Phagen-Display-Antikörper-Entwicklungsplattform
Phagen-Display-Technologie

Produktionsablauf für Phagen-Display-Antikörper
| Schritte | Serviceinhalte | Zeitleiste |
|---|---|---|
| Schritt 1: Tierimmunisierung | (1) Tier 4-mal immunisiert, Auffrischungsimpfung 1 Dosis, insgesamt 5 Dosen immunisiert. (2) Vor der Immunisierung wurde negatives Serum gesammelt und nach der vierten Dosis ein ELISA zur Bestimmung des Serumtiters durchgeführt. (3) Erfüllt der Serumantikörpertiter nach der vierten Dosis die Anforderungen, wird 7 Tage vor der Blutentnahme eine weitere Impfdosis verabreicht. Erfüllt er die Anforderungen nicht, wird die routinemäßige Immunisierung fortgesetzt. (4) Qualifizierte Potenz, Blutentnahme und Trennung von Monozyten | 10 Wochen |
| Schritt 2: cDNA-Herstellung | (1) Extraktion der Gesamt-RNA aus PBMC (RNA-Extraktionskit) (2) Hochpräzise RT-PCR-Präparation von cDNA (Reverse-Transkriptionskit) | 1 Tag |
| Schritt 3: Aufbau der Antikörperbibliothek | (1) Unter Verwendung von cDNA als Vorlage wurden die Gene durch zwei PCR-Runden amplifiziert. (2) Phagenkonstruktion und -transformation: Gen-Splicing-Phagemidvektor, Elektroporationstransformation von TG1-Wirtsbakterien, Konstruktion einer Antikörperbibliothek. (3) Identifizierung: Zufällige Auswahl von 24 Klonen, PCR-Identifizierungs-Positivrate + Insertionsrate. (4) Assistierte Phagenpräparation: M13-Phagenamplifikation und -reinigung. (5) Rettung der Phagen-Display-Bibliothek | 3-4 Wochen |
| Schritt 4: Screening der Antikörperbibliothek (3 Runden) | (1) Standardmäßiges 3-Runden-Screening (Festphasen-Screening): Druck-Screening zur größtmöglichen Entfernung unspezifischer Antikörper. (2) Amplifikation eines einzelnen Klons durch Bakteriophagen-Selektion + IPTG-induzierte Expression + ELISA-Nachweis positiver Klone. (3) Alle positiven Klone wurden für die Gensequenzierung ausgewählt. | 4-5 Wochen |
Unterstützungsdienste
Wir bieten verschiedene Dienstleistungen zur Erstellung tierbasierter Immunbibliotheken und zum Screening natürlicher Antikörperbibliotheken an, die auf die Kundenbedürfnisse zugeschnitten sind.
Mehrere Ziele
Es werden Dienstleistungen zur Entdeckung von Antikörpern für verschiedene Zielmoleküle angeboten: Proteine, Peptide, kleine Moleküle, Viren, Membranproteine, mRNA usw.
Mehrere Vektoren
Wir bieten einen personalisierten Bibliotheksaufbauservice an und können verschiedene Bakteriophagenvektoren wie PMECS, pComb3X und pCANTAB 5E bereitstellen und diese nach Kundenwunsch modifizieren.
Ausgereifte Plattform
Die Speicherkapazität kann 10⁸–10⁹ erreichen, die Insertionsraten liegen alle über 90 % und die Affinität der durch Screening gewonnenen Antikörper liegt im Allgemeinen im nM-pM-Bereich.
Dienstleistungen zur Entwicklung monoklonaler Antikörper
Wir bieten Ihnen Dienstleistungen zur Entwicklung hochwertiger, hochreiner und hochspezifischer monoklonaler Antikörper an, einschließlich der Herstellung von monoklonalen Maus- und Kaninchenantikörpern.
Hybridoma-Technologieplattform
Dazu gehören Impfprogramme, Antikörperpräparation, Antikörperreinigung, Hochdurchsatzsequenzierung von Antikörpern, Antikörpervalidierung usw.
Plattform zur Sortierung einzelner B-Zellen
Alpha Lifetech bietet Vorteile hinsichtlich Screening-Zeit und Gewinnung hochwertiger Antikörper. Das Unternehmen bietet Antigen-Design, -Synthese und -Modifikation, Tierimmunologie, Einzelzell-B-Zell-Anreicherung und Einzelzellsequenzierung an.
Phagen-Display-Antikörper-Entwicklungsplattform
Alpha Lifetech bietet technische Dienstleistungen für die Entwicklung von Phagen-Display-Antikörpern an, von der Antikörperpräparation über die Antikörperreinigung bis hin zur Antikörpersequenzierung usw.






16.07.2018 

