Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem
Technologie fágového displeje

Pracovní postup pro produkci protilátek na fágovém displeji
| Kroky | Obsah služby | Časová osa |
|---|---|---|
| Krok 1: Imunizace zvířat | (1) Imunizace zvířat 4krát, posilovací imunizace 1 dávkou, celkem 5 dávek imunizace. (2) Před imunizací bylo odebráno negativní sérum a u čtvrté dávky byl proveden test ELISA pro stanovení titru séra. (3) Pokud titr sérových protilátek po čtvrté dávce splňuje požadavky, bude 7 dní před odběrem krve podána jedna další dávka imunizace. Pokud požadavky nesplňuje, bude pokračovat rutinní imunizace. (4) Kvalifikovaná účinnost, odběr krve a separace monocytů | 10 týdnů |
| Krok 2: Příprava cDNA | (1) Extrakce celkové RNA PBMC (souprava pro extrakci RNA) (2) Příprava cDNA pomocí vysoce věrné RT-PCR (souprava pro reverzní transkripci) | 1 den |
| Krok 3: Konstrukce knihovny protilátek | (1) Geny byly amplifikovány dvěma koly PCR s použitím cDNA jako templátu. (2) Konstrukce a transformace fága: sestřih genů s fágovým vektorem, elektroporační transformace hostitelské bakterie TG1, konstrukce knihovny protilátek. (3) Identifikace: Náhodně vybrat 24 klonů, míra pozitivní PCR identifikace + míra inzerce. (4) Asistovaná příprava fágů: amplifikace + purifikace fága M13. (5) Záchrana fágové knihovny displejů | 3–4 týdny |
| Krok 4: Screening knihovny protilátek (3 kola) | (1) Standardní tříkolový screening (screening na pevné fázi): tlakový screening za účelem maximálního odstranění nespecifických protilátek. (2) Amplifikace jednotlivých klonů selektovaným bakteriofágem + exprese indukovaná IPTG + detekce pozitivních klonů pomocí ELISA. (3) Všechny pozitivní klony byly vybrány pro sekvenování genů. | 4–5 týdnů |
Podpůrné služby
Můžeme poskytnout různé služby v oblasti konstrukce imunitních knihoven na bázi zvířat a screeningu knihoven přírodních protilátek dle potřeb zákazníka.
Více cílů
K dispozici jsou služby pro objevování více cílových protilátek: proteiny, peptidy, malé molekuly, viry, membránové proteiny, mRNA atd.
Více vektorů
Personalizovaná služba výstavby knihoven, můžeme poskytnout různé bakteriofágové vektory včetně PMECS, pComb3X a pCANTAB 5E a upravit je podle potřeb zákazníka.
Platforma pro dospělé
Skladovací kapacita může dosáhnout 10^8-10^9, míra vložení je nad 90 % a afinita protilátek získaných screeningem je obecně na úrovni nM pM.
Služba pro vývoj monoklonálních protilátek
Můžeme poskytnout vysoce kvalitní, vysoce čisté a specifické služby v oblasti vývoje monoklonálních protilátek, včetně produkce myších monoklonálních protilátek a králičích monoklonálních protilátek.
Technologická platforma hybridomů
Včetně imunizačního programu, služeb přípravy protilátek, purifikace protilátek, vysokokapacitního sekvenování protilátek, validace protilátek atd.
Platforma pro třídění jednotlivých B buněk
Alpha Lifetech má výhody v době screeningu a získávání vysoce kvalitních protilátek. Může zajistit návrh, syntézu a modifikaci antigenů, imunitu zvířat, screening obohacení jednotlivých B buněk a sekvenování jednotlivých buněk.
Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem
Společnost Alpha Lifetech může poskytovat technické služby pro vývoj protilátek pro fágový displej, od přípravy protilátek, jejich purifikace až po sekvenování protilátek atd.






16. 7. 2018 

