Platforma biblioteke peptida za prikaz faga

Bazirana na tehnologiji prikaza faga, Alpha Lifetech može klijentima pružiti visokokvalitetnu konstrukciju peptidne biblioteke za prikaz faga i usluge skrininga, uključujući linearne biblioteke 7 peptida, linearne biblioteke od 9 peptida, linearne biblioteke od 10 peptida, linearne biblioteke od 15 peptida, linearne biblioteke od 12 peptida, biblioteke sa linearnim 12 peptida, biblioteke drugih peptida, biblioteke drugih peptida, cikličke biblioteke peptida, biblioteke peptida. stopa umetanja, pozitivna stopa može doseći više od 90%, kako bi se zadovoljile različite potrebe različitih kupaca za peptidnim bibliotekama za prikaz faga.

Biblioteke displeja faga se široko koriste u biomedicinskim istraživanjima i aplikacijama. Na primjer, u inženjeringu antitijela i razvoju antitijela, biblioteke za prikaz faga mogu se koristiti za skrining i poboljšanje varijanti antitijela; U skriningu lijekova i otkrivanju cilja lijeka, biblioteke prikaza faga mogu se koristiti za traženje proteina ili peptida s potencijalom lijeka. U istraživanju vakcina, biblioteka fagnog prikaza može se koristiti za selekciju antigena vakcine i razvoj vakcine. Osim toga, biblioteke za prikaz faga se također mogu koristiti u mnogim poljima kao što su istraživanje interakcija proteina, dijagnoza i liječenje raka.

Phage Display Technology

Tehnologija prikaza faga je tehnologija koja spaja gen ciljnog proteina sa genom za protein površine faga i čini ciljni protein prisutnim na površini faga u obliku fuzionog proteina kroz ekspresiju gena. Ovi proteini prikazani na površini faga mogu održavati relativnu prostornu strukturu i biološku aktivnost, i mogu se pregledati, detektirati i prepoznati interakcijom sa specifičnim antitijelima ili drugim molekulima. Prikazni objekti tehnologije prikaza faga uključuju antitijelo, fragment antitijela, peptidni segment, cDNK, itd.

Sistem tehnologije prikaza faga uglavnom uključuje M13 sistem prikaza faga (kao što je PⅢ sistem prikaza, PⅧ sistem prikaza itd.), λ sistem prikaza faga, T4 sistem prikaza faga, T7 sistem prikaza faga, itd. Svaki od ovih sistema ima svoje karakteristike i pogodan je za različite potrebe istraživanja. M13 fag, zbog svojih lizogenih svojstava, M13 fag ne lizira ćeliju domaćina nakon što je inficira, što mu omogućava kontinuiranu repliciranje i ekspresiju stranih fragmenata unutar ćelije domaćina, pogodne za dugotrajni skrining i stabilnu ekspresiju. Zbog svog kratkog životnog ciklusa i visoke efikasnosti replikacije, T7 fag može brzo proizvesti veliki broj potomaka faga, što je pogodno za skrining visoke propusnosti i brzu ekspresiju.

	M13 Phage	T7 Phage
1. Morfološka struktura	Filamentozni fag	Poliedarski fag
2. Genetski materijal	Kružna jednolančana DNK molekula	Linearna, dvolančana, terminalno suvišna DNK
3. Replikacija i infekcija	Lizogeni fagi, okupljeni u periplazmi, mogu se lučiti iz bakterijskih membrana bez lize ćelija domaćina.	Virulentni fagi, potomci faga okupljenih u bakterijskoj citoplazmi, oslobađaju se lizom stanične membrane.
4. Sistem prikaza	Prikazni sistem je konstruisan korišćenjem pIII i PVIII kapsidnih proteina, pogodnih za prikazivanje stranih peptida/proteina različitih veličina.	Displej sistem je konstruisan sa 10B kapsidnim proteinom, koji ne zahteva proces sekrecije i pogodan je za prikazivanje peptida/proteina koji imaju inhibitorni efekat na proces sekrecije.
5. Prednost aplikacije	Pogodan je za prikaz i dugotrajno ispitivanje peptida malih molekula.	Ima prednosti u brzoj ekspresiji i visokoj propusnosti skrininga makromolekularnih proteina.

Tipovi biblioteke peptida za displej faga

Alpha Lifetech ima iskustvo u konstrukciji i skriningu peptidne biblioteke za prikaz faga i ima različite tipove peptidnih biblioteka koje možete izabrati. Prema dužini peptida, može se podijeliti na 7 biblioteka peptida, 9 biblioteka peptida, 10 biblioteka peptida, 12 biblioteka peptida i 15 biblioteka peptida. Prema prostornoj konformaciji polipeptida, može se podijeliti na linearnu biblioteku fagnih peptida i biblioteku cikličkih fagnih peptida.

Linearna biblioteka fagnih peptida

Peptidni gen se ubacuje u region koji kodira protein omotača genoma faga, obično pIII ili PVIII, i prikazuje se kao linearni ravni lanac. Linearni peptidi linearnog lanca mogu se lako razgraditi in vivo, a njihova sposobnost vezivanja i stabilnost mogu biti pogođeni.

biblioteka cikličkih fagnih peptida

Modificirani peptid u prstenu će formirati fiksnu konformaciju pod djelovanjem disulfidnih veza ili drugih veza, što ne samo da će uvelike poboljšati metaboličku stabilnost i biodostupnost, već će i bolje zadovoljiti zahtjeve vezivanja konformacije receptor-ligand (antitijelo-antigen).

Proces biblioteke peptida za prikaz faga

Selekcija faga

Kao nosioci se obično biraju fagi tipa M13 ili fagi tipa T7.

phage Display Peptide Library Construction

Konstruirajte vektor faga koji može sadržavati strani protein ili polipeptid koji kodira sekvencu, koja obično uključuje promotor, selektivne markere i odgovarajuće regulatorne elemente. Umetanje kodirajuće sekvence stranog proteina ili peptida u nosač faga, obično metodama rezanja i ligiranja restrikcijskim enzimima. Konstruisani vektor faga se transformiše u ćeliju domaćina, omogućavajući fagu da se replicira i eksprimira strane proteine ili peptide unutar ćelije. Biblioteke faga koje sadrže više različitih stranih proteina ili peptida pripremaju se kroz opsežnu transformaciju i amplifikaciju.

fag display Skrining biblioteke peptida

Fiksirajte ciljne molekule (kao što su proteini, receptori ili antitijela) na nosaču čvrste faze. Inkubirajte konstruisanu peptidnu biblioteku za prikaz faga sa fiksnom metom kako biste omogućili da se peptidi na fagu vežu za ciljni molekul. Tokom ovog procesa, nevezani bakteriofagi se uklanjaju ispiranjem uz zadržavanje bakteriofaga koji se vežu za cilj, a bakteriofagi visokog afiniteta se eluiraju. Oporavljeni bakteriofagi se pojačavaju inficiranjem Escherichia coli i zatim se podvrgavaju sljedećem krugu skrininga. Obično je potrebno 3-5 rundi skrininga da bi se dobili peptidi sa visokom efikasnošću vezivanja.

Dizajn i sinteza peptida

Sintetizirati peptide na osnovu skrining mjesta.

Slika 1. Konstrukcija biblioteke peptida za prikaz faga i proces skrininga

Povezana platforma

Alpha Lifetech može kupcima pružiti visokokvalitetne usluge izrade i skrininga peptidne biblioteke za prikaz faga

biblioteka antitijela za prikaz faga-Alpha Lifetech

Platforma za konstrukciju biblioteke peptida faga

Alpha Lifetech ima niz tehnologija za izgradnju biblioteke peptida. Mi uglavnom pružamo usluge izgradnje T7 peptidne biblioteke i usluge izgradnje biblioteke peptida M13 prema tipovima faga.

PROČITAJTE VIŠE

Skrining displeja faga-Alpha Lifetech skrining displeja faga-Alpha Lifetech

Platforma za skrining biblioteke peptida faga displeja

Alpha Lifetech ima bogato iskustvo u skriningu biblioteke peptidnih faga, pružajući snažnu tehničku podršku za otkrivanje malih molekula lijekova, kliničku dijagnozu, liječenje bolesti i biološka istraživanja.

PROČITAJTE VIŠE