Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem
Technologie fágového displeje

Pracovní postup produkce protilátky fágového displeje
Kroky | Obsah služby | Časová osa |
---|---|---|
Krok 1: Imunizace zvířat | (1) Imunizace zvířat 4krát, posilovací imunizace 1 dávka, celkem 5 imunizovaných dávek. (2) Před imunizací bylo odebráno negativní sérum a se čtvrtou dávkou byla provedena ELISA pro detekci sérového titru. (3) Pokud titr sérových protilátek čtvrté dávky odpovídá požadavkům, bude 7 dní před odběrem krve podána jedna další dávka imunizace. Pokud nesplňuje požadavky, bude rutinní imunizace pokračovat. (4) Kvalifikovaná potence, odběr krve a separace monocytů | 10 týdnů |
Krok 2: Příprava cDNA | (1) Celková extrakce RNA PBMC (sada pro extrakci RNA) (2) Vysoce věrná RT-PCR příprava cDNA (souprava pro reverzní transkripci) | 1 den |
Krok 3: Konstrukce knihovny protilátek | (1) Za použití cDNA jako templátu byly geny amplifikovány dvěma cykly PCR. (2) Konstrukce a transformace fága: genový sestřih fagemidového vektoru, elektroporační transformace hostitelských bakterií TG1, konstrukce knihovny protilátek. (3) Identifikace: Náhodně vyberte 24 klonů, míra pozitivní identifikace PCR + míra inzerce. (4) Příprava asistovaného fága: amplifikace fága M13 + purifikace. (5) Záchrana knihovny fágového displeje | 3-4 týdny |
Krok 4: Screening knihovny protilátek (3 kola) | (1) Výchozí 3kolový screening (screening na pevné fázi): tlakový screening k odstranění nespecifických protilátek v maximální možné míře. (2) Jeden klon amplifikace bakteriofágem vybraný + IPTG indukovaná exprese + ELISA detekce pozitivních klonů. (3) Všechny pozitivní klony byly selektovány pro genové sekvenování. | 4-5 týdnů |

Služby podpory
Můžeme poskytnout různé služby výstavby imunitních knihoven na zvířatech a služby screeningu knihoven přírodních protilátek podle potřeb zákazníka

Vícenásobný cíl
K dispozici jsou různé služby zjišťování cílových protilátek: proteiny, peptidy, malé molekuly, viry, membránové proteiny, mRNA atd.

Více vektorů
Personalizovaná služba výstavby knihoven, můžeme poskytnout různé bakteriofágové vektory včetně PMECS, pComb3X a pCANTAB 5E a upravit je podle potřeb zákazníka

Vyspělá platforma
Skladovací kapacita může dosáhnout 10^8-10^9, míry inzerce jsou všechny vyšší než 90 % a afinita protilátek získaných screeningem je obecně na úrovni nM pM
Služba vývoje monoklonálních protilátek
Můžeme poskytnout vysoce kvalitní, vysoce čisté a vysoce specifické služby vývoje monoklonálních protilátek, včetně produkce myších monoklonálních protilátek a králičích monoklonálních protilátek
Hybridoma technologická platforma
Včetně imunizačního programu, služeb přípravy protilátek, čištění protilátek, vysoce výkonného sekvenování protilátek, validace protilátek atd.
Jednotná třídicí platforma B buněk
Alpha Lifetech má výhody v době screeningu a získávání vysoce kvalitních protilátek. Může poskytnout návrh, syntézu a modifikaci antigenu, zvířecí imunitu, screening obohacení jednotlivých B buněk, sekvenování jednotlivých buněk.

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem
Alpha Lifetech může poskytnout technické služby vývoje protilátek s fágovým displejem od přípravy protilátek, purifikace protilátek, sekvenování protilátek atd.