Leave Your Message
snímek1

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem

Na základě komplexní konstrukce systému platformy protilátkové platformy může Alpha Lifetech poskytovat technické služby od přípravy protilátek, purifikace protilátek, sekvenování protilátek atd.

KONTAKTUJTE NÁS
01

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem


Alpha Lifetech, se svými rozsáhlými projektovými zkušenostmi v oblasti objevování protilátek, může poskytnout přizpůsobené služby monoklonálních a polyklonálních protilátek pro různé druhy, stejně jako vytváření knihoven protilátek a screeningové služby. Alpha Lifetech může zákazníkům poskytnout kvalitní protilátky a rekombinantní protilátkové produkty, stejně jako odpovídající služby pro přípravu účinných, vysoce specifických a stabilních protilátek. Využitím komplexních platforem protilátek a protilátkového inženýrství poskytujeme služby pokrývající upstream a downstream produkce protilátek, včetně technických služeb, jako je příprava protilátek, purifikace, sekvenování protilátek a validace.

Alpha Lifetech má vyspělou platformu pro objevování protilátek, která zákazníkům poskytuje řadu služeb včetně imunity zvířat, konstrukce a screeningu knihovny protilátek na fágovém displeji, sekvenování protilátek, exprese protilátek, purifikace protilátek, validace protilátek a značení protilátek na základě technologie hybridomů, technologie jednotlivých B buněk, technologie fágového displeje a další. Alpha Lifetech má standardní výrobní linku a kromě služeb přípravy protilátek mohou být poskytovány také podpůrné služby, jako je humanizace protilátek, afinitní zrání protilátek, návrh a vývoj léků ADC a návrh následné sekvence CAR-T. Alpha Lifetech zároveň zkonstruoval knihovnu protilátek založenou na platformách technologie fágového displeje M13, T4 a T7 s úložnou kapacitou až 10^8-10^9. Pozitivní míra, míra vkládání a rozmanitost knihovny mohou dosáhnout více než 90 %.

Technologie fágového displeje

Produkce monoklonálních protilátek byla zpočátku připravena s použitím technologie hybridomových monoklonálních protilátek k produkci myší hybridomové monoklonální protilátky. Konkrétně fúzí slezinných buněk z imunizovaných myší s myelomovými buňkami od lidí nebo myší se vytvoří hybridomové buňky, které vylučují specifické hybridomové monoklonální protilátky. Humanizovanou modifikací myších monoklonálních protilátek a modifikací protilátek genetickým inženýrstvím, aby jim poskytla konstantní oblast lidského imunoglobulinu, lze snížit jejich imunogenicitu. Inženýrství monoklonálních protilátek je široce používáno v biomedicínských a klinických aplikacích.

Alpha Lifetech může poskytnout komplexní služby v oblasti inženýrství protilátek od návrhu protokolu preklinického výzkumu až po objev konjugátů protilátek (ADC) a ověřování na zvířatech. Konjugáty protilátek (ADC) mohou dopravit chemoterapeutická léčiva do rakovinných buněk. Po navázání na specifické cíle exprimované na rakovinných buňkách ADC uvolňuje cytotoxická léčiva do rakovinných buněk. Alpha Lifetech může zákazníkům také poskytnout komplexní služby zrání afinity protilátek. S pokročilou optimalizací mutací a vysoce výkonnou technologií screeningu fágového displeje jsou protilátky s určitou afinitou nejprve skrínovány a poté jsou zavedeny mutace aminokyselin, aby se vytvořily různé varianty. Následně byly protilátky s vysokou afinitou hodnoceny a skrínovány pomocí screeningových technik. Po několika kolech optimalizace a strukturní analýzy byly nakonec získány protilátky s vyšší afinitou a silnější specificitou.

Alpha Lifetech může konstruovat různé typy knihoven fágového displeje protilátek, včetně imunitních knihoven, nativních knihoven, polosyntetických knihoven a syntetických knihoven. Na základě vysoké kapacity knihoven protilátek lze získat vysoce specifické protilátky. Může být poskytnuto více fagemidových vektorů, jako je pMECS, pComb3X a pCANTAB 5E, stejně jako kmeny, jako je TG1 E. coli, XL1 Blue a ER2738. Kromě kapacity knihovny až 10^9 je také vysoká míra inzerce cílového fragmentu knihovny, což vytváří dostatečné podmínky pro screening protilátek, které uspokojí zákazníky. Vývojový diagram služby přípravy protilátek společnosti Alpha Lifetech založené na technologii fágového displeje je znázorněn na obrázku 1.

fágový displej-Alpha Lifetech
Obr. 1 Schéma postupu pro přípravu monoklonálních protilátek založených na technologii fágového displeje.

Pracovní postup produkce protilátky fágového displeje

Kroky Obsah služby Časová osa
Krok 1: Imunizace zvířat
(1) Imunizace zvířat 4krát, posilovací imunizace 1 dávka, celkem 5 imunizovaných dávek.
(2) Před imunizací bylo odebráno negativní sérum a se čtvrtou dávkou byla provedena ELISA pro detekci sérového titru.
(3) Pokud titr sérových protilátek čtvrté dávky odpovídá požadavkům, bude 7 dní před odběrem krve podána jedna další dávka imunizace. Pokud nesplňuje požadavky, bude rutinní imunizace pokračovat.
(4) Kvalifikovaná potence, odběr krve a separace monocytů
10 týdnů
Krok 2: Příprava cDNA
(1) Celková extrakce RNA PBMC (sada pro extrakci RNA)
(2) Vysoce věrná RT-PCR příprava cDNA (souprava pro reverzní transkripci)
1 den
Krok 3: Konstrukce knihovny protilátek
(1) Za použití cDNA jako templátu byly geny amplifikovány dvěma cykly PCR.
(2) Konstrukce a transformace fága: genový sestřih fagemidového vektoru, elektroporační transformace hostitelských bakterií TG1, konstrukce knihovny protilátek.
(3) Identifikace: Náhodně vyberte 24 klonů, míra pozitivní identifikace PCR + míra inzerce.
(4) Příprava asistovaného fága: amplifikace fága M13 + purifikace.
(5) Záchrana knihovny fágového displeje
3-4 týdny
Krok 4: Screening knihovny protilátek (3 kola)
(1) Výchozí 3kolový screening (screening na pevné fázi): tlakový screening k odstranění nespecifických protilátek v maximální možné míře.
(2) Jeden klon amplifikace bakteriofágem vybraný + IPTG indukovaná exprese + ELISA detekce pozitivních klonů.
(3) Všechny pozitivní klony byly selektovány pro genové sekvenování.
4-5 týdnů

Výhoda technologie fágového displeje

Alpha Lifetech má bohaté zkušenosti v oblasti vývoje protilátek. V průběhu let Alpha Lifetech vytvořila komplexní platformu pro vývoj protilátek.

adv01

Služby podpory

Můžeme poskytnout různé služby výstavby imunitních knihoven na zvířatech a služby screeningu knihoven přírodních protilátek podle potřeb zákazníka

adv02

Vícenásobný cíl

K dispozici jsou různé služby zjišťování cílových protilátek: proteiny, peptidy, malé molekuly, viry, membránové proteiny, mRNA atd.

adv03

Více vektorů

Personalizovaná služba výstavby knihoven, můžeme poskytnout různé bakteriofágové vektory včetně PMECS, pComb3X a pCANTAB 5E a upravit je podle potřeb zákazníka

adv04-1

Vyspělá platforma

Skladovací kapacita může dosáhnout 10^8-10^9, míry inzerce jsou všechny vyšší než 90 % a afinita protilátek získaných screeningem je obecně na úrovni nM pM

Související SERVICE

Strategie vývoje více protilátek

vývoj monoklonálních protilátek-Alpha Lifetech

Služba vývoje monoklonálních protilátek

Můžeme poskytnout vysoce kvalitní, vysoce čisté a vysoce specifické služby vývoje monoklonálních protilátek, včetně produkce myších monoklonálních protilátek a králičích monoklonálních protilátek

hybridomové buňky-Alpha Lifetech

Hybridoma technologická platforma

Včetně imunizačního programu, služeb přípravy protilátek, čištění protilátek, vysoce výkonného sekvenování protilátek, validace protilátek atd.

screening b buněk-Alpha Lifetech

Jednotná třídicí platforma B buněk

Alpha Lifetech má výhody v době screeningu a získávání vysoce kvalitních protilátek. Může poskytnout návrh, syntézu a modifikaci antigenu, zvířecí imunitu, screening obohacení jednotlivých B buněk, sekvenování jednotlivých buněk.

fágový displej-Alpha Lifetech

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem

Alpha Lifetech může poskytnout technické služby vývoje protilátek s fágovým displejem od přípravy protilátek, purifikace protilátek, sekvenování protilátek atd.

Máte-li jakékoli dotazy, neváhejte nás kdykoli kontaktovat.

Leave Your Message

Vybraná služba