Sistem za prikaz faga
Alpha Lifetech je izgradio savršen, stabilan sistem za prikaz faga koji štedi vrijeme za naučna istraživanja ili istraživanje projekata i olakšava naknadnu proizvodnju.
KONTAKTIRAJTE NAS01
Sistem za prikaz faga
Alpha Lifetech se dugi niz godina intenzivno bavi tehnologijom prikaza faga. Alpha Lifetech je izgradio savršenu stabilnu platformu za tehnologiju prikaza faga koja štedi vrijeme za naučna istraživanja ili istraživanje projekata i olakšava naknadnu proizvodnju. Imamo više sistema za prikaz faga koje kupci mogu izabrati, uključujući sisteme za prikaz faga M13, T7, T4 i λ. U zavisnosti od vaših eksperimentalnih potreba, možete odabrati odgovarajući sistem za prikaz faga. Alpha Lifetech također može pružiti kupcima usluge kao što su proizvodnja vhh antitijela, proizvodnja scfv antitijela i proizvodnja Fab antitijela.
Uvod u fagni prikaz
Tehnologija fagnog prikaza je tehnika koja koristi fage (virus koji inficira bakterije) za traženje funkcionalnih molekula vezivanja specifičnih proteina ili peptida. Tehnike konstrukcije biblioteke fagnih antitijela uključuju konstrukciju biblioteke Fab antitijela, konstrukciju biblioteke scFv antitijela, konstrukciju biblioteke vhh antitijela itd. Prema vrstama bakteriofaga, mogu se podijeliti na bakteriofag m13, T7 bakteriofag, T4 bakteriofag, λ bakteriofag i druge bakteriofage. Prema vrsti biblioteke, može se podijeliti na biblioteku slučajnih peptida, biblioteku cDNA, biblioteku antitijela i biblioteku proteina. Tehnologija fagnog prikaza je jednostavna za rukovanje i jeftina za korištenje, a sadrži Fab fagni prikaz, scfv fagni prikaz, vhh fagni prikaz. Međutim, ova tehnika ograničava raznolikost molekularne genetike u biblioteci koja ne može eksprimirati preduge sekvence.
Tehnologija prikaza faga sposobna je formirati fizičku vezu između prikazanog molekula i DNK sekvence koja kodira prikazani molekul, a aminokiselinska sekvenca specifičnog konjugata može se trenutno odrediti sekvenciranjem DNK željenog fragmenta u genomu faga.
Trenutno se tehnologija fagnog prikaza široko koristi. Među njima su značajna dostignuća u istraživanju i razvoju novih vakcina (jeftine i efikasne sintetičke vakcine), razvoju lijekova na bazi antitijela (skrining inhibitora enzima), transdukciji ćelijskih signala (skrining simuliranih epitopa) i istraživanju antigenskih epitopa (priprema monoklonskih antitijela).
Princip prikaza faga
Fagni prikaz je molekularna tehnologija zasnovana na genetskoj modifikaciji fagne DNK, koja veže ciljni fragment za protein fagnog omotača i na taj način ga eksprimira na površini faga. Strana DNK sekvenca se uvodi na specifično mjesto u nukleotidnoj sekvenci fagnog genoma koje kodira protein fagnog omotača (Sl. 1).
Kada dođe do infekcije fagom, gen faga počinje se eksprimirati unutar bakterijskog domaćina, a umetnuti ciljni fragment se prikazuje na površini faga kao kombinacija srodnog gena koji kodira protein omotača i klonirane sekvence.
Sl.1 Arhitektura viriona bakteriofaga M13 i princip tehnologije prikaza faga.(Izvor reference: Fagni prikaz i druge tehnologije prikaza peptida | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistemi za prikaz faga
Filamentozni fagi su najčešće korišteni sistemi za prikaz faga, a sistemi za prikaz faga mogu se konstruirati korištenjem drugih faga. Takvi sistemi mogu efikasnije prikazivati relativno velike peptide ili pregledavati biblioteke cDNA od sistema zasnovanih na filamentoznim fagima.
Sl. 2 Vrste bakteriofaga koje se koriste u prikazu faga.(Izvor reference: Fagni prikaz i druge tehnologije prikaza peptida | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Prednost sistema prikaza faga
Sistemi za prikaz faga obično koriste filamentozne fage, uključujući M13, fd i f1. U poređenju sa M13 fagima, T7 bakteriofagni fagi se sastoje od dvolančane DNK, koja pokazuje veću stabilnost i manje je sklona mutacijama tokom replikacije. T7 fag, kao nosač, brzo raste i može formirati plakove u roku od 3 sata, što štedi mnogo vremena za kloniranje i skrining.
Konstrukcija T7 fagnih biblioteka korištena je za ekspresiju površinskih i nepovršinskih gena, te za konstrukciju biblioteka za prikaz peptida, cDNA, genomske DNK i antitijela. To omogućava da se T7 fag koristi ne samo kao antimikrobno sredstvo, već i za skrining ciljeva lijekova u skriningu ciljeva organa (kao što su mozak, jetra i pluća), skrining ciljeva prepoznavanja antitijela, istraživanje fizioloških mehanizama itd. Također se može koristiti za dijagnozu i liječenje različitih bolesti.
Drugi oblici bakteriofaga
Selektivno infektivni fag
Za razliku od tradicionalnog prikaza faga, selektivni infektivni fag (SIP) direktno povezuje interakcije proteina i liganda produkcije s infekcijom i ekspanzijom faga bez potrebe za koracima eluacije.
Sl.3 Selektivno infektivni fag (SIP).(Izvor reference: Fagni prikaz i druge tehnologije prikaza peptida | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Pejzažni fagi
Pejzažne fage uzrokuju hiljade kopija stranih peptida raspoređenih oko tubularnih kapsida u super-uskim ponavljajućim obrascima, a polivalentni prikaz na pejzažnim fagima podstiče selekciju visokog afiniteta, tako da je nemoguće razlikovati visoki i niski afinitet peptidnih liganada.
Sl.4 Ideja pejzažnih faga. (Izvor reference: Fagni prikaz i druge tehnologije prikaza peptida | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Višestruki sistemi za prikaz faga
Sistem prikaza faga M13, faga T7, faga T4 i faga λ, koji kupci mogu izabrati.
Visokopropusni kapacitet probira
Možemo koristiti sisteme za prikaz faga za brzu konstrukciju velikih fagnih biblioteka i postizanje visokopropusnih eksperimenata skrininga.
Prilagođena usluga prikaza faga
Kupci mogu prilagoditi sveobuhvatne usluge prema zahtjevima projekta, kao što je skrining antitijela visokog afiniteta itd.
Širok raspon primjene
Primjenjuje se u oblastima kao što su inženjering antitijela, inženjering peptida i proteina, otkrivanje i razvoj lijekova, istraživanje interakcija proteina itd.
Ako imate bilo kakvih pitanja, slobodno nas kontaktirajte u bilo koje vrijeme.
Leave Your Message
16.07.2018. 
0102