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Folie 1

Aptamer-Screening-Plattform

Alpha Lifetech hat ein umfassendes Nukleinsäure-Aptamer-Screeningsystem entwickelt, das Kunden qualitativ hochwertige Nukleinsäure-Aptamer-Screening-Dienstleistungen (einschließlich RNA-Aptamere und DNA-Aptamere) anbieten kann.

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Aptamer-Screening-Plattform

Aptamer-Screening-Technologie

Aptamere sind einzelsträngige DNA- oder RNA-Sequenzen, die sich zu dreidimensionalen Strukturen falten können. Jede Sequenz enthält eine zufällige Region von 20–60 Nukleotiden, die von fixierten 5'- und 3'-Primerregionen flankiert wird. Dieser zufällige Sequenzblock umfasst 1015 einzigartige Sequenzen. Ähnlich wie Antikörper können sie mit hoher Affinität und Spezifität an ihre Zielmoleküle binden. Derzeit zeigen sie ein breites Anwendungspotenzial in vielen Bereichen wie Therapie, Krankheitsdiagnostik und Biosensorik.
Alpha Lifetech verfügt über umfassende Erfahrung in der Liganden-Screening-Technologie, die auf der SELEX-Technik (Exponential Enrichment Ligand System Evolution) zur In-vitro-Ligandenselektion basiert. Nach jahrelanger Entwicklung hat Alpha Lifetech ein umfassendes Screening-System für Nukleinsäure-Aptamere etabliert, das Kunden hochwertige Screening-Dienstleistungen für Nukleinsäure-Aptamere (einschließlich RNA- und DNA-Aptamere) bietet. Es stehen verschiedene Screening-Ziele wie Proteine, Peptide, Aminosäuren und niedermolekulare Verbindungen sowie diverse Aptamer-Screening-Methoden (z. B. Magnetbead-SELEX, Zell-SELEX, Capture-SELEX) zur Verfügung. Die am häufigsten verwendete Screening-Methode ist das Magnetbead-Screening.

Technischer Prozess des Aptamer-Selex-Screenings

Das SELEX-Verfahren zur Aptamer-Screening beginnt mit dem Aufbau von Oligonukleotid-Bibliotheken aus DNA oder RNA. In iterativen Zyklen werden Selektion und Amplifikation durchgeführt, indem die Oligonukleotid-Bibliothek mit dem Zielmolekül inkubiert, nicht-konjugierte Oligonukleotide abgewaschen, die gebundenen Aptamere eluiert und diese mittels PCR amplifiziert werden, um eine zweite Bibliothek für die nächste Screening-Runde zu generieren. Die Schritte Bindung, Partitionierung, Gewinnung und Re-Amplifikation werden wiederholt. Spezifische, durch diesen Prozess angereicherte Sequenzen erweisen sich als dominante Aptamere in der Bibliothek.

SELEX-Screening – Alpha Lifetech
Abb. 1 SELEX-Screening-Verfahren

Vorteile von Nukleinsäure-Aptameren

Vorteile Details
Direkt Unter Vermeidung des traditionellen Verfahrens der Tierversuche und durch direkte Selektion aus In-vitro-Bibliotheken; Selex-Screening nach Aptameren von Zielmolekülen, die nicht immunogen, schwach immunogen oder sogar toxisch sind.
Breites Anwendungsspektrum Bei den Zielmolekülen können organische Farbstoffe, Aminosäuren, Proteine, Antibiotika, Peptide, Vitamine, Medikamente, sogar Zellen, Krankheitserreger, Viren, Gewebe usw. sein.
Starke Affinität Aptamere weisen eine hohe Spezifität und Affinität für das In-vitro-Screening von Zielmolekülen auf.
Stabilität Aptamere sind klein, leicht herzustellen, reproduzierbar synthetisierbar und ihre Stabilität kann durch chemische Synthese und Modifizierung erhöht werden. Sie sind chemisch stabil, lange haltbar und können bei Raumtemperatur transportiert werden.

Anwendung von Aptameren

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Lebensanalyse

Aptamere werden als Sonden oder Biosensorelemente eingesetzt, um biologische Moleküle zu erkennen, Zellen abzubilden und andere Forschungsarbeiten zur Lebensanalyse durchzuführen.
198-Fall-3

Krankheitsdiagnose

Entwicklung hochempfindlicher Krankheitsdiagnosemethoden basierend auf der spezifischen Bindung von Aptameren und Zielmolekülen.
198-Fall-6

Medizinische Forschung

und Entwicklung

Das ausgewählte Aptamer kann als Wirkstoffmolekül oder Wirkstoffträger zur Entwicklung neuer zielgerichteter Medikamente eingesetzt werden.
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Fall Screening von niedermolekularen Aptameren

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der dritten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Ausrichtung von Adaptersequenzen

Sequenz mit hoher Affinität

Bibliotheksanreicherungsprodukt ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Das ePCR-Rückgewinnungsprodukt der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der dritten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Ausrichtung von Adaptersequenzen

Sequenz mit hoher Affinität

Bibliotheksanreicherungsprodukt ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Das ePCR-Rückgewinnungsprodukt der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der dritten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Ausrichtung von Adaptersequenzen

Sequenz mit hoher Affinität

Bibliotheksanreicherungsprodukt ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Das ePCR-Rückgewinnungsprodukt der ersten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

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Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

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Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

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Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

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Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

Das Elutionsprodukt der dritten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Ausrichtung von Adaptersequenzen

Sequenz mit hoher Affinität

Bibliotheksanreicherungsprodukt ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Das ePCR-Rückgewinnungsprodukt der ersten Elutionsrunde

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Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der ersten Elutionsrunde

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Das Elutionsprodukt der zweiten Runde, das ePCR-Rückgewinnungsprodukt

3% Nukleinsäuregel

Wiederholte ePCR-Gewinnung von Produkten aus der zweiten Elutionsrunde

3% Nukleinsäuregel

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