Leave Your Message
snímek1

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem

Díky komplexní konstrukci platformy protilátek může společnost Alpha Lifetech poskytovat technické služby od přípravy protilátek, purifikace protilátek, sekvenování protilátek atd.

KONTAKTUJTE NÁS
01

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem


Společnost Alpha Lifetech, která má rozsáhlé zkušenosti s projekty v oblasti objevování protilátek, může poskytovat služby v oblasti monoklonálních a polyklonálních protilátek na míru pro více druhů, stejně jako služby v oblasti konstrukce a screeningu knihoven protilátek. Alpha Lifetech může zákazníkům poskytnout kvalitní protilátkové a rekombinantní protilátkové produkty zaručené kvality a také odpovídající služby pro přípravu účinných, vysoce specifických a stabilních protilátek. Využíváním komplexních platforem protilátek a protilátkového inženýrství poskytujeme služby pokrývající předcházející i následné fáze produkce protilátek, včetně technických služeb, jako je příprava protilátek, purifikace, sekvenování protilátek a validace.

Společnost Alpha Lifetech má rozvinutou platformu pro objevování protilátek, která zákazníkům poskytuje řadu služeb, včetně zvířecí imunity, konstrukce a screeningu knihoven protilátek pro fágový displej, sekvenování protilátek, exprese protilátek, purifikace protilátek, validace protilátek a značení protilátek na základě hybridomové technologie, technologie jednotlivých B buněk, technologie fágového displeje a dalších. Alpha Lifetech má standardní výrobní linku a kromě služeb přípravy protilátek může poskytovat i podpůrné služby, jako je humanizace protilátek, afinitní zrání protilátek, návrh a vývoj léčiv ADC a návrh následných sekvencí CAR-T. Zároveň společnost Alpha Lifetech zkonstruovala knihovnu protilátek založenou na platformách fágového displeje M13, T4 a T7 s úložnou kapacitou až 10^8-10^9. Míra pozitivity, míra inzerce a diverzita knihovny mohou dosáhnout více než 90 %.

Technologie fágového displeje

Produkce monoklonálních protilátek byla původně připravena za použití technologie hybridomových monoklonálních protilátek k produkci myších hybridomových monoklonálních protilátek. Konkrétně fúzí buněk sleziny imunizovaných myší s myelomovými buňkami lidí nebo myší vznikají hybridomové buňky, které vylučují specifické hybridomové monoklonální protilátky. Humanizovanou modifikací myších monoklonálních protilátek a genetickou modifikací protilátek za účelem získání konstantní lidské imunoglobulinové oblasti lze snížit jejich imunogenicitu. Monoklonální protilátkové inženýrství se široce používá v biomedicínských a klinických aplikacích.

Společnost Alpha Lifetech může poskytovat komplexní služby v oblasti inženýrství protilátek, od návrhu preklinických výzkumných protokolů až po objevování konjugátů protilátek a léčiv (ADC) a validaci na zvířatech. Konjugáty protilátek a léčiv (ADC) mohou doručovat chemoterapeutická léčiva do rakovinných buněk. Po vazbě na specifické cíle exprimované na rakovinných buňkách ADC uvolňuje cytotoxická léčiva do rakovinných buněk. Společnost Alpha Lifetech může také zákazníkům poskytnout komplexní služby v oblasti zrání afinity protilátek. Díky pokročilé optimalizaci mutací a vysoce výkonné technologii fágového displeje se nejprve testují protilátky s určitou afinitou a poté se zavádějí mutace aminokyselin za účelem generování různých variant. Následně byly pomocí screeningových technik vyhodnoceny a testovány protilátky s vysokou afinitou. Po několika kolech optimalizace a strukturní analýzy byly nakonec získány protilátky s vyšší afinitou a silnější specificitou.

Společnost Alpha Lifetech dokáže konstruovat různé typy knihoven pro fágový displej s protilátkami, včetně imunitních knihoven, nativních knihoven, polosyntetických knihoven a syntetických knihoven. Díky vysoké kapacitě knihoven protilátek lze získat vysoce specifické protilátky. Lze dodat více fágových vektorů, jako jsou pMECS, pComb3X a pCANTAB 5E, a také kmeny jako TG1 E. coli, XL1 Blue a ER2738. Kromě kapacity knihovny až 10^9 je vysoká i rychlost vkládání cílových fragmentů do knihovny, což vytváří dostatečné podmínky pro screening protilátek, které uspokojí zákazníky. Vývojový diagram služby přípravy protilátek společnosti Alpha Lifetech založené na technologii fágového displeje je znázorněn na obrázku 1.

fágový displej – Alpha Lifetech
Obr. 1 Schéma procesu pro přípravu monoklonálních protilátek založených na technologii fágového displeje.

Pracovní postup pro produkci protilátek na fágovém displeji

Kroky Obsah služby Časová osa
Krok 1: Imunizace zvířat
(1) Imunizace zvířat 4krát, posilovací imunizace 1 dávkou, celkem 5 dávek imunizace.
(2) Před imunizací bylo odebráno negativní sérum a u čtvrté dávky byl proveden test ELISA pro stanovení titru séra.
(3) Pokud titr sérových protilátek po čtvrté dávce splňuje požadavky, bude 7 dní před odběrem krve podána jedna další dávka imunizace. Pokud požadavky nesplňuje, bude pokračovat rutinní imunizace.
(4) Kvalifikovaná účinnost, odběr krve a separace monocytů
10 týdnů
Krok 2: Příprava cDNA
(1) Extrakce celkové RNA PBMC (souprava pro extrakci RNA)
(2) Příprava cDNA pomocí vysoce věrné RT-PCR (souprava pro reverzní transkripci)
1 den
Krok 3: Konstrukce knihovny protilátek
(1) Geny byly amplifikovány dvěma koly PCR s použitím cDNA jako templátu.
(2) Konstrukce a transformace fága: sestřih genů s fágovým vektorem, elektroporační transformace hostitelské bakterie TG1, konstrukce knihovny protilátek.
(3) Identifikace: Náhodně vybrat 24 klonů, míra pozitivní PCR identifikace + míra inzerce.
(4) Asistovaná příprava fágů: amplifikace + purifikace fága M13.
(5) Záchrana fágové knihovny displejů
3–4 týdny
Krok 4: Screening knihovny protilátek (3 kola)
(1) Standardní tříkolový screening (screening na pevné fázi): tlakový screening za účelem maximálního odstranění nespecifických protilátek.
(2) Amplifikace jednotlivých klonů selektovaným bakteriofágem + exprese indukovaná IPTG + detekce pozitivních klonů pomocí ELISA.
(3) Všechny pozitivní klony byly vybrány pro sekvenování genů.
4–5 týdnů

Výhoda technologie fágového displeje

Společnost Alpha Lifetech má bohaté zkušenosti v oblasti vývoje protilátek. V průběhu let si Alpha Lifetech vybudovala komplexní platformu pro vývoj protilátek.

adv01

Podpůrné služby

Můžeme poskytnout různé služby v oblasti konstrukce imunitních knihoven na bázi zvířat a screeningu knihoven přírodních protilátek dle potřeb zákazníka.

adv02

Více cílů

K dispozici jsou služby pro objevování více cílových protilátek: proteiny, peptidy, malé molekuly, viry, membránové proteiny, mRNA atd.

adv03

Více vektorů

Personalizovaná služba výstavby knihoven, můžeme poskytnout různé bakteriofágové vektory včetně PMECS, pComb3X a pCANTAB 5E a upravit je podle potřeb zákazníka.

adv04-1

Platforma pro dospělé

Skladovací kapacita může dosáhnout 10^8-10^9, míra vložení je nad 90 % a afinita protilátek získaných screeningem je obecně na úrovni nM pM.

Související SLUŽBY

Strategie pro vývoj více protilátek

vývoj monoklonálních protilátek - Alpha Lifetech

Služba pro vývoj monoklonálních protilátek

Můžeme poskytnout vysoce kvalitní, vysoce čisté a specifické služby v oblasti vývoje monoklonálních protilátek, včetně produkce myších monoklonálních protilátek a králičích monoklonálních protilátek.

hybridomové buňky - Alpha Lifetech

Technologická platforma hybridomů

Včetně imunizačního programu, služeb přípravy protilátek, purifikace protilátek, vysokokapacitního sekvenování protilátek, validace protilátek atd.

screening B buněk - Alpha Lifetech

Platforma pro třídění jednotlivých B buněk

Alpha Lifetech má výhody v době screeningu a získávání vysoce kvalitních protilátek. Může zajistit návrh, syntézu a modifikaci antigenů, imunitu zvířat, screening obohacení jednotlivých B buněk a sekvenování jednotlivých buněk.

fágový displej – Alpha Lifetech

Platforma pro vývoj protilátek s fágovým displejem

Společnost Alpha Lifetech může poskytovat technické služby pro vývoj protilátek pro fágový displej, od přípravy protilátek, jejich purifikace až po sekvenování protilátek atd.

Pokud máte jakékoli dotazy, neváhejte nás kdykoli kontaktovat.

Leave Your Message

Doporučená služba