Plataforma de desenvolupament d'anticossos de visualització de fags

Alpha Lifetech, amb la seva àmplia experiència en projectes de descobriment d'anticossos, pot proporcionar serveis personalitzats d'anticossos monoclonals i policlonals per a múltiples espècies, així com serveis de construcció i cribratge de biblioteques d'anticossos. Alpha Lifetech pot proporcionar als clients productes d'anticossos i anticossos recombinants de qualitat garantida, així com els serveis corresponents, per preparar anticossos eficients, altament específics i estables. Mitjançant la utilització de plataformes integrals d'anticossos i enginyeria d'anticossos, oferim serveis que cobreixen les etapes aigües avall i aigües avall de la producció d'anticossos, incloent-hi serveis tècnics com la preparació, la purificació, la seqüenciació i la validació d'anticossos.

Alpha Lifetech té una plataforma madura de descobriment d'anticossos que ofereix als clients una gamma de serveis que inclouen immunitat animal, construcció i cribratge de biblioteques d'anticossos de visualització de fags, seqüenciació d'anticossos, expressió d'anticossos, purificació d'anticossos, validació d'anticossos i marcatge d'anticossos basat en tecnologia d'hibridoma, tecnologia de cèl·lules B individuals, tecnologia de visualització de fags i molt més. Alpha Lifetech té una línia de producció estàndard i, a més dels serveis de preparació d'anticossos, també es poden proporcionar serveis de suport com ara humanització d'anticossos, maduració d'afinitat d'anticossos, disseny i desenvolupament de fàrmacs ADC i disseny de seqüències posteriors de CAR-T. Al mateix temps, Alpha Lifetech ha construït una biblioteca d'anticossos basada en plataformes tecnològiques de visualització de fags M13, T4 i T7, amb una capacitat d'emmagatzematge de fins a 10^8-10^9. La taxa positiva, la taxa d'inserció i la diversitat de la biblioteca poden superar el 90%.

Tecnologia de visualització de fags

La producció d'anticossos monoclonals es va preparar inicialment mitjançant la tecnologia d'anticossos monoclonals d'hibridoma per produir anticossos monoclonals d'hibridoma de ratolí. Concretament, mitjançant la fusió de cèl·lules de la melsa de ratolins immunitzats amb cèl·lules de mieloma d'humans o ratolins, es formen cèl·lules d'hibridoma, que secreten anticossos monoclonals d'hibridoma específics. Mitjançant la modificació humanitzada dels anticossos monoclonals de ratolí i la modificació per enginyeria genètica dels anticossos per donar-los una regió d'immunoglobulina humana constant, es pot reduir la seva immunogenicitat. L'enginyeria d'anticossos monoclonals s'utilitza àmpliament en aplicacions biomèdiques i clíniques.

Alpha Lifetech pot proporcionar serveis integrals d'enginyeria d'anticossos, des del disseny de protocols de recerca preclínica fins al descobriment de conjugats de fàrmacs i anticossos (ADC) i la validació en animals. Els conjugats de fàrmacs i anticossos (ADC) poden administrar fàrmacs de quimioteràpia a les cèl·lules canceroses. Després d'unir-se a objectius específics expressats a les cèl·lules canceroses, l'ADC allibera fàrmacs citotòxics a les cèl·lules canceroses. Alpha Lifetech també pot oferir als clients serveis integrals de maduració d'afinitat d'anticossos. Amb l'optimització avançada de mutacions i la tecnologia de cribratge de visualització de fags d'alt rendiment, primer es cribren els anticossos amb certa afinitat i, a continuació, s'introdueixen mutacions d'aminoàcids per generar diverses variants. Posteriorment, es van avaluar i cribrar anticossos d'alta afinitat mitjançant tècniques de cribratge. Després de múltiples rondes d'optimització i anàlisi estructural, finalment es van obtenir anticossos amb una afinitat més alta i una especificitat més forta.

Alpha Lifetech pot construir diversos tipus de biblioteques de visualització de fags d'anticossos, incloent-hi biblioteques immunitàries, biblioteques natives, biblioteques semisintètiques i biblioteques sintètiques. Basant-se en l'alta capacitat de les biblioteques d'anticossos, es poden obtenir anticossos altament específics. Es poden proporcionar múltiples vectors fagèmids com ara pMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, així com soques com ara TG1 E. coli, XL1 Blue i ER2738. A més d'una capacitat de la biblioteca de fins a 10^9, la taxa d'inserció de fragments diana de la biblioteca també és alta, creant condicions suficients per a la detecció d'anticossos que satisfan els clients. El diagrama de flux del servei de preparació d'anticossos d'Alpha Lifetech basat en la tecnologia de visualització de fags es mostra a la Figura 1.

Fig. 1 Diagrama del procés per a la preparació d'anticossos monoclonals basat en la tecnologia de visualització de fags.

Flux de treball de producció d'anticossos de visualització de fags

Passos	Contingut del servei	Cronologia
Pas 1: Immunització dels animals	(1) Immunització animal 4 vegades, immunització de reforç 1 dosi, un total de 5 dosis immunitzades. (2) Es va recollir sèrum negatiu abans de la immunització i es va realitzar ELISA a la quarta dosi per detectar el títol sèric. (3) Si el títol d'anticossos sèrics de la quarta dosi compleix els requisits, s'administrarà una dosi addicional d'immunització 7 dies abans de l'extracció de sang. Si no compleix els requisits, es continuarà amb la immunització rutinària. (4) Potència qualificada, recollida de sang i separació de monòcits	10 setmanes
Pas 2: Preparació de l'ADNc	(1) Extracció d'ARN total de PBMC (kit d'extracció d'ARN) (2) Preparació d'ADNc per RT-PCR d'alta fidelitat (kit de transcripció inversa)	1 dia
Pas 3: Construcció de la biblioteca d'anticossos	(1) Utilitzant l'ADNc com a plantilla, els gens es van amplificar mitjançant dues rondes de PCR. (2) Construcció i transformació de fags: empalmament de gens del vector fagèmid, transformació per electroporació de bacteris hostes TG1, construcció de la biblioteca d'anticossos. (3) Identificació: Seleccionar aleatòriament 24 clons, taxa d'identificació PCR positiva + taxa d'inserció. (4) Preparació assistida del fag: amplificació + purificació del fag M13. (5) Rescat de la biblioteca de visualització de fagos	3-4 setmanes
Pas 4: Cribratge de la biblioteca d'anticossos (3 rondes)	(1) Cribratge per defecte en 3 rondes (cribratge en fase sòlida): cribratge a pressió per eliminar anticossos no específics en la mesura que sigui possible. (2) Amplificació d'un sol clon amb selecció de bacteriòfags + expressió induïda per IPTG + detecció de clons positius per ELISA. (3) Tots els clons positius van ser seleccionats per a la seqüenciació de gens.	4-5 setmanes

Avantatge de la tecnologia de visualització de fags

Alpha Lifetech té una àmplia experiència en el camp del desenvolupament d'anticossos. Amb els anys, Alpha Lifetech ha establert una plataforma integral de desenvolupament d'anticossos.

Serveis de suport

Podem oferir diferents serveis de construcció de biblioteques immunitàries basades en animals i serveis de cribratge de biblioteques d'anticossos naturals segons les necessitats del client.

Objectiu múltiple

Hi ha disponibles serveis de descobriment d'anticossos diana múltiple: proteïnes, pèptids, molècules petites, virus, proteïnes de membrana, ARNm, etc.

Vectors múltiples

Servei personalitzat de construcció de biblioteques, podem proporcionar diversos vectors de bacteriòfags, inclosos PMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, i modificar-los segons les necessitats del client.

Plataforma per a adults

La capacitat d'emmagatzematge pot arribar a 10^8-10^9, les taxes d'inserció són totes superiors al 90% i l'afinitat dels anticossos obtinguts mitjançant el cribratge és generalment al nivell de nM pM.

SERVEI relacionat

Estratègies de desenvolupament d'anticossos múltiples

Servei de Desenvolupament d'Anticossos Monoclonals

Plataforma Tecnològica d'Hibridomes

Plataforma de classificació de cèl·lules B individuals

Plataforma de desenvolupament d'anticossos de visualització de fags

desenvolupament d'anticossos monoclonals: Alpha Lifetech

Servei de Desenvolupament d'Anticossos Monoclonals

Podem oferir serveis de desenvolupament d'anticossos monoclonals d'alta qualitat, alta puresa i altament específics, inclosa la producció d'anticossos monoclonals de ratolí i anticossos monoclonals de conill.

Plataforma Tecnològica d'Hibridomes

Incloent-hi el programa d'immunització, els serveis de preparació d'anticossos, la purificació d'anticossos, la seqüenciació d'alt rendiment d'anticossos, la validació d'anticossos, etc.

cribratge de cèl·lules b - Alpha Lifetech

Plataforma de classificació de cèl·lules B individuals

Alpha Lifetech té avantatges en el temps de cribratge i l'obtenció d'anticossos d'alta qualitat. Pot proporcionar disseny, síntesi i modificació d'antígens, immunitat animal, cribratge d'enriquiment de cèl·lules B individuals i seqüenciació de cèl·lules individuals.