Platforma za razvoj antitela za prikaz faga
Na osnovu sveobuhvatne platformske konstrukcije sistema antitela, Alpha Lifetech može pružiti tehničke usluge od pripreme antitela, prečišćavanja antitela, sekvenciranja antitela itd.
KONTAKTIRAJTE NAS01
Platforma za razvoj antitela za prikaz faga
Alpha Lifetech, sa svojim opsežnim projektnim iskustvom u otkrivanju antitijela, može pružiti prilagođene usluge monoklonskih i poliklonskih antitijela za više vrsta, kao i izgradnju biblioteke antitijela i usluge skrininga. Alpha Lifetech može kupcima pružiti kvalitetne antitijela i proizvode rekombinantnih antitijela, kao i odgovarajuće usluge, za pripremu efikasnih, visoko specifičnih i stabilnih antitijela. Koristeći sveobuhvatne platforme za antitijela i inženjering antitijela, pružamo usluge koje pokrivaju uzvodno i nizvodno proizvodnju antitijela, uključujući tehničke usluge kao što su priprema antitijela, pročišćavanje, sekvenciranje antitijela i validacija.
Alpha Lifetech ima zrelu platformu za otkrivanje antitijela koja klijentima pruža niz usluga uključujući imunitet životinja, izgradnju biblioteke antitijela za prikaz faga i skrining, sekvenciranje antitijela, ekspresiju antitijela, pročišćavanje antitijela, validaciju antitijela i označavanje antitijela zasnovano na tehnologiji hibridoma, tehnologiji jedne B ćelije, tehnologiji prikaza faga i još mnogo toga. Alpha Lifetech ima standardnu proizvodnu liniju, a pored usluga pripreme antitijela, mogu se pružiti i prateće usluge kao što su humanizacija antitijela, sazrijevanje afiniteta antitijela, dizajn i razvoj ADC lijeka i CAR-T naknadni dizajn sekvence. U isto vrijeme, Alpha Lifetech je konstruirao biblioteku antitijela baziranu na M13, T4 i T7 tehnološkoj platformi za prikaz faga, sa kapacitetom skladištenja do 10^8-10^9. Pozitivna stopa, stopa umetanja i raznolikost biblioteke mogu dostići preko 90%.
Tehnologija prikaza faga
Proizvodnja monoklonskih antitijela je prvobitno pripremljena korištenjem tehnologije hibridoma monoklonskih antitijela za proizvodnju mišjeg hibridoma monoklonskog antitijela. Konkretno, spajanjem ćelija slezene imuniziranih miševa sa ćelijama mijeloma ljudi ili miševa, formiraju se hibridomske ćelije koje luče specifična hibridoma monoklonska antitijela. Humaniziranom modifikacijom mišjih monoklonskih antitijela i genetskim inženjeringom modifikacijom antitijela kako bi im se dala konstantna regija humanog imunoglobulina, njihova imunogenost se može smanjiti. Inženjering monoklonskih antitijela se široko koristi u biomedicinskim i kliničkim aplikacijama.
Alpha Lifetech može pružiti usluge inženjeringa antitijela na jednom mjestu, od dizajna protokola za pretklinička istraživanja do otkrivanja konjugata antitijela lijekova (ADC) i validacije na životinjama. Konjugati antitijela (ADC) mogu isporučiti lijekove za kemoterapiju u ćelije raka. Nakon vezivanja za specifične mete eksprimirane na stanicama raka, ADC oslobađa citotoksične lijekove u stanice raka. Alpha Lifetech također može pružiti klijentima sveobuhvatne usluge sazrijevanja afiniteta antitijela. Uz naprednu optimizaciju mutacija i visoko propusnu tehnologiju skrininga fagnog displeja, antitijela s određenim afinitetom se prvo pregledavaju, a zatim se uvode mutacije aminokiselina kako bi se stvorile različite varijante. Nakon toga, antitela visokog afiniteta su procenjena i testirana korišćenjem tehnika skrininga. Nakon više krugova optimizacije i strukturne analize, na kraju su dobijena antitijela sa većim afinitetom i jačom specifičnošću.
Alpha Lifetech može konstruirati različite tipove biblioteka za prikaz faga antitijela, uključujući imune biblioteke, izvorne biblioteke, polusintetičke biblioteke i sintetičke biblioteke. Na osnovu velikog kapaciteta biblioteka antitijela, mogu se dobiti visoko specifična antitijela. Mogu se obezbediti višestruki fagemidni vektori kao što su pMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, kao i sojevi kao što su TG1 E. coli, XL1 Blue i ER2738. Pored kapaciteta biblioteke do 10^9, stopa umetanja ciljnog fragmenta u biblioteku je takođe visoka, stvarajući dovoljne uslove za skrining antitela koja zadovoljavaju korisnike. Dijagram toka Alpha Lifetech-ove usluge pripreme antitijela na bazi tehnologije prikaza faga prikazan je na slici 1.
Slika 1. Dijagram procesa za pripremu monoklonskih antitela zasnovanih na tehnologiji fag displeja.
Radni tok proizvodnje antitijela na displeju faga
| Koraci | Servisni sadržaj | Vremenska linija |
|---|---|---|
| Korak 1: Imunizacija životinja | (1) Imunizacija životinja 4 puta, dopunska imunizacija 1 doza, ukupno 5 doza imuniziranih. (2) Negativan serum prije imunizacije je sakupljen, a ELISA je urađena na četvrtoj dozi da bi se otkrio titar seruma. (3) Ako titar serumskih antitijela četvrte doze ispunjava zahtjeve, jedna dodatna doza imunizacije će se primijeniti 7 dana prije uzimanja krvi. Ako ne ispunjava uslove, rutinska imunizacija će se nastaviti. (4) Kvalificirana potencija, prikupljanje krvi i odvajanje monocita | 10 sedmica |
| Korak 2: Priprema cDNK | (1) PBMC totalna ekstrakcija RNA (komplet za ekstrakciju RNA) (2) RT-PCR priprema cDNK visoke vjernosti (komplet za reverznu transkripciju) | 1 dan |
| Korak 3: Izgradnja biblioteke antitijela | (1) Koristeći cDNK kao šablon, geni su amplificirani u dva kruga PCR-a. (2) Konstrukcija i transformacija faga: fagemidni vektor za spajanje gena, transformacija elektroporacijom TG1 bakterije domaćina, konstrukcija biblioteke antitijela. (3) Identifikacija: nasumično odabrana 24 klona, PCR identifikacija pozitivna stopa + stopa umetanja. (4) Potpomognuta priprema faga: amplifikacija+prečišćavanje faga M13. (5) Spasavanje biblioteke displeja faga | 3-4 sedmice |
| Korak 4: Skrining biblioteke antitijela (3 kruga) | (1) Zadani 3 kruga skrininga (skrining u čvrstoj fazi): skrining pod pritiskom radi uklanjanja nespecifičnih antitijela u maksimalnom mogućem obimu. (2) Odabran bakteriofag za amplifikaciju jednog klona + ekspresija indukovana IPTG + ELISA detekcija pozitivnih klonova. (3) Svi pozitivni klonovi su odabrani za sekvenciranje gena. | 4-5 sedmica |
Usluge podrške
Možemo pružiti različite usluge izgradnje imunološke biblioteke zasnovane na životinjama i usluge skrininga biblioteke prirodnih antitijela prema potrebama kupaca
Višestruka meta
Dostupne su usluge otkrivanja višestrukih ciljnih antitijela: proteini, peptidi, male molekule, virusi, membranski proteini, mRNA, itd.
Više vektora
Personalizirana usluga izgradnje biblioteke, možemo pružiti različite vektore bakteriofaga uključujući PMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, i modificirati ih prema potrebama kupaca
Mature Platform
Kapacitet skladištenja može dostići 10 ^ 8-10 ^ 9, stope umetanja su sve iznad 90%, a afinitet antitela dobijenih skriningom je generalno na nivou nM pM
Služba za razvoj monoklonskih antitela
Možemo pružiti visokokvalitetne, čiste i visoko specifične usluge razvoja monoklonskih antitijela, uključujući proizvodnju mišjih monoklonskih antitijela i zečjih monoklonskih antitijela
Hybridoma Technology Platform
Uključujući program imunizacije, usluge pripreme antitela, pročišćavanje antitela, sekvenciranje visoke propusnosti antitela, validaciju antitela itd.
Platforma za sortiranje jedne B ćelije
Alpha Lifetech ima prednosti u vremenu skrininga i dobijanju visokokvalitetnih antitijela. Može da obezbedi dizajn antigena, sintezu i modifikaciju, imunitet životinja, skrining obogaćivanja pojedinačnih B ćelija, sekvenciranje pojedinačnih ćelija.
Platforma za razvoj antitela za prikaz faga
Alpha Lifetech može pružiti tehničke usluge razvoja antitijela s prikazom faga od pripreme antitijela, prečišćavanja antitijela, sekvenciranja antitijela itd.
Ako imate bilo kakvih pitanja, slobodno nas kontaktirajte u bilo koje vrijeme.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102