Plataporma sa Pagpalambo sa Bispecific Antibody

Ang Alpha Lifetech makahatag sa mga kustomer og mga produkto ug serbisyo sa antibody discovery ug recombinant protein nga sigurado ang kalidad. Makaandam kami og mga antibody nga adunay taas nga efficacy, lig-on nga specificity, ug maayong stability. Ang Alpha Lifetech adunay lain-laing mga instrumento ug kagamitan sa antibody purification, nga makahatag og mga serbisyo sa antibody purification gikan sa lain-laing mga tinubdan sama sa koneho, karnero, manok, ug ilaga nga monoclonal antibodies, ingon man mga serbisyo sa Protein A/G affinity purification ug mga serbisyo sa antibody separation ug purification. Base sa komprehensibo nga pagtukod sa platform system sa antibody discovery platform, protein platform, ug uban pa, among gisakup ang upstream ug downstream nga mga serbisyo sa produksiyon sa antibody, ug makahatag og mga teknikal nga serbisyo gikan sa antibody preparation, bispecific antibody purification ug antibody separation ug purification, antibody sequencing, antibody validation, ug uban pa, nga magamit alang sa bispecific antibody therapy.

Ang monoclonal antibodies nagtumong sa mga immunoglobulin nga gihimo sa usa ka B cell nga adunay taas nga espesipisidad alang sa mga antigen o epitope. Ang paghimo og monoclonal antibodies sa sinugdanan giandam gamit ang teknolohiya sa hybridoma aron makahimo og mga antibody sa ilaga. Sa piho, pinaagi sa paghiusa sa mga spleen cell gikan sa nabakunahan nga mga ilaga uban sa mga myeloma cell gikan sa mga tawo o ilaga, ang mga hybridoma cell maporma, nga magpagawas og mga espesipikong antibody. Ang namugna nga mga monoclonal antibodies sa ilaga gigamit labi na sa panukiduki sa hayop ug pagdayagnos sa sakit pagkahuman sa mga serbisyo sa pagputli. Bisan pa, ang lawas sa tawo maghimo usa ka immune response sa mga langyaw nga protina sa ilaga, mao nga adunay hinungdanon nga mga limitasyon sa klinikal nga aplikasyon sa paghimo og mga monoclonal antibodies sa ilaga. Sa ulahi, gigamit sa mga tawo ang "humanization" aron maandam ang mga monoclonal antibodies gikan sa mga ilaga, ug gigamit ang teknolohiya sa genetic engineering aron mabag-o ang mga antibody sa ilaga aron adunay kanunay nga rehiyon sa human immunoglobulin aron makunhuran ang ilang immunogenicity. Kini nga klase sa antibody nailhan usab nga humanized monoclonal antibody. Dugang pa, ang paggamit sa mga selula sa tawo aron makahimo og mga monoclonal antibodies gitawag nga whole human monoclonal antibody preparation. Ang mga monoclonal antibodies kaylap nga gigamit sa biomedical ug clinical applications. Sa panukiduki sa medisina, ang mga monoclonal antibodies magamit isip mga immunomodulator, ang therapeutic monoclonal antibodies magamit alang sa chemotherapy sa kanser ug pagtambal sa impeksyon sa virus, ug ang paghimo sa mga monoclonal antibody conjugates gigamit labi na alang sa pagtambal sa kanser.

Pasiuna sa Bispecific Antibody

Niadtong 1960, gisugyot ang konsepto sa bispecific antibodies. Ang bispecific antibodies, nailhan usab nga bispecific monoclonal antibodies, mga artipisyal nga gi-synthesize nga antibodies gamit ang genetic engineering technology. Isip usa ka engineered artificial antibody, ang bispecific antibodies kasagaran nahisakop sa IgG subclass ug adunay antigen binding fragment nga nagtumong sa CD3 subunit. Ang bispecific antibodies adunay duha ka specific antigen binding sites nga dungan nga maka-bind ug makaila sa duha ka lain-laing antigens, o duha ka lain-laing epitopes sa usa ka antigen. Kon itandi sa monoclonal antibodies, ang bispecific antibodies adunay dugang nga specific antigen binding site, busa adunay mas lig-on nga specificity ug targeting ability, nga mas tukma nga maka-target sa mga tumor cells ug makapakunhod sa off-target toxicity. Ang bispecific antibodies dungan nga makahimo sa daghang biological functions, sama sa pag-recruit sa immune cells, pag-block sa signaling pathways, ug direktang pagpatay sa mga tumor cells. Ang unang mga bispecific antibodies giandam pinaagi sa chemical conjugation o cell fusion, apan kini nga pamaagi mahimong hinay nga miuswag tungod sa random nga kombinasyon ug kalisud sa pag-isolate sa target combination. Uban sa padayon nga pag-uswag sa teknolohiya sa genetic engineering, daghang bag-ong mga plataporma sa teknolohiya ang naugmad, sama sa knots in holes (KIH), CrossMab, DVD Ig, ug uban pa. Kini nga mga plataporma epektibong makasulbad sa mga problema sama sa heavy chain ug light chain mismatches, ug makapauswag sa pagkaparehas ug ani sa bispecific antibodies.

Fig. 1 Gipasimple nga eskematiko nga kinatibuk-ang pagtan-aw sa gisugyot nga mga mekanismo sa aksyon para sa bispecific antibodies (bsAbs) sa mga klinikal nga pagsulay para sa oncology.(Tinubdan sa hulagway: Usa ka pagrepaso sa bispecific antibodies ug antibody constructs sa oncology ug clinical challenges - ScienceDirect)

Teknolohiya sa Paghimo og Bispecific Antibodies

Ang mga nag-unang pamaagi sa paghimo og bispecific antibody naglakip sa chemical coupling, four source hybridoma, ug genetic engineering antibody preparation. Lakip niini, ang chemical coupling method nag-couple sa duha ka intact IgG o duha ka F (ab ') 2 antibody fragments ngadto sa bispecific antibodies gamit ang chemical coupling agents sama sa phthalimide ug dithioacylbenzoic acid. Kini nga pamaagi yano ug dali gamiton, apan kini mahimong makadaot sa antigen binding site, makapakunhod sa antibody activity, ug ang coupling agent mismo adunay usa usab ka degree sa carcinogenicity. Ang four source hybridoma method gibase sa pagsagol sa somatic cells gikan sa duha ka lain-laing hybridoma cell lines aron ipahayag ang katugbang nga mouse IgG. Pinaagi sa genetic engineering technology, ang mga antibodies mahimong genetically modified aron maporma ang bispecific antibodies. Duha ka lain-laing monoclonal antibodies ang gihimo, ug ang Fab fragments o heavy chain ug light chain variable regions sa duha ka antibodies gibulag nga giputol. Pinaagi sa cross-linking reaction o chain recombination technology, ang duha ka fragments gihiusa aron maporma ang usa ka bispecific antibody. Bisan kung ang pagkakomplikado sa genetic engineering technology medyo taas, kini ang labing kasagarang gigamit nga pamaagi alang sa paghimo og bispecific antibody aron ma-adjust ang istruktura ug function sa mga antibodies. Kon magpahigayon og bispecific antibody design, ang prinsipyo sa antibody cross reactivity mahimong gamiton, apan ang antibody cross reactivity mahimong hinungdan sa mga non-specific nga reaksyon, busa kini pagaisipon pag-ayo sa praktikal nga aplikasyon sa bispecific antibody design, sama sa bispecific antibody therapy.

Pagputli sa mga Bispecific Antibodies

Ang bispecific antibody purification mao ang proseso sa pag-isolate ug pagputli sa mga high-purity target antibodies. Duha ka pamaagi, ang centrifugation ug deep filtration, ang gigamit aron makuha ang pipila ka soluble impurities. Ang target bispecific antibody unang makuha pinaagi sa affinity chromatography. Para sa mga IgG sama sa bispecific antibodies, gigamit ang protein A affinity chromatography, samtang para sa mga non-IgG sama sa bispecific antibodies, magamit ang light chain based affinity chromatography. Pagkahuman, ang antibody gi-incubate ubos sa ubos nga pH nga kondisyon sulod sa usa ka piho nga yugto sa panahon, hinungdan nga ang istruktura sa protina sa ibabaw sa virus envelope madaot, sa ingon mawad-an sa abilidad sa pag-infect sa mga selula. Ang intermediate deep filtration gihimo aron matangtang pa ang mga impurities sama sa host cell proteins (HCP). Ang kaputli sa mga antibodies gipauswag pinaagi sa mga pamaagi sama sa ion exchange chromatography, ug ang bisan unsang nahabilin nga mga virus gikuha pinaagi sa nanofiltration o ultrafiltration techniques. Sa katapusan, ang sample gi-concentrate ug gipulihan sa usa ka angay nga formulation buffer.

Daloy sa Trabaho sa Serbisyo sa Paghimo og Bispecific Antibodies

Mga Lakang	Kontent sa Serbisyo	Panahon
Sintesis sa Gene	Pagmugna og hangtod sa 3 ka lain-laing mga disenyo sa mga han-ay, de novo nga pagmugna og recombinant antibody DNA plasmids	2-3 ka semana
Pagsulay sa Gamay nga Sukod	Produksyon sa bispecific antibody proteins → Gamay nga sukod nga ekspresyon sa mga mammalian cell lines → Validation pinaagi sa SDS-PAGE → Binding analysis gamit ang recombinant protein antigens pinaagi sa ELISA → Pagtandi sa mga clone nga adunay parental antibodies	5-6 ka semana
Ilha	Ekspresyon sa unang duha ka full-length bispecific antibodies → Binding analysis pinaagi sa ELISA → Ebalwasyon sa ELISA sa mga antibodies nga giila sa mga anti mouse antibodies	1 ka semana
Produksyon sa Antibody	Dakong sukod sa produksiyon sa antibody	3-4 ka semana

Ang Among mga Bentaha

Sakop namo ang upstream ug downstream nga mga serbisyo sa produksiyon sa antibody, ug makahatag og mga teknikal nga serbisyo gikan sa pag-andam sa antibody, bispecific antibody purification ug antibody separation ug purification, antibody sequencing, antibody validation, ug uban pa, nga magamit para sa bispecific antibody therapy.

Taas nga Ekspresyon

Taas nga ekspresyon sa protina sa mga selula sa CHO.
Kusgan nga Pagtipig

>2 ka semana sa serum sa 37 °C.
Walay Problema sa Pagkatunaw

>30 mg/ml
Mga Kusgan nga Cell Line

Daghang lig-on nga mga linya sa selula nga adunay mga antigen sa tumor ang naugmad aron mapamatud-an ang daghang mga bispecific antibodies.