Piattaforma di sviluppu di l'anticorpi Phage Display

Alpha Lifetech, cù a so vasta sperienza di prughjettu in a scuperta di l'anticorpi, pò furnisce servizii d'anticorpi monoclonali è policlonali persunalizati per parechje spezie, è ancu di custruzzione di biblioteche d'anticorpi è servizii di screening. Alpha Lifetech pò furnisce i clienti cù anticorpi di qualità assicurata è anticorpi recombinanti, è ancu servizii currispondenti, per preparà anticorpi efficaci, altamente specifichi è stabili. Utilizendu piattaforme complete di anticorpi è ingegneria di l'anticorpi, furnimu servizii chì copre l'upstream è a valle di a produzzione di anticorpi, cumprese servizii tecnichi cum'è a preparazione di l'anticorpi, a purificazione, a sequenza di l'anticorpi è a validazione.

Alpha Lifetech hà una piattaforma di scuperta di anticorpi matura chì furnisce à i clienti una gamma di servizii cumpresi l'immunità animale, a custruzzione è u screening di a biblioteca di l'anticorpi di visualizazione di fagi, a sequenza di l'anticorpi, l'espressione di l'anticorpi, a purificazione di l'anticorpi, a validazione di l'anticorpi è l'etichettatura di l'anticorpi basati nantu à a tecnulugia hibridoma, a tecnulugia di a cellula B unica, a tecnulugia di visualizazione di fagi, è più. Alpha Lifetech hà una linea di pruduzzione standard, è in più di i servizii di preparazione di l'anticorpi, ponu ancu esse furniti servizii di supportu cum'è l'umanizazione di l'anticorpi, a maturazione di l'affinità di l'anticorpi, u disignu è u sviluppu di droghe ADC, è u disignu di sequenza di CAR-T. À u listessu tempu, Alpha Lifetech hà custruitu una biblioteca di anticorpi basata nantu à e piattaforme di tecnulugia di visualizazione di fagi M13, T4 è T7, cù una capacità di almacenamentu finu à 10^8-10^9. U ritmu pusitivu, u tassu di inserimentu è a diversità di a biblioteca ponu tutti ghjunghje à u 90%.

Phage display Technology

A pruduzzione d'anticorpi monoclonali hè stata inizialmente preparata cù a tecnulugia di l'anticorpi monoclonali di ibridoma per pruduce l'anticorpi monoclonali di ibridomi di u mouse. In particulare, fusione e cellule di spleen da i topi immunizzati cù e cellule di mieloma da l'omu o di i topi, sò formate cellule di hibridoma, chì secrete anticorpi specifichi di anticorpi monoclonali di hibridoma. Per a mudificazione umanizzata di l'anticorpi monoclonali di u mouse è a mudificazione di l'ingegneria genetica di l'anticorpi per dà una regione di immunoglobulina umana constante, a so immunogenicità pò esse ridutta. L'ingegneria di l'anticorpi monoclonali sò largamente usate in applicazioni biomediche è cliniche.

Alpha Lifetech pò furnisce servizii di ingegneria di l'anticorpi unicu da u disignu di u protocolu di ricerca preclinica à a scuperta di i conjugati di anticorpi (ADC) è a validazione di l'animali. I conjugati di droghe d'anticorpi (ADC) ponu furnisce droghe di chimioterapia à e cellule cancerose. Dopu à u ligame à miri specifichi espressi nantu à e cellule cancerose, ADC libera droghe citotossiche in e cellule cancerose. Alpha Lifetech pò ancu furnisce à i clienti servizii cumpleti di maturazione di affinità di anticorpi. Cù l'ottimisazione avanzata di a mutazione è a tecnulugia di screening di phage high-throughput, anticorpi cù certa affinità sò prima schermati, è dopu mutazioni di aminoacidi sò introdutte per generà diverse varianti. In seguitu, l'anticorpi d'alta affinità sò stati valutati è screened cù tecniche di screening. Dopu parechje volte di ottimisazione è analisi strutturale, l'anticorpi cù affinità più altu è specificità più forte sò stati ultimamente ottenuti.

Alpha Lifetech pò custruisce diversi tipi di biblioteche di visualizazione di fagi di anticorpi, cumprese biblioteche immune, biblioteche native, biblioteche semi-sintetiche è biblioteche sintetiche. Basatu nantu à l'alta capacità di e librerie d'anticorpi, ponu esse ottenuti anticorpi altamente specifichi. Puderanu esse furniti parechji vettori fagemidi cum'è pMECS, pComb3X è pCANTAB 5E, è ancu ceppi cum'è TG1 E. coli, XL1 Blue è ER2738. In più di una capacità di biblioteca di finu à 10 ^ 9, a freccia d'inserzione di frammenti di destinazione di a biblioteca hè ancu alta, creendu cundizioni sufficienti per screening anticorpi chì satisfacenu i clienti. U diagramma di flussu di u serviziu di preparazione di l'anticorpi di Alpha Lifetech basatu nantu à a tecnulugia di visualizazione di fagi hè mostratu in Figura 1.

Fig.1 Schema di prucessu per a preparazione di anticorpi monoclonali basatu nantu à a tecnulugia di visualizazione di phage.

Flussu di travagliu di pruduzzione di l'anticorpi Phage Display

Passi	Cuntenutu di serviziu	Timeline
Passu 1: Immunizazione di l'animali	(1) Immunizazione di l'animali 4 volte, immunizazione di rinfurzà 1 dose, un totale di 5 dosi immunizzati. (2) U serum negativu prima di l'immunizazione hè stata cullata, è l'ELISA hè stata realizata nantu à a quarta dosa per detectà u titulu di serum. (3) Se u titru di l'anticorpu di serum di a quarta dosa risponde à i requisiti, una dosa addiziale di immunizazione serà amministrata 7 ghjorni prima di a cullizzioni di sangue. Se ùn risponde micca à i requisiti, l'immunizazione di rutina continuarà. (4) Potenza qualificata, raccolta di sangue è separazione di monociti	10 settimane
Passu 2: Preparazione cDNA	(1) Estrazione di RNA totale PBMC (Kit di estrazione di RNA) (2) Preparazione RT-PCR di alta fideltà di cDNA (kit di trascrizione inversa)	1 ghjornu
Passu 3: Custruzzione di Antibody Library	(1) Utilizendu cDNA cum'è mudellu, i geni sò stati amplificati da duie volte di PCR. (2) Custruzzione di fagi è trasfurmazioni: vettori fagemidi di splicing di geni, trasfurmazioni di l'elettroporazione di batteri ospiti TG1, custruzzione di libreria di anticorpi. (3) Identificazione: Selezziunate aleatoriamente 24 cloni, ritmu pusitivu di identificazione PCR + rata di inserimentu. (4) Preparazione di phage assistita: amplificazione di fagi M13 + purificazione. (5) Rescue di biblioteca di visualizazione di Phage	3-4 settimane
Passu 4: Screening Library Antibody (3 round)	(1) Default screening 3-round (screening in fase solida): screening di pressione per caccià l'anticorpi non specifichi à u massimu pussibule. (2) Batteriofago di amplificazione di clone unicu selezionatu + espressione indotta da IPTG + rilevazione ELISA di cloni pusitivi. (3) Tutti i cloni pusitivi sò stati scelti per a sequenza di geni.	4-5 settimane

Vantaggio di a tecnulugia di visualizazione di phage

Alpha Lifetech hà una ricca sperienza in u campu di u sviluppu di l'anticorpi. Nantu à l'anni, Alpha Lifetech hà stabilitu una piattaforma cumpleta di sviluppu di anticorpi.

Servizi di supportu

Pudemu furnisce diversi servizii di custruzzione di biblioteche immune basati in animali è servizii di screening di biblioteca di anticorpi naturali secondu i bisogni di i clienti

Target Multiple

Diversi servizii di scuperta di anticorpi di destinazione sò dispunibuli: proteini, peptidi, picculi moleculi, virus, proteini di membrana, mRNA, etc.

Vettori multipli

Serviziu di custruzzione di biblioteche persunalizati, pudemu furnisce vari vettori di batteriofagi cumpresi PMECS, pComb3X, è pCANTAB 5E, è mudificà li secondu i bisogni di i clienti.

Piattaforma Matura

A capacità d'almacenamiento pò ghjunghje à 10 ^ 8-10 ^ 9, i tassi di inserimentu sò tutti sopra u 90%, è l'affinità di l'anticorpi ottenuti per u screening hè generalmente à u livellu nM pM.

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Serviziu di sviluppu di l'anticorpi monoclonali

Pudemu furnisce servizii di sviluppu di anticorpi monoclonali di alta qualità, purezza è altamente specifichi, cumprese a produzzione di anticorpi monoclonali di topi è anticorpi monoclonali di cunigliu.

Piattaforma tecnologica Hybridoma

Includendu u prugramma di immunizazione, i servizii di preparazione di l'anticorpi, a purificazione di l'anticorpi, a sequenza di l'antibody high throughput, a validazione di l'anticorpi, etc.

Piattaforma di classificazione di una sola B Cell

Alpha Lifetech hà vantaghji in u tempu di screening è ottene anticorpi di alta qualità. Pò furnisce u disignu di l'antigenu, a sintesi è a mudificazione, l'immunità di l'animali, u screening di arricchimentu di una sola cellula B, a sequenza di una sola cellula.