologiji.
Konjugat antitijela i lijeka i tehnologija hibridoma
Konjugat antitijela lijeka (ADC) je novi biološki agens koji kemijski spaja antitijela s citotoksičnim lijekovima. Konjugat antitijela za lijek kombinuje specifičnu sposobnost prepoznavanja antitijela sa snažnim ubijajućim učinkom citotoksičnih lijekova i precizno isporučuje citotoksične lijekove u tumorske stanice kroz antitijela, čime se postiže precizan tretman. Dio antitijela u ADC lijekovima se često priprema pomoću hibridomske tehnologije ili drugih tehnika proizvodnje antitijela, kao što je tehnologija genetskog inženjeringa antitijela. Hybridoma tehnologija pruža visokokvalitetne sirovine za antitijela za ADC lijekove. ADC lijekovi i monoklonska antitijela pripremljena tehnologijom hibridoma igraju važnu ulogu u poljima kao što je liječenje raka. Mogu se koristiti sami ili u kombinaciji kako bi se poboljšala terapijska učinkovitost.
Monoklonska antitijela pripremljena hibridomskom tehnologijom imaju visoku specifičnost, mogu precizno vezati i prepoznati specifične antigene i mogu se proizvoditi u velikim razmjerima. Kroz tehnologiju sekvenciranja hibridoma, geni antitijela u ćelijama hibridoma mogu se ekstrahirati i sekvencirati kako bi se dobile odgovarajuće sekvence, što je korisno za kasniju ekspresiju antitijela. Monoklonska antitijela pripremljena hibridomskom tehnologijom mogu se koristiti za otkrivanje specifičnih markera bolesti, kao što su tumorski markeri, virusni antigeni, itd., pružajući snažnu podršku za ranu dijagnozu bolesti. Osim toga, može se koristiti iu eksperimentima kao što su imunoblotiranje i imunohistohemija za proučavanje ekspresije proteina, lokalizacije, strukture i funkcije.
Tehnologija hibridoma Proizvodnja antitijela Service Workflow
| Koraci | Servisni sadržaj | Vremenska linija |
|---|---|---|
| Korak 1: Imunizacija životinja | (1) Imunizacija životinja 4 puta, dopunska imunizacija 1 doza, ukupno 5 doza imuniziranih. (2) Negativan serum prije imunizacije je sakupljen, a ELISA je urađena na četvrtoj dozi da bi se otkrio titar seruma. (3) Ako titar serumskih antitijela četvrte doze ispunjava zahtjeve, jedna dodatna doza imunizacije će se primijeniti 7 dana prije uzimanja krvi. Ako ne ispunjava uslove, rutinska imunizacija će se nastaviti. (4) Kvalifikovana potencija, ćelije slezene su izolovane za fuziju ćelija. | 10-12 sedmica |
| Korak 2: Fuzija i skrining | (1) Fuzija: Nakon imunizacije, ćelije slezene miša su sakupljene i spojene sa ćelijama mijeloma. (2) Proliferacija i skrining: Dobijene ćelije hibridoma su podvrgnute proliferaciji i ELISA skriningu da bi se dobili visoko efikasni klonovi. | 6 nedelja |
| Korak 3: Subklon | Subkloniranje 15-25 pozitivnih matičnih ćelija korištenjem metode ograničenog razrjeđivanja i konačno određivanje 10-15 pozitivnih klonova | 3-4 sedmice |
| Korak 4: Proizvodnja ascitesa i pročišćavanje antitela | (1) Proizvodnja ascitesa: 10-15 sojeva hibridoma koristi se za proizvodnju ascitesa kod miševa (ako se dobije veliki broj sojeva hibridoma, oni će biti poslani u ćelijskom obliku) (2) Identifikacija ascitesa: Ascites ELISA detekcija, potencija (protein/virus>10 ^ 5, mali molekul/peptid>10 ^ 4) za dalje pročišćavanje (3) Purification of Protein A/G: Purification of Ascites | 3-4 sedmice |
| Korak 5: Isporuka | (1) Obezbijedite 3-5 sojeva hibridoma monoklonskih antitijela. (2) Svaka ćelija hibridoma obezbeđuje 1 mg pročišćenog antitela (prečišćavanje ascitesa). (3) Izveštaj o eksperimentalnom procesu | 1 sedmica |
Više vrsta
Imunitet se može pružiti raznim životinjama, uključujući ali ne ograničavajući se na miševe, zečeve, ovce itd.
Višestruka meta
Na osnovu hibridomske tehnologije, dostupne su usluge otkrivanja višestrukih ciljnih antitijela: proteini, peptidi, mali molekuli, virusi, membranski proteini, mRNA, itd.
Zapisi o sljedivosti
Standardi kontrole kvaliteta QC (imunološka potencija, PBMC kontrola kvaliteta, kontrola kvaliteta biblioteke i kontrola kvaliteta provjere valjanosti), engleski eksperimentalni izvještaji, originalni eksperimentalni zapisi
Personalizirani program
Jedan na jedan personalizirano prilagođavanje programa kako bi se zadovoljile potrebe istraživačkog projekta različitih klijenata
Služba za razvoj monoklonskih antitela
Možemo pružiti visokokvalitetne, čiste i visoko specifične usluge razvoja monoklonskih antitijela, uključujući proizvodnju mišjih monoklonskih antitijela i zečjih monoklonskih antitijela
Hybridoma Technology Platform
Uključujući program imunizacije, usluge pripreme antitela, pročišćavanje antitela, sekvenciranje visoke propusnosti antitela, validaciju antitela itd.
Platforma za sortiranje jedne B ćelije
Alpha Lifetech ima prednosti u vremenu skrininga i dobijanju visokokvalitetnih antitijela. Može da obezbedi dizajn antigena, sintezu i modifikaciju, imunitet životinja, skrining obogaćivanja pojedinačnih B ćelija, sekvenciranje pojedinačnih ćelija.
Platforma za razvoj antitela za prikaz faga
Alpha Lifetech može pružiti tehničke usluge razvoja antitijela s prikazom faga od pripreme antitijela, prečišćavanja antitijela, sekvenciranja antitijela itd.
Related Technology Resource
Uvod u Hybridoma tehnologijuVIDEO
Ako imate bilo kakvih pitanja, slobodno nas kontaktirajte u bilo koje vrijeme.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102