Plataforma de desenvolupament d'anticossos Phage Display
Tecnologia de visualització de fages

Flux de treball de producció d'anticossos de visualització de fags
Passos | Contingut del servei | Cronologia |
---|---|---|
Pas 1: immunització dels animals | (1) Immunització animal 4 vegades, immunització de reforç 1 dosi, un total de 5 dosis immunitzades. (2) Es va recollir sèrum negatiu abans de la immunització i es va realitzar ELISA a la quarta dosi per detectar el títol sèric. (3) Si el títol d'anticossos sèrics de la quarta dosi compleix els requisits, s'administrarà una dosi addicional d'immunització 7 dies abans de la recollida de sang. Si no compleix els requisits, es continuarà amb la vacunació rutinària. (4) Potència qualificada, recollida de sang i separació de monòcits | 10 setmanes |
Pas 2: Preparació de l'ADNc | (1) Extracció d'ARN total PBMC (kit d'extracció d'ARN) (2) Preparació RT-PCR d'alta fidelitat d'ADNc (kit de transcripció inversa) | 1 dia |
Pas 3: construcció de la biblioteca d'anticossos | (1) Utilitzant cDNA com a plantilla, els gens es van amplificar mitjançant dues rondes de PCR. (2) Construcció i transformació de fags: vector de fagèmids d'empalmament de gens, transformació per electroporació de bacteris hostes TG1, construcció de biblioteca d'anticossos. (3) Identificació: seleccioneu aleatòriament 24 clons, taxa positiva d'identificació per PCR + taxa d'inserció. (4) Preparació assistida del fag: amplificació del fag M13 + purificació. (5) Rescat de la biblioteca de visualització de fages | 3-4 setmanes |
Pas 4: detecció de la biblioteca d'anticossos (3 rondes) | (1) Cribratge de 3 rondes per defecte (detecció en fase sòlida): cribratge de pressió per eliminar els anticossos inespecífics en la màxima mesura possible. (2) Selecció de bacteriòfag d'amplificació d'un clon + expressió induïda per IPTG + detecció ELISA de clons positius. (3) Tots els clons positius es van seleccionar per a la seqüenciació gènica. | 4-5 setmanes |

Serveis de Suport
Podem oferir diferents serveis de construcció de biblioteques immunes basades en animals i serveis de cribratge de biblioteques d'anticossos naturals segons les necessitats del client

Objectiu múltiple
Hi ha disponibles diversos serveis de descobriment d'anticossos diana: proteïnes, pèptids, molècules petites, virus, proteïnes de membrana, ARNm, etc.

Vectors múltiples
Servei de construcció de biblioteques personalitzat, podem proporcionar diversos vectors de bacteriòfags, inclosos PMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, i modificar-los segons les necessitats del client.

Plataforma madur
La capacitat d'emmagatzematge pot arribar a 10 ^ 8-10 ^ 9, les taxes d'inserció són totes per sobre del 90% i l'afinitat dels anticossos obtinguts mitjançant el cribratge es troba generalment al nivell nM pM
Servei de Desenvolupament d'Anticossos Monoclonals
Podem oferir serveis de desenvolupament d'anticossos monoclonals d'alta qualitat, puresa i altament específics, inclosa la producció d'anticossos monoclonals de ratolí i anticossos monoclonals de conill.
Plataforma Tecnològica Hybridoma
Inclou programa d'immunització, serveis de preparació d'anticossos, purificació d'anticossos, seqüenciació d'anticossos d'alt rendiment, validació d'anticossos, etc.
Plataforma de classificació de cèl·lules B individuals
Alpha Lifetech té avantatges en el temps de cribratge i en l'obtenció d'anticossos d'alta qualitat. Pot proporcionar disseny, síntesi i modificació d'antigen, immunitat animal, cribratge d'enriquiment de cèl·lules B individuals, seqüenciació de cèl·lules individuals.

Plataforma de desenvolupament d'anticossos Phage Display
Alpha Lifetech pot proporcionar serveis tècnics de desenvolupament d'anticossos de visualització de fags des de la preparació d'anticossos, la purificació d'anticossos, la seqüenciació d'anticossos, etc.