Platforma biblioteke peptida za prikaz faga

Bazirano na tehnologiji fagnog prikaza, Alpha Lifetech može pružiti kupcima visokokvalitetne usluge konstrukcije i skrininga biblioteka peptida za fagni prikaz, uključujući linearne biblioteke 7 peptida, linearne biblioteke 9 peptida, linearne biblioteke 10 peptida, linearne biblioteke 15 peptida, linearne biblioteke 12 peptida, cikličke biblioteke 7 peptida i druge biblioteke peptida. Raznolikost biblioteka, stopa umetanja i pozitivna stopa mogu doseći više od 90%, kako bi se zadovoljile različite potrebe različitih kupaca za bibliotekama peptida za fagni prikaz.

Biblioteke fagnog prikaza se široko koriste u biomedicinskim istraživanjima i primjenama. Na primjer, u inženjerstvu antitijela i razvoju antitijela, biblioteke fagnog prikaza mogu se koristiti za skrining i poboljšanje varijanti antitijela; u skriningu lijekova i otkrivanju ciljeva lijekova, biblioteke fagnog prikaza mogu se koristiti za traženje proteina ili peptida s potencijalom za lijekove. U istraživanju vakcina, biblioteka fagnog prikaza može se koristiti za odabir antigena vakcine i razvoj vakcine. Osim toga, biblioteke fagnog prikaza mogu se koristiti i u mnogim oblastima kao što su istraživanje interakcija proteina, dijagnoza i liječenje raka.

Tehnologija prikaza faga

Tehnologija prikaza faga je tehnologija koja spaja gen ciljnog proteina s genom proteina površine faga, te čini ciljni protein prisutnim na površini faga u obliku fuzijskog proteina putem ekspresije gena. Ovi proteini prikazani na površini faga mogu održavati relativnu prostornu strukturu i biološku aktivnost, te se mogu pregledati, detektirati i prepoznati interakcijom sa specifičnim antitijelima ili drugim molekulama. Objekti prikaza tehnologije prikaza faga uključuju antitijelo, fragment antitijela, peptidni segment, cDNA itd.

Sistem tehnologije fagnog prikaza uglavnom uključuje M13 sistem fagnog prikaza (kao što su PIII sistem prikaza, PII sistem prikaza, itd.), λ sistem fagnog prikaza, T4 sistem fagnog prikaza, T7 sistem fagnog prikaza, itd. Svaki od ovih sistema ima svoje karakteristike i pogodan je za različite istraživačke potrebe. M13 fag, zbog svojih lizogenih svojstava, ne lizira ćeliju domaćina nakon infekcije, što mu omogućava kontinuiranu replikaciju i ekspresiju stranih fragmenata unutar ćelije domaćina, pogodnu za dugoročni skrining i stabilnu ekspresiju. Zbog svog kratkog životnog ciklusa i visoke efikasnosti replikacije, T7 fag može brzo proizvesti veliki broj potomaka faga, što je pogodno za visokopropusni skrining i brzu ekspresiju.

	M13 fag	T7 fag
1. Morfološka struktura	Filamentozni fag	Poliedarski fag
2. Genetski materijal	Kružni jednolančani molekul DNK	Linearna, dvolančana, terminalno suvišna DNK
3. Replikacija i infekcija	Lizogeni fagi, sastavljeni u periplazmi, mogu se izlučivati iz bakterijskih membrana bez liziranja ćelija domaćina.	Virulentni fagi, potomci faga sastavljenih u bakterijskoj citoplazmi, oslobađaju se lizom ćelijske membrane.
4. Sistem prikaza	Sistem za prikazivanje je konstruisan korištenjem kapsidnih proteina pIII i PVIII, pogodnih za prikazivanje stranih peptida/proteina različitih veličina.	Sistem za prikazivanje je konstruisan sa 10B kapsidnim proteinom, koji ne zahteva proces sekrecije i pogodan je za prikazivanje peptida/proteina koji imaju inhibitorni efekat na proces sekrecije.
5. Prednost primjene	Pogodan je za prikaz i dugoročni skrining peptida malih molekula.	Ima prednosti u brzoj ekspresiji i visokom protoku podataka za skrining makromolekularnih proteina.

Tipovi biblioteke peptida za prikaz faga

Alpha Lifetech ima iskustva u konstrukciji i skriningu peptidnih biblioteka za fagni prikaz i nudi širok izbor tipova peptidnih biblioteka. Prema dužini peptida, može se podijeliti na 7 peptidnih biblioteka, 9 peptidnih biblioteka, 10 peptidnih biblioteka, 12 peptidnih biblioteka i 15 peptidnih biblioteka. Prema prostornoj konformaciji polipeptida, može se podijeliti na linearnu biblioteku fagnih peptida i cikličku biblioteku fagnih peptida.

Linearna biblioteka fagnih peptida

Gen za peptid je umetnut u regiju koja kodira protein omotača fagnog genoma, obično pIII ili PVIII, i prikazuje se kao linearni ravni lanac. Linearni peptidi se mogu lako razgraditi in vivo, a njihova sposobnost vezivanja i stabilnost mogu biti pogođeni.

biblioteka cikličkih fagnih peptida

Modifikovani prstenasti peptid će formirati fiksnu konformaciju pod djelovanjem disulfidnih veza ili drugih vezivnih veza, što će ne samo značajno poboljšati metaboličku stabilnost i bioraspoloživost, već će i bolje ispuniti zahtjeve vezivanja konformacije receptor-ligand (antitijelo-antigen).

Proces biblioteke peptida za prikaz faga

Odabir faga

Kao nosači se obično biraju fagi tipa M13 ili fagi tipa T7.

Konstrukcija biblioteke peptida za fagni prikaz

Konstruirati fagni vektor sposoban da sadrži kodirajuću sekvencu stranog proteina ili polipeptida, koja obično uključuje promotor, selektivne markere i odgovarajuće regulatorne elemente. Umetanje kodirajuće sekvence stranog proteina ili peptida u fagni nosač, obično metodama rezanja i ligiranja restrikcijskim enzimima. Konstruirani fagni vektor se transformira u ćeliju domaćina, omogućavajući fagu da replicira i eksprimira strane proteine ili peptide unutar ćelije. Fagne biblioteke koje sadrže više različitih stranih proteina ili peptida pripremaju se putem opsežne transformacije i amplifikacije.

fagni prikaz peptidne biblioteke, skrining

Fiksirajte ciljne molekule (kao što su proteini, receptori ili antitijela) na nosaču čvrste faze. Inkubirajte konstruiranu biblioteku peptida za prikaz faga s fiksnom metom kako biste omogućili peptidima na fagu da se vežu za ciljnu molekulu. Tokom ovog procesa, nevezani bakteriofagi se uklanjaju pranjem, dok se zadržavaju bakteriofagi koji se vežu za metu, a bakteriofagi visokog afiniteta vezani za bakteriofage se eluiraju. Oporavljeni bakteriofagi se amplificiraju infekcijom Escherichia coli, a zatim podvrgavaju sljedećem krugu testiranja. Obično je potrebno 3-5 krugova testiranja da bi se dobili peptidi s visokom efikasnošću vezivanja.

Dizajn i sinteza peptida

Sintetizirajte peptide na osnovu mjesta skrininga.

Sl.1 Konstrukcija i proces skrininga biblioteke peptida za fagni prikaz

Povezana platforma

Alpha Lifetech može pružiti kupcima visokokvalitetne usluge izgradnje i skrininga biblioteke peptida za fagni prikaz.

biblioteka antitijela za fagni prikaz - Alpha Lifetech

Platforma za izgradnju biblioteke peptida za prikaz faga

Alpha Lifetech nudi niz tehnologija za izgradnju peptidnih biblioteka. Uglavnom pružamo usluge izgradnje T7 peptidnih biblioteka i M13 peptidnih biblioteka prema tipovima faga.

PROČITAJ VIŠE

skrining fagnog prikaza - Alpha Lifetechskrining fagnog prikaza - Alpha Lifetech

Platforma za skrining biblioteke peptida za prikaz faga

Alpha Lifetech ima bogato iskustvo u skriningu biblioteka peptidnih faga, pružajući snažnu tehničku podršku za otkrivanje lijekova malih molekula, kliničku dijagnozu, liječenje bolesti i biološka istraživanja.

PROČITAJ VIŠE