Uvod u biblioteke sintetizovanih antitela

Biblioteka sintetizovanih antitela, takođe poznata kao De novo biblioteka, je sintetička metoda koja koristi tehnike kao što su sinteza DNK ili prikaz faga za dizajniranje i sintezu kompletnih varijabilnih regiona antitela, uključujući okvirne regione i CDR, bez oslanjanja na naivne biblioteke antitela.

Biblioteka polusintetičkih antitijela stvorena je kombinacijom prirodnih biblioteka antitijela sa sintetičkim diverzitetom. Obično uključuje sintezu DNK oligonukleotida kako bi se proizveo skup različitih komplementarnih određujućih regiona (CDR), koji se zatim kombinuju sa konstantnim okvirom antitela koji potiče iz prirodnih izvora kao što su ljudske ili životinjske B ćelije. Sintetizirani CDR unosi raznolikost u biblioteku, što rezultira antitijelima koja ciljaju širok spektar epitopa. Biblioteka polusintetičkih antitela obezbeđuje kompromis između prirodne raznolikosti imunog sistema i kontrolisane raznolikosti postignute sintetičkim metodama.

Razlika između naivnih i sintetičkih biblioteka antitijela ovisi o izvoru imunoglobulinskih gena. U međuvremenu, razlika između polusintetizovane i sintetizovane biblioteke antitijela leži u tome što se prva sastoji od dijela naivnih segmenata antitijela, kao što su laki ili teški lanci, a samo jedan od njih se sintetizira in vitro; dok je sintetizirani u potpunosti izveden iz umjetne sinteze PCR-om in vitro.

Alpha Lifetech može pružiti

Alpha Lifetech Inc.može ponuditi biblioteku polusintetiziranih/sintetiziranih antitijela od životinja i ljudi na osnovu naše profesionalne platforme za otkrivanje antitijela. Uz dugogodišnje iskustvo u genetskoj modifikaciji i izgradnji biblioteka, mogu se konstruisati sintetizovane biblioteke koje su u stanju da proizvode sintetička antitela sa afinitetom i specifičnošću iznad kapaciteta prirodnih antitela.Alpha Lifetech'sStručnjaci sa ponosom objavljuju da možemo garantovati visoku stopu uspjeha u izgradnji biblioteke antitijela koja sadrži 10^8 – 10^10 nezavisnih klonova.

Alpha Lifetech Inc.je ponosan što nudi sveobuhvatne usluge izgradnje biblioteke antitela kako bi zadovoljio različite potrebe globalnih istraživača, uključujući scFv, Fab, VHH antitela i prilagođene biblioteke. Naš cilj je razumjeti i zadovoljiti zahtjeve različitih kupaca i pomoći u rješavanju nadolazećih i novonastalih problema u istraživačkom radu.

Proces izgradnje biblioteka sintetizovanih antitela

Dizajn
Faza dizajna uključuje odabir okvira antitela i regiona koji određuju komplementarnost (CDR) na osnovu postojećih sekvenci antitela ili strukturnih podataka. Sintetička CDR antitijela također mogu biti dizajnirana da uvedu specifične funkcionalnosti ili poboljšaju svojstva vezivanja.

Sinteza
Sintetička DNK koja kodira dizajnirane sekvence antitijela, uključujući i okvirne regije i CDR, sintetizira se hemijskim ili enzimskim metodama.

Skupština
Sintetizirani DNK fragmenti se sklapaju u vektore ekspresije antitijela korištenjem tehnika kao što su PCR, ligacija ili Gibsonov sklop. Ovi vektori se zatim mogu uvesti u ekspresione sisteme kao što su ćelije bakterija, kvasca ili sisara za proizvodnju antitijela.

Skrining i selekcija
Konstruisane biblioteke antitijela su pregledane i odabrane za antitijela sa željenim svojstvima korištenjem metoda skrininga visoke propusnosti. Ovo može uključivati ​​tehnike kao što su prikaz faga, prikaz kvasca ili prikaz ribosoma, ovisno o formatu biblioteke i primjeni.

Služba za izgradnju biblioteka sintetizovanih antitela

Alpha Lifetech Inc.pruža klijentima jedinstveni dizajn i sintetiziranu uslugu biblioteka antitijela povezujući repertoare V-gena teškog i lakog lanca u vektor faga koristeći Cre-lox site-specific rekombinacijski sistem za kreiranje repertoara Fabs prikazanih na fagu koji se sastoji od 6,5 × 10^10 klonova. Biblioteka je dala Abs protiv brojnih antigena, od kojih neki imaju nanomolarni afinitet. Generisanje biblioteke ljudskih antitela zasniva se na tehnologiji prikaza faga M13 (prikazano na slici ispod).