Úvod do knihoven syntetizovaných protilátek

Knihovna syntetizovaných protilátek, také známá jako knihovna De novo, je syntetická metoda, která využívá techniky, jako je syntéza DNA nebo fágový displej, k navržení a syntéze kompletních variabilních oblastí protilátky, včetně oblastí základní struktury a CDR, bez spoléhání se na knihovny naivních protilátek.

Knihovna polosyntetických protilátek je vytvořena kombinací přirozeně se vyskytujících knihoven protilátek se syntetickou diverzitou. Obvykle zahrnuje syntézu DNA oligonukleotidů k ​​produkci sady různých komplementárních určujících oblastí (CDR), které jsou pak kombinovány s konstantním rámcem protilátky odvozeným z přírodních zdrojů, jako jsou lidské nebo zvířecí B buňky. Syntetizovaná CDR zavádí diverzitu do knihovny, což vede k protilátkám zacíleným na širokou škálu epitopů. Knihovna semisyntetických protilátek poskytuje kompromis mezi přirozenou diverzitou imunitního systému a řízenou diverzitou dosaženou syntetickými metodami.

Rozdíl mezi naivními a syntetickými protilátkovými knihovnami závisí na zdroji imunoglobulinových genů. Mezitím rozdíl mezi knihovnou semisyntetizovaných a syntetizovaných protilátek spočívá v tom, že knihovna semisyntetizovaných protilátek sestává z části segmentů naivních protilátek, jako je lehký řetězec nebo těžký řetězec, a pouze jeden z nich je syntetizován in vitro; zatímco syntetizovaný je zcela odvozen z umělé syntézy pomocí PCR in vitro.

Alpha Lifetech může poskytnout

Společnost Alpha Lifetech Inc.může nabídnout knihovnu semisyntetizovaných/syntetizovaných protilátek ze zvířat a lidí na základě naší profesionální platformy pro objevování protilátek. S dlouholetými zkušenostmi s genetickými modifikacemi a konstrukcí knihoven lze konstruovat syntetizované knihovny, které jsou schopny produkovat syntetické protilátky s afinitou a specificitou přesahující kapacitu přirozených protilátek.Alpha Lifetechodborníci s hrdostí oznamují, že můžeme zaručit vysokou úspěšnost při konstrukci knihovny protilátek obsahující 10^8 – 10^10 nezávislých klonů.

Společnost Alpha Lifetech Inc.je hrdá na to, že nabízí komplexní služby konstrukce knihoven protilátek, které splňují různé potřeby globálních výzkumníků, včetně scFv, Fab, VHH protilátek a přizpůsobených knihoven. Naším cílem je porozumět a vyhovět požadavkům různých zákazníků a pomoci s jakýmikoli nadcházejícími a vznikajícími problémy ve výzkumné práci.

Proces výstavby knihoven syntetizovaných protilátek

Design
Fáze návrhu zahrnuje výběr protilátkových struktur a oblastí určujících komplementaritu (CDR) na základě existujících protilátkových sekvencí nebo strukturních dat. Syntetické CDR protilátky mohou být také navrženy tak, aby zavedly specifické funkce nebo zlepšily vazebné vlastnosti.

Syntéza
Syntetická DNA kódující navržené sekvence protilátek, včetně oblastí základní struktury a CDR, se syntetizuje pomocí chemických nebo enzymatických metod.

Shromáždění
Syntetizované fragmenty DNA jsou sestaveny do protilátkových expresních vektorů pomocí technik, jako je PCR, ligace nebo Gibsonovo sestavení. Tyto vektory pak mohou být zavedeny do expresních systémů, jako jsou bakteriální, kvasinkové nebo savčí buňky pro produkci protilátek.

Screening a výběr
Zkonstruované knihovny protilátek jsou skrínovány a selektovány na protilátky s požadovanými vlastnostmi pomocí vysoce výkonných skríninkových metod. To může zahrnovat techniky, jako je fágový displej, kvasinkový displej nebo ribozomový displej, v závislosti na formátu knihovny a aplikaci.

Služba výstavby knihoven syntetizovaných protilátek

Společnost Alpha Lifetech Inc.poskytuje zákazníkům jednorázový design a syntetizovanou službu knihoven protilátek ligací repertoáru V-genu těžkého a lehkého řetězce do fágového vektoru pomocí Cre-lox místně specifického rekombinačního systému k vytvoření repertoáru Fab vystavených na fágu obsahujícím 6,5 × 10^10 klonů. Knihovna poskytla Abs proti četným antigenům, některé s nanomolární afinitou. Generování knihovny lidských protilátek je založeno na technologii M13 fágového displeje (zobrazeno na obrázku níže).