Uvod u biblioteke sintetiziranih antitijela

Sintetizirana biblioteka antitijela, poznata i kao De novo biblioteka, je sintetička metoda koja koristi tehnike poput sinteze DNK ili prikaza faga za dizajniranje i sintezu kompletnih varijabilnih regija antitijela, uključujući okvirne regije i CDR-ove, bez oslanjanja na naivne biblioteke antitijela.

Biblioteka polusintetičkih antitijela stvara se kombinovanjem prirodnih biblioteka antitijela sa sintetičkom raznolikošću. Obično uključuje sintezu DNK oligonukleotida kako bi se proizveo skup različitih komplementarno određenih regija (CDR), koje se zatim kombinuju sa konstantnim okvirom antitijela izvedenim iz prirodnih izvora kao što su ljudske ili životinjske B ćelije. Sintetizirani CDR uvodi raznolikost u biblioteku, što rezultira antitijelima koja ciljaju širok spektar epitopa. Biblioteka polusintetičkih antitijela pruža kompromis između prirodne raznolikosti imunološkog sistema i kontrolirane raznolikosti postignute sintetičkim metodama.

Razlika između naivnih i sintetičkih biblioteka antitijela zavisi od izvora imunoglobulinskih gena. U međuvremenu, razlika između polusintetizirane i sintetizirane biblioteke antitijela leži u tome što se prva sastoji od dijela segmenata naivnih antitijela, kao što su laki ili teški lanac, i samo jedan od njih je sintetiziran in vitro; dok je sintetizirana u potpunosti izvedena iz vještačke sinteze putem PCR in vitro.

Alpha Lifetech može pružiti

Alpha Lifetech Inc.Možemo ponuditi biblioteku polusintetiziranih/sintetiziranih antitijela iz životinja i ljudi zasnovanu na našoj profesionalnoj platformi za otkrivanje antitijela. Sa dugogodišnjim iskustvom u genetskoj modifikaciji i izgradnji biblioteka, mogu se konstruirati sintetizirane biblioteke koje su sposobne proizvesti sintetička antitijela s afinitetom i specifičnošću koji prevazilaze kapacitet prirodnih antitijela.Alpha LifetechStručnjaci s ponosom objavljuju da možemo garantirati visoku stopu uspjeha u konstrukciji biblioteke antitijela koja sadrži 10^8 – 10^10 nezavisnih klonova.

Alpha Lifetech Inc.ponosno nudi sveobuhvatne usluge izgradnje biblioteka antitijela kako bi zadovoljio raznolike potrebe globalnih istraživača, uključujući scFv, Fab, VHH antitijela i prilagođene biblioteke. Naš cilj je razumjeti i ispuniti zahtjeve različitih kupaca te pomoći u rješavanju svih nadolazećih i novonastalih problema u istraživačkom radu.

Proces izgradnje biblioteka sintetiziranih antitijela

Dizajn
Faza dizajniranja uključuje odabir okvira antitijela i regija koje određuju komplementarnost (CDR) na osnovu postojećih sekvenci antitijela ili strukturnih podataka. Sintetička CDR antitijela također mogu biti dizajnirana za uvođenje specifičnih funkcionalnosti ili poboljšanje svojstava vezivanja.

Sinteza
Sintetička DNK koja kodira dizajnirane sekvence antitijela, uključujući i okvirne regije i CDR-ove, sintetizira se korištenjem hemijskih ili enzimskih metoda.

Skupština
Sintetizirani fragmenti DNK se sastavljaju u vektore za ekspresiju antitijela korištenjem tehnika kao što su PCR, ligacija ili Gibsonovo sastavljanje. Ovi vektori se zatim mogu uvesti u sisteme za ekspresiju kao što su bakterijske, kvasne ili sisarske ćelije za proizvodnju antitijela.

Provjera i odabir
Konstruisane biblioteke antitijela se pregledavaju i odabiru na antitijela sa željenim svojstvima korištenjem visokopropusnih metoda pregleda. To može uključivati ​​tehnike kao što su fagni prikaz, prikaz kvasca ili prikaz ribosoma, ovisno o formatu biblioteke i primjeni.

Usluga izgradnje biblioteka sintetiziranih antitijela

Alpha Lifetech Inc.pruža kupcima uslugu dizajna i sintetizacije biblioteka antitijela na jednom mjestu ligiranjem repertoara V-gena teškog i lakog lanca u fagni vektor korištenjem Cre-lox sistema rekombinacije specifičnog za mjesto kako bi se stvorio repertoar Fab-ova prikazanih na fagu koji sadrži 6,5 × 10^10 klonova. Biblioteka je dala antitijela protiv brojnih antigena, od kojih neki imaju nanomolarni afinitet. Generiranje biblioteke ljudskih antitijela zasniva se na M13 tehnologiji prikaza faga (prikazano na slici ispod).