Bauservice für Hefeausstellungsbibliotheken

Alpha Lifetech ist spezialisiert auf die Erstellung von Hefe-Display-Bibliotheken und das Screening von Antikörperbibliotheken. Wir bieten unseren Kunden weltweit die Möglichkeit, verschiedene Formen von Hefebibliotheken zu generieren und diese auf hochaffine und spezifische Antikörper zu screenen. Mit einem Team aus erfahrenen Forschern, modernster Technologie und Ausrüstung können wir Hefebibliotheken erstellen, die auf ein breites Spektrum krankheitsrelevanter Proteine abzielen.

Hintergrundinformationen zum Hefe-Anzeigesystem

Die Hefe-Display-Technologie ist eine eukaryotische Proteinexpressionstechnologie, die den intrazellulären Proteintransportmechanismus (GPI-Anker) des Hefe-Oberflächendisplaysystems nutzt, um exogene Antikörper oder Proteingene auf der Hefeoberfläche zu immobilisieren und zu präsentieren. Das Hefe-Oberflächendisplaysystem verfügt über einen vollständigen Mechanismus zur posttranslationalen Proteinmodifikation und -sekretion und eignet sich daher besonders für die Faltung, Modifizierung und den Transport humanisierter Proteine. Die mit diesem System produzierten Antikörper ähneln daher humanen nativen Antikörpern sowohl in ihrer Konformation als auch in ihrer Funktion und bieten vielversprechendes Potenzial für die Behandlung von Krankheiten.

Das Hefe-Display-System ermöglicht die Herstellung von Antikörpern, die spezifisch für Proteine, Peptide, kleine Moleküle und T-Zell-Rezeptoren sind. Diese Antikörper zeichnen sich durch Vielseitigkeit, Quantifizierbarkeit und therapeutische Wirksamkeit aus. Die Anwendungsmöglichkeiten der Hefe-Display-Technologie sind jedoch noch vielfältiger. Sie kann nicht nur zur Antikörperentwicklung mittels Hefe-Display genutzt werden, sondern auch für das Screening von Proteinbibliotheken, die gerichtete Evolution von Proteinen, die Konstruktion von Antigenbibliotheken, die Sortierung hochaffiner Antikörper, die Affinitätsreifung von Antikörpern, die Impfstoffproduktion, die Immunbiokatalyse und Biosensoren. Dies eröffnet vielversprechende Perspektiven in den Bereichen Diagnostik, Therapie und medizinische Forschung. Darüber hinaus weisen Proteine, die mittels antigenem Hefe-Oberflächen-Display hergestellt werden, eine ihrer natürlichen Konformation sehr nahe und eignen sich daher ideal für serologische Tests wie ELISA. Hefedisplay-Alpha Lifetech

Abb. 1: Prinzip der Hefedarstellung

Konstruktion einer Hefe-Display-Bibliothek (Prozess)

Unsere Hefebibliotheken zeichnen sich durch hohe Kapazität und Diversität aus und bilden somit eine hervorragende Grundlage für das effektive Screening spezifischer Antikörpersequenzen. Wir können verschiedene Arten von Hefe-Antikörperbibliotheken (IgG-, scFv-, VHH- und Fab-Antikörperbibliotheken), Proteinbibliotheken, Peptidbibliotheken, cDNA-Bibliotheken usw. nach Ihren Anforderungen erstellen. Darüber hinaus entwickeln wir Antikörperbibliotheken mit unterschiedlichen Eigenschaften, darunter Immunbibliotheken, natürliche Bibliotheken, synthetische Bibliotheken, halbsynthetische Bibliotheken und Bibliotheken mit Antikörpern gegen Krankheiten. pYD ist unser häufig verwendeter Hefe-Oberflächenexpressionsvektor.

Wir sind in der Lage, Hefebibliotheken mit einer Kapazität von bis zu 10⁹ Zellen, einer Insertionsrate von 100 % und hoher Diversität zu erstellen. Vor der Auslieferung der Hefebibliothek validieren wir diese sorgfältig, um die Diversität, Integrität und Funktionalität der Antikörpergene sicherzustellen. Um eine sehr hohe Affinität und Spezifität der gescreenten Antikörper zu gewährleisten, nutzen wir die quantitative Echtzeit-Analyse der Antikörperbibliothek. Mittels fluoreszenzaktivierter Zellsortierung (FACS) werden Veränderungen in der Antikörperexpression und -aktivität quantitativ erfasst. Dabei werden spezifische Marker auf Antikörpern und Antigenen verwendet, um die Bindungsstärke und die Antikörperexpression auf der Oberfläche von Hefezellen zu bestimmen. Mit FACS-Bindungsassays screenen wir quantitativ nach Antikörpern mit hoher Bindungsaffinität und -selektivität. Die Display-Effizienz unserer Hefe-Nanobody-Bibliothek mittels FACS liegt bei über 95 %. Typischerweise umfasst das Hefe-Screening 3–5 Screening- und Anreicherungsrunden, wodurch wir innerhalb kurzer Zeit Antikörper mit hoher Affinität gewinnen können.

Das Hefe-Display-System hat sich zu einem leistungsstarken Werkzeug in der gerichteten Proteinevolution entwickelt. Alpha Lifetech bietet Dienstleistungen in den Bereichen Proteinexpression, -reinigung und Expressionskinetikanalyse für die spezifische In-vitro-Antikörperherstellung an. Wir sind in der Lage, Proteine in großem Maßstab herzustellen und die Reinheit rekombinanter Proteine effektiv zu verbessern. Wir bieten einen Komplettservice von der Gensynthese bis zur Expression und Reinigung rekombinanter Proteine. Mithilfe unseres fortschrittlichen Hefe-Display-Systems haben wir erfolgreich Antikörper mit höchster Affinität im Pikomolarbereich (pM) hergestellt – ein bedeutender Durchbruch in der Technologie der In-vitro-Antikörperherstellung.