Serviziu d'Analisi di Caratterizazione di l'Aptameru
Alpha Lifetech hà furnitu servizii ligati à l'aptameri per parechji anni, è attualmente pò furnisce schemi cumpleti di sviluppu di l'aptameri cum'è a sintesi di l'aptameri, u screening SELEX, u sequenziamentu à altu rendimentu, è l'ottimisazione è a caratterizazione di l'aptameri. Basatu annantu à i vantaghji di u metudu SELEX per u screening di l'aptameri, Alpha Lifetech hà allargatu più metudi per u screening di l'aptameri.
Introduzione à l'analisi di caratterizazione di l'aptameri
Verificazione di l'affinità
L'affinità ottimizzata di l'aptameru hè stata verificata da tecniche pertinenti di u test di legame di l'aptameru. Esempi includenu a Calorimetria di Titolazione Isotermica (ITC), a Citometria di Flussu (FCM) è a Risonanza Plasmonica di Superficie (SPR), a Microfluidica, ecc. L'affinità di l'aptameru hè generalmente espressa da a costante di dissociazione (KD), una quantità fisica aduprata per quantificà u gradu di dissociazione moleculare in una reazione reversibile. Più chjucu hè u valore KD, più stabile hè u cumplessu, vale à dì, più forte hè l'affinità; À u cuntrariu, più grande hè u valore KD, più instabile hè u cumplessu è più debule hè l'affinità. Stu passu hè a chjave per identificà e prestazioni di l'aptameru, assicurendu a maturazione di l'affinità di l'aptameru è pò ligà si à a molecula bersagliu cù alta affinità è selettività in applicazioni pratiche.

Fig.1 Prucessu di maturazione di l'affinità di l'aptameru. Fonte di riferimentu:Kinghorn AB, Fraser LA, 2017.
Verificazione di funzione
In più di a verificazione di l'affinità, a funzione di l'aptameru deve esse verificata. Questu include a verificazione di a stabilità, a specificità è l'interazioni di l'aptameru cù altre molecule in un ambiente particulare. I risultati di a verificazione funzionale influenzeranu direttamente u valore di l'aptameri in a ricerca scientifica è l'applicazioni industriali.
Verificazione specifica
Esperimentu cumpetitivu: A capacità di l'aptameru di ligà si à un bersagliu specificu hè valutata in presenza di altri bersagli simili. Sè l'aptameru pò ligà si specificamente à a molecule bersagliu senza interferenza da altre molecule, indica chì hà una specificità elevata.
Esperimentu di reazione incrociata: L'aptameru hè ligatu à una seria di bersagli correlati o micca correlati per vede s'ellu si lega solu à un bersagliu specificu, in modu da verificà a so specificità.
Verificazione di stabilità
Esperimentu di degradazione di nucleasi: L'aptameri sò stati esposti à diverse concentrazioni di nucleasi è a so degradazione hè stata osservata. Paragunendu u gradu di degradazione à diversi punti di tempu, si pò valutà a capacità di degradazione antinucleasi di l'aptameru.
Esperimentu di stabilità di temperatura è di tempu: L'aptameru hè statu piazzatu sottu à diverse cundizioni di temperatura è di tempu per osservà a so stabilità strutturale è funzionale. Questu aiuta à determinà e cundizioni ottimali di almacenamentu è d'usu per l'aptameri.
Identificazione di l'attività biologica
U metudu adattatu hè generalmente sceltu secondu l'ubbiettivu specificu di l'applicazione di l'aptameru di l'acidu nucleicu.
(1) Test di livellu moleculare: Usendu tecniche di biologia moleculare, cum'è l'elettroforesi in gel, Western blot, ecc., per rilevà i cumplessu furmati dopu chì l'aptamer si combina cù a molecule bersaglio, o rilevà i cambiamenti in u livellu d'espressione di a molecule bersaglio causati da l'aptamer.
(2) Test à livellu cellulare: Utilizendu a tecnulugia di cultura cellulare, l'aptameri sò incubati cù e cellule bersaglio per osservà i cambiamenti biologichi cum'è a morfologia cellulare, a proliferazione è l'apoptosi, è valutà l'attività biologica di l'aptameri.
(3) Test di mudelli animali: In mudelli animali apprupriati, l'aptameri di l'acidu nucleicu sò amministrati per iniezione o amministrazione di farmaci, è l'indicatori fisiologichi è i cambiamenti patologichi di l'animali sò osservati per valutà l'attività biologica è a sicurezza di l'aptameri in vivo.
Sè avete qualchì quistione, ùn esitate micca à cuntattateci in ogni mumentu.
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