Platforma za razvoj antitijela za fagni prikaz
Na osnovu sveobuhvatne konstrukcije platforme za antitijela, Alpha Lifetech može pružiti tehničke usluge od pripreme antitijela, prečišćavanja antitijela, sekvenciranja antitijela itd.
KONTAKTIRAJTE NAS01
Platforma za razvoj antitijela za fagni prikaz
Alpha Lifetech, sa svojim opsežnim iskustvom u projektima otkrivanja antitijela, može pružiti prilagođene usluge monoklonskih i poliklonskih antitijela za više vrsta, kao i usluge konstrukcije i skrininga biblioteka antitijela. Alpha Lifetech može pružiti kupcima kvalitetne proizvode antitijela i rekombinantnih antitijela, kao i odgovarajuće usluge, za pripremu efikasnih, visoko specifičnih i stabilnih antitijela. Korištenjem sveobuhvatnih platformi antitijela i inženjeringa antitijela, pružamo usluge koje pokrivaju uzvodno i nizvodno od proizvodnje antitijela, uključujući tehničke usluge kao što su priprema antitijela, pročišćavanje, sekvenciranje antitijela i validacija.
Alpha Lifetech ima zrelu platformu za otkrivanje antitijela koja kupcima pruža niz usluga, uključujući imunitet životinja, konstrukciju i skrining biblioteke antitijela za fagni prikaz, sekvenciranje antitijela, ekspresiju antitijela, prečišćavanje antitijela, validaciju antitijela i označavanje antitijela na osnovu hibridomske tehnologije, tehnologije pojedinačnih B ćelija, tehnologije fagnog prikaza i još mnogo toga. Alpha Lifetech ima standardnu proizvodnu liniju, a pored usluga pripreme antitijela, mogu se pružiti i prateće usluge kao što su humanizacija antitijela, sazrijevanje afiniteta antitijela, dizajn i razvoj ADC lijekova i dizajn naknadne sekvence CAR-T. Istovremeno, Alpha Lifetech je konstruisao biblioteku antitijela na osnovu M13, T4 i T7 platforma za fagni prikaz, sa kapacitetom skladištenja do 10^8-10^9. Stopa pozitivnih insercija, stopa umetanja i raznolikost biblioteke mogu doseći preko 90%.
Tehnologija prikaza faga
Proizvodnja monoklonskih antitijela prvobitno je pripremljena korištenjem tehnologije hibridomskih monoklonskih antitijela za proizvodnju mišjih hibridomskih monoklonskih antitijela. Konkretno, spajanjem ćelija slezene imuniziranih miševa sa ćelijama mijeloma ljudi ili miševa, formiraju se hibridomske ćelije koje luče specifična hibridomska monoklonska antitijela. Humaniziranom modifikacijom mišjih monoklonskih antitijela i modifikacijom antitijela genetskim inženjeringom kako bi im se dala konstantna ljudska imunoglobulinska regija, njihova imunogenost se može smanjiti. Inženjering monoklonskih antitijela se široko koristi u biomedicinskim i kliničkim primjenama.
Alpha Lifetech može pružiti sveobuhvatne usluge inženjeringa antitijela, od dizajna protokola predkliničkih istraživanja do otkrivanja konjugata antitijela i lijekova (ADC) i validacije na životinjama. Konjugati antitijela i lijekova (ADC) mogu dostavljati lijekove za hemoterapiju ćelijama raka. Nakon vezivanja za specifične ciljeve eksprimirane na ćelijama raka, ADC oslobađa citotoksične lijekove u ćelije raka. Alpha Lifetech također može pružiti kupcima sveobuhvatne usluge sazrijevanja afiniteta antitijela. S naprednom optimizacijom mutacija i tehnologijom skrininga visokog protoka faga, antitijela s određenim afinitetom se prvo skriningiraju, a zatim se uvode mutacije aminokiselina kako bi se generirale različite varijante. Nakon toga, antitijela visokog afiniteta su procijenjena i skriningirana korištenjem tehnika skrininga. Nakon više rundi optimizacije i strukturne analize, konačno su dobivena antitijela s većim afinitetom i jačom specifičnošću.
Alpha Lifetech može konstruirati različite vrste biblioteka fagnog prikaza antitijela, uključujući imunološke biblioteke, nativne biblioteke, polusintetičke biblioteke i sintetičke biblioteke. Na osnovu visokog kapaciteta biblioteka antitijela, mogu se dobiti visoko specifična antitijela. Mogu se obezbijediti višestruki fagemidni vektori kao što su pMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, kao i sojevi kao što su TG1 E. coli, XL1 Blue i ER2738. Pored kapaciteta biblioteke do 10^9, stopa umetanja ciljnih fragmenata biblioteke je također visoka, stvarajući dovoljne uslove za skrining antitijela koja zadovoljavaju kupce. Dijagram toka usluge pripreme antitijela kompanije Alpha Lifetech zasnovane na tehnologiji fagnog prikaza prikazan je na Slici 1.
Sl.1 Dijagram procesa za pripremu monoklonskih antitijela zasnovanih na tehnologiji fagnog prikaza.
Tok rada za proizvodnju antitijela na fagnom displeju
| Koraci | Sadržaj usluge | Vremenska crta |
|---|---|---|
| Korak 1: Imunizacija životinja | (1) Imunizacija životinja 4 puta, buster imunizacija 1 doza, ukupno 5 imuniziranih doza. (2) Prije imunizacije prikupljen je negativni serum, a ELISA test je proveden na četvrtoj dozi kako bi se otkrio titar seruma. (3) Ako titar serumskih antitijela četvrte doze ispunjava uslove, jedna dodatna doza imunizacije će se primijeniti 7 dana prije uzimanja krvi. Ako ne ispunjava uslove, rutinska imunizacija će se nastaviti. (4) Kvalificirana potencija, uzimanje krvi i odvajanje monocita | 10 sedmica |
| Korak 2: Priprema cDNA | (1) Ekstrakcija ukupne RNK PBMC-a (Komplet za ekstrakciju RNK) (2) Priprema cDNA metodom visoke preciznosti RT-PCR (komplet za reverznu transkripciju) | 1 dan |
| Korak 3: Izgradnja biblioteke antitijela | (1) Koristeći cDNA kao matricu, geni su amplificirani pomoću dva kruga PCR-a. (2) Konstrukcija i transformacija faga: spajanje gena fagemidnog vektora, elektroporacijska transformacija TG1 bakterije domaćina, konstrukcija biblioteke antitijela. (3) Identifikacija: Nasumično odabrati 24 klona, stopa pozitivne PCR identifikacije + stopa insercije. (4) Potpomognuta priprema faga: amplifikacija + pročišćavanje faga M13. (5) Spašavanje biblioteke fagnog prikaza | 3-4 sedmice |
| Korak 4: Probir biblioteke antitijela (3 kruga) | (1) Standardni 3-kružni skrining (skrining na čvrstoj fazi): skrining pod pritiskom radi uklanjanja nespecifičnih antitijela u najvećoj mogućoj mjeri. (2) Amplifikacija pojedinačnog klona odabranim bakteriofagom + IPTG inducirana ekspresija + ELISA detekcija pozitivnih klonova. (3) Svi pozitivni klonovi su odabrani za sekvenciranje gena. | 4-5 sedmica |
Usluge podrške
Možemo pružiti različite usluge izgradnje imunoloških biblioteka na bazi životinja i usluge skrininga biblioteka prirodnih antitijela prema potrebama kupaca.
Višestruki cilj
Dostupne su usluge otkrivanja više ciljnih antitijela: proteini, peptidi, male molekule, virusi, membranski proteini, mRNA itd.
Višestruki vektori
Personalizirana usluga izgradnje biblioteke, možemo pružiti različite bakteriofagne vektore, uključujući PMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, te ih modificirati prema potrebama kupaca.
Platforma za zrele osobe
Kapacitet skladištenja može doseći 10^8-10^9, stope umetanja su iznad 90%, a afinitet antitijela dobivenih skriningom je uglavnom na nM pM nivou.
Služba za razvoj monoklonskih antitijela
Možemo pružiti visokokvalitetne, visoko čiste i visoko specifične usluge razvoja monoklonskih antitijela, uključujući proizvodnju mišjih monoklonskih antitijela i zečjih monoklonskih antitijela.
Platforma za hibridomsku tehnologiju
Uključujući program imunizacije, usluge pripreme antitijela, prečišćavanje antitijela, visokopropusno sekvenciranje antitijela, validaciju antitijela itd.
Platforma za sortiranje pojedinačnih B ćelija
Alpha Lifetech ima prednosti u vremenu skrininga i dobijanju visokokvalitetnih antitijela. Može pružiti dizajn, sintezu i modifikaciju antigena, imunitet životinja, skrining obogaćivanja pojedinačnih B ćelija, sekvenciranje pojedinačnih ćelija.
Platforma za razvoj antitijela za fagni prikaz
Alpha Lifetech može pružiti tehničke usluge razvoja antitijela za fagni prikaz, od pripreme antitijela, prečišćavanja antitijela, sekvenciranja antitijela itd.
Ako imate bilo kakvih pitanja, slobodno nas kontaktirajte u bilo koje vrijeme.
Leave Your Message
16.07.2018. 
0102