Introducció a les biblioteques d'anticossos sintetitzats

La biblioteca d'anticossos sintetitzats, també coneguda com a biblioteca De novo, és un mètode sintètic que utilitza tècniques com la síntesi d'ADN o la visualització de fags per dissenyar i sintetitzar regions variables d'anticossos completes, incloses regions marc i CDR, sense dependre de biblioteques d'anticossos ingènues.

La biblioteca d'anticossos semisintètics es crea combinant biblioteques d'anticossos naturals amb diversitat sintètica. Normalment implica sintetitzar oligonucleòtids d'ADN per produir un conjunt de diferents regions determinants complementàries (CDR), que després es combinen amb un marc constant d'anticossos derivats de fonts naturals com les cèl·lules B humanes o animals. El CDR sintetitzat introdueix diversitat a la biblioteca, donant lloc a anticossos dirigits a una àmplia gamma d'epítops. La biblioteca d'anticossos semisintètics proporciona un compromís entre la diversitat natural del sistema immunitari i la diversitat controlada aconseguida mitjançant mètodes sintètics.

La distinció entre biblioteques d'anticossos ingènues i sintètiques depèn de la font dels gens de la immunoglobulina. Mentrestant, la diferència entre una biblioteca d'anticossos semisintetitzada i sintetitzada rau en que la primera consisteix en una part de segments d'anticossos naïfs, com la cadena lleugera o la cadena pesada, i només un d'ells es sintetitza in vitro; mentre que el sintetitzat es deriva totalment d'una síntesi artificial per PCR in vitro.

Alpha Lifetech pot proporcionar

Alpha Lifetech Inc.pot oferir una biblioteca d'anticossos semisintetitzats/sintetitzats d'animals i humans basada en la nostra plataforma professional de descobriment d'anticossos. Amb anys d'experiència en modificació genètica i construcció de biblioteques, es poden construir biblioteques sintetitzades que siguin capaços de produir anticossos sintètics amb afinitat i especificitat més enllà de la capacitat dels anticossos naturals.Alpha Lifetech'sEls experts estan orgullosos d'anunciar que podem garantir una alta taxa d'èxit en la construcció d'una biblioteca d'anticossos que contingui 10 ^ 8 - 10 ^ 10 clons independents.

Alpha Lifetech Inc.s'enorgulleix d'oferir serveis integrals de construcció de biblioteques d'anticossos per satisfer les diverses necessitats dels investigadors globals, com ara scFv, Fab, anticossos VHH i biblioteques personalitzades. El nostre objectiu és entendre i satisfer les demandes dels diferents clients i ajudar-nos amb qualsevol problema proper i emergent en el treball de recerca.

Procés del servei de construcció de biblioteques d'anticossos sintetitzats

Disseny
La fase de disseny consisteix a seleccionar marcs d'anticossos i regions determinants de la complementarietat (CDR) basant-se en seqüències d'anticossos o dades estructurals existents. Els anticossos CDR sintètics també es poden dissenyar per introduir funcionalitats específiques o millorar les propietats d'unió.

Síntesi
L'ADN sintètic que codifica les seqüències d'anticossos dissenyades, incloses les regions marc i les CDR, es sintetitza mitjançant mètodes químics o enzimàtics.

Assemblea
Els fragments d'ADN sintetitzats s'agrupen en vectors d'expressió d'anticossos mitjançant tècniques com la PCR, la lligadura o el muntatge de Gibson. Aquests vectors es poden introduir després en sistemes d'expressió com ara cèl·lules bacterianes, de llevats o de mamífers per a la producció d'anticossos.

Projecció i selecció
Les biblioteques d'anticossos construïdes es seleccionen i es seleccionen per als anticossos amb les propietats desitjades mitjançant mètodes de cribratge d'alt rendiment. Això pot implicar tècniques com ara la visualització de fags, la visualització de llevats o la visualització de ribosomes, depenent del format i l'aplicació de la biblioteca.

Servei de Construcció de Biblioteques d'Anticossos Sintetitzats

Alpha Lifetech Inc.ofereix als clients un disseny únic i un servei sintetitzat de biblioteques d'anticossos lligant els repertoris del gen V de la cadena pesada i lleugera en un vector de fags mitjançant el sistema de recombinació específic del lloc Cre-lox per crear un repertori de Fabs que es mostren al fag que inclou 6, 5 × 10 ^ 10 clons. La biblioteca va produir Abs contra nombrosos antígens, alguns amb afinitats nanomolars. La generació de la biblioteca d'anticossos humans es basa en la tecnologia de visualització de fags M13 (que es mostra a la figura següent).