L'anticòs monoclonal (mAb) com a pioner dels fàrmacs d'anticossos, més de 100 anticossos monoclonals han estat aprovats per al tractament del càncer, les malalties infeccioses, el mercat de desenvolupament de fàrmacs propi i demostra el seu valor terapèutic únic. La tecnologia d'anticossos de cèl·lules B individuals, com a nova generació de tecnologia de desenvolupament d'anticossos, pot aïllar anticossos de cèl·lules B individuals de manera eficient i ràpida, cosa que representa un gran avenç en la tecnologia de producció d'anticossos després de la visualització d'hibridomes i fags. La tecnologia de classificació de cèl·lules B individuals es pot utilitzar per a la generació d'anticossos contra múltiples espècies com conills, ratolins, camells, ovelles i pollastres. La tecnologia de cèl·lules B individuals té avantatges destacats com ara una alta especificitat, una alta activitat i una alta afinitat. Basada en la plataforma de classificació de cèl·lules B individuals, Alpha Lifetech té avantatges en el temps de cribratge i l'obtenció d'anticossos d'alta qualitat. Pot proporcionar disseny, síntesi i modificació d'antígens, immunitat animal, cribratge d'enriquiment de cèl·lules B individuals, seqüenciació de cèl·lules individuals, cribratge d'alt rendiment, expressió i purificació, serveis tècnics integrals com ara la verificació funcional per satisfer les diverses necessitats dels clients.

Seleccionar l'antigen adequat per als animals d'experimentació (com ara ratolins, conills, etc.) per a l'estimulació immunitària, de manera que puguin produir anticossos específics contra l'antigen.

La immunització animal és l'etapa inicial de la generació d'anticossos. La immunització animal és l'ús del mecanisme de resposta immunitària humoral del propi organisme. Mitjançant l'estimulació contínua d'antígens, els animals produeixen una forta resposta immunitària i després secreten anticossos específics contra antígens específics.

Els limfòcits B es van aïllar de la sang perifèrica, la melsa o els ganglis limfàtics d'animals immunes. Aquests limfòcits B han estat estimulats immunològicament per produir anticossos contra antígens específics.

Mitjançant mètodes físics o químics (com ara centrifugació per gradient de densitat, separació amb perles magnètiques, etc.), l'enriquiment de cèl·lules B, l'eliminació de cèl·lules impureses, millora la puresa de les cèl·lules B i l'eficiència de la separació posterior.

La classificació cel·lular activada per fluorescència (FACS), la separació cel·lular magnètica (MACS), el classificador cel·lular microfluídic (MCS) o altres tècniques de cribratge d'alt rendiment, combinades amb l'etiquetatge específic d'antigen, es poden utilitzar per cribrar cèl·lules B individuals a partir de cèl·lules B enriquides per produir anticossos dirigits.

Quan s'aïlla una sola cèl·lula B d'una població mixta de cèl·lules B, cal seqüenciar els seus gens d'anticossos mitjançant la tecnologia de seqüenciació de cèl·lules individuals i analitzar-los per obtenir la informació de la seqüència d'ADN de la regió variable de la cadena pesada (VH) i la regió variable de la cadena lleugera (VL). La tecnologia de seqüenciació de cèl·lules individuals inclou principalment tres passos: aïllament de cèl·lules individuals, amplificació d'àcids nucleics intracel·lulars i anàlisi de seqüenciació. El principi de la seqüenciació de cèl·lules individuals és amplificar l'ADN o ARN del genoma complet de cèl·lules individuals aïllades per obtenir un genoma o transcriptoma complet amb una alta cobertura per a la seqüenciació d'alt rendiment.

Mitjançant el cribratge d'alt rendiment, es poden obtenir seqüències gèniques d'anticossos de milers de limfòcits B alhora, cosa que accelera enormement la velocitat de descobriment d'anticossos. Aquesta informació de seqüència es pot utilitzar posteriorment per a la construcció i el cribratge de biblioteques d'anticossos.

Fig. 2 Diagrama esquemàtic de la captura d'un sol limfòcit B, la construcció de la biblioteca, el cribratge d'alt rendiment i la seqüenciació.(Font de referència: La seqüenciació massivament paral·lela de receptors de cèl·lules B unicel·lulars permet un descobriment ràpid de diversos anticossos reactius a l'antigen.)

(1) Proteïna recombinant: ≥2,5 mg, puresa de la proteïna >85%, pes molecular de la proteïna superior a 10 kDa, concentració de proteïna soluble entre 0,5 i 5 mg/mL. Si cal purificació per afinitat d'antigen, calen 10 mg addicionals de proteïna recombinant.

(2) Polipèptids i molècules petites: pèptid nu ≥10 mg, puresa del pèptid >90%, no menys de 10 AA, acoblament KLH/BSA/OVA o altres proteïnes portadores; Les molècules petites requereixen una avaluació estructural prèvia.