Introducció a les biblioteques d'anticossos sintetitzats

Una biblioteca d'anticossos sintetitzada, també coneguda com a biblioteca de novo, és un mètode sintètic que utilitza tècniques com la síntesi d'ADN o la visualització en fags per dissenyar i sintetitzar regions variables d'anticossos completes, incloent-hi regions marc i CDR, sense dependre de biblioteques d'anticossos naïves.

Una biblioteca d'anticossos semisintètics es crea combinant biblioteques d'anticossos naturals amb diversitat sintètica. Normalment implica sintetitzar oligonucleòtids d'ADN per produir un conjunt de diferents regions determinants complementàries (CDR), que després es combinen amb un marc d'anticossos constant derivat de fonts naturals com ara cèl·lules B humanes o animals. La CDR sintetitzada introdueix diversitat a la biblioteca, donant lloc a anticossos dirigits a una àmplia gamma d'epítops. La biblioteca d'anticossos semisintètics proporciona un compromís entre la diversitat natural del sistema immunitari i la diversitat controlada aconseguida mitjançant mètodes sintètics.

La distinció entre biblioteques d'anticossos naïfs i sintètiques depèn de la font dels gens d'immunoglobulines. Mentrestant, la diferència entre una biblioteca d'anticossos semisintetitzada i una sintetitzada rau en què la primera consisteix en part de segments d'anticossos naïfs, com ara la cadena lleugera o la cadena pesant, i només un d'ells es sintetitza in vitro; mentre que la sintetitzada deriva totalment d'una síntesi artificial per PCR in vitro.

Alpha Lifetech pot proporcionar

Alpha Lifetech Inc.pot oferir una biblioteca d'anticossos semisintetitzats/sintetitzats d'animals i humans basada en la nostra plataforma professional de descobriment d'anticossos. Amb anys d'experiència en modificació genètica i construcció de biblioteques, es poden construir biblioteques sintetitzades capaces de produir anticossos sintètics amb afinitat i especificitat més enllà de la capacitat dels anticossos naturals.Alpha LifetechEls experts estan orgullosos d'anunciar que podem garantir una alta taxa d'èxit en la construcció d'una biblioteca d'anticossos que conté entre 10^8 i 10^10 clons independents.

Alpha Lifetech Inc.es complau a oferir serveis integrals de construcció de biblioteques d'anticossos per satisfer les diverses necessitats dels investigadors globals, incloent-hi scFv, Fab, anticossos VHH i biblioteques personalitzades. El nostre objectiu és entendre i satisfer les demandes dels diferents clients i ajudar amb qualsevol problema emergent en el treball de recerca.

Procés del servei de construcció de biblioteques d'anticossos sintetitzats

Disseny
La fase de disseny implica la selecció de marcs d'anticossos i regions determinants de complementarietat (CDR) basant-se en seqüències d'anticossos existents o dades estructurals. Els anticossos CDR sintètics també es poden dissenyar per introduir funcionalitats específiques o millorar les propietats d'unió.

Síntesi
L'ADN sintètic que codifica les seqüències d'anticossos dissenyades, incloent-hi tant les regions marc com les CDR, es sintetitza mitjançant mètodes químics o enzimàtics.

Assemblea
Els fragments d'ADN sintetitzats s'assemblen en vectors d'expressió d'anticossos mitjançant tècniques com la PCR, la lligació o l'assemblatge de Gibson. Aquests vectors es poden introduir en sistemes d'expressió com ara cèl·lules bacterianes, de llevat o de mamífers per a la producció d'anticossos.

Selecció i cribratge
Les biblioteques d'anticossos construïdes es cribren i es seleccionen per anticossos amb les propietats desitjades mitjançant mètodes de cribratge d'alt rendiment. Això pot implicar tècniques com ara la visualització en fags, la visualització en llevats o la visualització en ribosomes, depenent del format i l'aplicació de la biblioteca.

Servei de construcció de biblioteques d'anticossos sintetitzats

Alpha Lifetech Inc.proporciona als clients un servei integral de disseny i sintetització de biblioteques d'anticossos mitjançant la lligació dels repertoris de gens V de cadena pesada i lleugera en un vector de fag utilitzant el sistema de recombinació específica del lloc Cre-lox per crear un repertori de Fabs que es mostren en el fag que comprèn 6,5 × 10^10 clons. La biblioteca va produir Abs contra nombrosos antígens, alguns amb afinitats nanomolars. La generació de la biblioteca d'anticossos humans es basa en la tecnologia de visualització del fag M13 (que es mostra a la figura següent).