Servei de descobriment d'anticossos scFv

Alpha Lifetech Inc.s'enorgulleix d'oferir serveis integrals de construcció de biblioteques scFv per satisfer les diverses necessitats dels científics de tot el món. El nostre objectiu és entendre i satisfer les demandes dels diferents clients i ajudar amb qualsevol problema emergent en el treball de recerca.

Què és l'anticòs scFv-monocatenari de fragments variables?

Un anticòs monocatenari consisteix en un fragment variable d'anticòs lleuger (VL) i pesant (VH) units per un enllaç peptídic flexible, que es pot expressar fàcilment en una forma funcional a la superfície del fag i, per tant, es coneix comunament com a fragment variable de cadena monocatenària (scFv). El fragment scFv és la unitat més petita de molècula d'immunoglobulina (excepte els nanocossos) amb funció en les activitats d'unió a antigens i permet que l'enginyeria de proteïnes millori les propietats del scFv (fragment variable de cadena monocatenària), com ara l'augment de l'afinitat i l'alteració de l'especificitat. A Alpha Lifetech Inc., els anticossos scFv s'han construït principalment a partir d'hibridoma, cèl·lules de la melsa de ratolins immunitzats i limfòcits B d'humans. L'ARN o ARNm total s'aïlla primer de l'hibridoma, la melsa, les cèl·lules limfàtiques i les cèl·lules de la medul·la òssia, seguit de la transcrició inversa en ADNc per servir com a plantilla per a l'amplificació del gen dels anticossos (PCR).

Desenvolupament d'anticossos scFv: tecnologia de visualització de fags

La diversitat d'una biblioteca està determinada pel nombre de clons independents. Per produir una biblioteca d'anticossos scFv de gran mida, els nostres científics utilitzaran la nostra estratègia patentada de dos passos per a la generació de biblioteques. En el primer pas del procediment descrit, es preparen repertoris primaris a partir de productes de PCR que codifiquen els dominis VH, Vκ i Vλ, donant biblioteques típiques de mida mitjana (1-100 milions de clons). En el segon pas, els fragments VH (o VL) s'aïllen mitjançant la digestió de l'ADN plasmídic purificat dels repertoris primaris i es clonen en el vector fagèmid acceptor que conté els repertoris VL (o VH). Aquesta innovació augmenta dràsticament la mida de les biblioteques (10¹⁰-10¹²clons).

Cribratge a gran escala i d'alt rendiment d'anticossos scFv

Per a la preparació a gran escala de scFv, és evident que l'elecció de l'hoste d'expressió tindrà un impacte significatiu en el disseny del procés, les estratègies de processament posteriors i el cost del procés. L'elecció de la via de fabricació dependrà de la rellevància de la modificació posttraduccional i del calendari per al desenvolupament clínic i l'economia, que també depenen essencialment del "sistema hoste". No hi ha cap sistema d'expressió universal que garanteixi alts nivells d'expressió del producte per a una àmplia gamma de diferents anticossos o fins i tot proteïnes.