Entwicklungsplattform für Phagendisplay-Antikörper
Phagendisplay-Technologie

Arbeitsablauf bei der Herstellung von Phagendisplay-Antikörpern
Schritte | Leistungsinhalt | Zeitleiste |
---|---|---|
Schritt 1: Immunisierung des Tieres | (1) Das Tier wurde 4-mal immunisiert, anschließend wurde eine Auffrischungsimpfung mit einer Dosis durchgeführt, sodass insgesamt 5 Dosen immunisiert wurden. (2) Vor der Immunisierung wurde ein negatives Serum gesammelt und bei der vierten Dosis wurde ein ELISA durchgeführt, um den Serumtiter zu bestimmen. (3) Entspricht der Serum-Antikörpertiter der vierten Dosis den Anforderungen, wird 7 Tage vor der Blutentnahme eine weitere Immunisierungsdosis verabreicht. Andernfalls wird die Routineimpfung fortgesetzt. (4) Qualifizierte Potenzierung, Blutentnahme und Trennung von Monozyten | 10 Wochen |
Schritt 2: cDNA-Vorbereitung | (1) PBMC-Gesamt-RNA-Extraktion (RNA-Extraktionskit) (2) Hochpräzise RT-PCR-Präparation von cDNA (Reverse-Transkription-Kit) | 1 Tag |
Schritt 3: Aufbau der Antikörperbibliothek | (1) Unter Verwendung von cDNA als Vorlage wurden Gene durch zwei PCR-Runden amplifiziert. (2) Phagenkonstruktion und -transformation: Genspleiß-Phagemidvektor, Elektroporationstransformation von TG1-Wirtsbakterien, Konstruktion einer Antikörperbibliothek. (3) Identifizierung: 24 Klone werden nach dem Zufallsprinzip ausgewählt, PCR-Identifizierungs-Positivrate + Insertionsrate. (4) Unterstützte Phagenpräparation: M13-Phagenamplifikation + Reinigung. (5) Rettung der Phagendisplay-Bibliothek | 3-4 Wochen |
Schritt 4: Screening der Antikörperbibliothek (3 Runden) | (1) Standardmäßiges 3-Runden-Screening (Festphasenscreening): Druckscreening zur größtmöglichen Entfernung unspezifischer Antikörper. (2) Einzelklonamplifikation ausgewählter Bakteriophagen + IPTG-induzierte Expression + ELISA-Nachweis positiver Klone. (3) Alle positiven Klone wurden für die Gensequenzierung ausgewählt. | 4-5 Wochen |

Support-Dienste
Wir können je nach Kundenbedarf verschiedene Dienstleistungen zum Aufbau tierbasierter Immunbibliotheken und Screening-Dienste für natürliche Antikörperbibliotheken anbieten.

Mehrere Ziele
Es stehen Dienste zur Entdeckung mehrerer Zielantikörper zur Verfügung: Proteine, Peptide, kleine Moleküle, Viren, Membranproteine, mRNA usw.

Mehrere Vektoren
Personalisierter Bibliotheksaufbauservice. Wir können verschiedene Bakteriophagenvektoren bereitstellen, darunter PMECS, pComb3X und pCANTAB 5E, und diese entsprechend den Kundenanforderungen modifizieren

Ausgereifte Plattform
Die Speicherkapazität kann 10 ^ 8-10 ^ 9 erreichen, die Insertionsraten liegen alle über 90% und die Affinität der durch Screening erhaltenen Antikörper liegt im Allgemeinen im nM-pM-Bereich
Entwicklungsdienst für monoklonale Antikörper
Wir bieten qualitativ hochwertige, hochreine und hochspezifische Dienstleistungen im Bereich der Entwicklung monoklonaler Antikörper an, darunter die Produktion monoklonaler Maus- und Kaninchen-Antikörper.
Hybridoma-Technologieplattform
Einschließlich Immunisierungsprogramm, Antikörpervorbereitungsdienste, Antikörperreinigung, Antikörper-Hochdurchsatzsequenzierung, Antikörpervalidierung usw.
Plattform zur Sortierung einzelner B-Zellen
Alpha Lifetech bietet Vorteile hinsichtlich der Screeningzeit und der Gewinnung hochwertiger Antikörper. Das Unternehmen bietet Antigendesign, -synthese und -modifikation, Tierimmunität, Einzel-B-Zell-Anreicherungsscreening und Einzelzellsequenzierung an.

Entwicklungsplattform für Phagendisplay-Antikörper
Alpha Lifetech kann technische Dienste zur Entwicklung von Phagendisplay-Antikörpern anbieten, von der Antikörperherstellung über die Antikörperreinigung bis hin zur Antikörpersequenzierung usw.