Εισαγωγή στις βιβλιοθήκες συνθετικών αντισωμάτων

Η βιβλιοθήκη συνθετικών αντισωμάτων, γνωστή και ως βιβλιοθήκη De novo, είναι μια συνθετική μέθοδος που χρησιμοποιεί τεχνικές όπως η σύνθεση DNA ή η απεικόνιση φάγων για τον σχεδιασμό και τη σύνθεση πλήρων μεταβλητών περιοχών αντισωμάτων, συμπεριλαμβανομένων των περιοχών πλαισίου και των CDR, χωρίς να βασίζεται σε αφελείς βιβλιοθήκες αντισωμάτων.

Η ημισυνθετική βιβλιοθήκη αντισωμάτων δημιουργείται συνδυάζοντας φυσικώς απαντώμενες βιβλιοθήκες αντισωμάτων με συνθετική ποικιλομορφία. Συνήθως περιλαμβάνει τη σύνθεση ολιγονουκλεοτιδίων DNA για την παραγωγή ενός συνόλου διαφορετικών συμπληρωματικών προσδιοριστικών περιοχών (CDR), οι οποίες στη συνέχεια συνδυάζονται με ένα σταθερό πλαίσιο αντισωμάτων που προέρχεται από φυσικές πηγές όπως ανθρώπινα ή ζωικά Β κύτταρα. Η συνθετική CDR εισάγει ποικιλομορφία στη βιβλιοθήκη, με αποτέλεσμα αντισώματα που στοχεύουν σε ένα ευρύ φάσμα επιτόπων. Η ημισυνθετική βιβλιοθήκη αντισωμάτων παρέχει έναν συμβιβασμό μεταξύ της φυσικής ποικιλομορφίας του ανοσοποιητικού συστήματος και της ελεγχόμενης ποικιλομορφίας που επιτυγχάνεται μέσω συνθετικών μεθόδων.

Η διάκριση μεταξύ των αφελών και των συνθετικών βιβλιοθηκών αντισωμάτων εξαρτάται από την πηγή των γονιδίων ανοσοσφαιρίνης. Εν τω μεταξύ, η διαφορά μεταξύ μιας ημισυνθετικής και μιας συνθετικής βιβλιοθήκης αντισωμάτων έγκειται στο ότι η πρώτη αποτελείται από μέρος των αφελών τμημάτων αντισωμάτων, όπως η ελαφριά ή η βαριά αλυσίδα, και μόνο ένα από αυτά συντίθεται in vitro, ενώ το συνθετικό προέρχεται εξ ολοκλήρου από τεχνητή σύνθεση με PCR in vitro.

Η Alpha Lifetech μπορεί να παρέχει

Άλφα Λάιφτεκ Α.Ε.μπορεί να προσφέρει μια βιβλιοθήκη ημι-συνθετικών/συνθετικών αντισωμάτων από ζώα και ανθρώπους, βασισμένη στην επαγγελματική μας πλατφόρμα ανακάλυψης αντισωμάτων. Με πολυετή εμπειρία στη γενετική τροποποίηση και την κατασκευή βιβλιοθηκών, μπορούν να κατασκευαστούν συνθετικές βιβλιοθήκες που είναι σε θέση να παράγουν συνθετικά αντισώματα με συγγένεια και εξειδίκευση που ξεπερνά την ικανότητα των φυσικών αντισωμάτων.Alpha Lifetech'sΟι ειδικοί είναι περήφανοι που ανακοινώνουν ότι μπορούμε να εγγυηθούμε υψηλό ποσοστό επιτυχίας στην κατασκευή μιας βιβλιοθήκης αντισωμάτων που περιέχει 10^8 – 10^10 ανεξάρτητους κλώνους.

Άλφα Λάιφτεκ Α.Ε.είναι περήφανη που προσφέρει ολοκληρωμένες υπηρεσίες κατασκευής βιβλιοθηκών αντισωμάτων για την κάλυψη των ποικίλων αναγκών των παγκόσμιων ερευνητών, συμπεριλαμβανομένων των βιβλιοθηκών scFv, Fab, αντισωμάτων VHH και προσαρμοσμένων βιβλιοθηκών. Στόχος μας είναι να κατανοήσουμε και να ανταποκριθούμε στις απαιτήσεις διαφορετικών πελατών και να βοηθήσουμε σε τυχόν επερχόμενα και αναδυόμενα προβλήματα στην ερευνητική εργασία.

Διαδικασία Υπηρεσίας Κατασκευής Βιβλιοθηκών Συνθετικών Αντισωμάτων

Σχέδιο
Η φάση σχεδιασμού περιλαμβάνει την επιλογή πλαισίων αντισωμάτων και περιοχών που καθορίζουν τη συμπληρωματικότητα (CDR) με βάση υπάρχουσες αλληλουχίες αντισωμάτων ή δομικά δεδομένα. Τα συνθετικά αντισώματα CDR μπορούν επίσης να σχεδιαστούν για να εισάγουν συγκεκριμένες λειτουργικότητες ή να ενισχύσουν τις ιδιότητες σύνδεσης.

Σύνθεση
Το συνθετικό DNA που κωδικοποιεί τις σχεδιασμένες αλληλουχίες αντισωμάτων, συμπεριλαμβανομένων τόσο των περιοχών πλαισίου όσο και των CDR, συντίθεται χρησιμοποιώντας χημικές ή ενζυματικές μεθόδους.

Συνέλευση
Τα συντεθειμένα θραύσματα DNA συναρμολογούνται σε φορείς έκφρασης αντισωμάτων χρησιμοποιώντας τεχνικές όπως PCR, σύνδεση ή συναρμολόγηση Gibson. Αυτοί οι φορείς μπορούν στη συνέχεια να εισαχθούν σε συστήματα έκφρασης όπως βακτηριακά, ζυμομυκητικά ή θηλαστικά κύτταρα για την παραγωγή αντισωμάτων.

Προεπιλογή και Επιλογή
Οι κατασκευασμένες βιβλιοθήκες αντισωμάτων ελέγχονται και επιλέγονται για αντισώματα με επιθυμητές ιδιότητες χρησιμοποιώντας μεθόδους ελέγχου υψηλής απόδοσης. Αυτό μπορεί να περιλαμβάνει τεχνικές όπως η απεικόνιση φάγων, η απεικόνιση ζυμομυκήτων ή η απεικόνιση ριβοσωμάτων, ανάλογα με τη μορφή και την εφαρμογή της βιβλιοθήκης.

Υπηρεσία Κατασκευής Βιβλιοθηκών Συνθετικών Αντισωμάτων

Άλφα Λάιφτεκ Α.Ε.παρέχει στους πελάτες μια ολοκληρωμένη υπηρεσία σχεδιασμού και σύνθεσης βιβλιοθηκών αντισωμάτων, συνδέοντας τα ρεπερτόρια των γονιδίων V της βαριάς και ελαφριάς αλυσίδας σε έναν φορέα φάγου χρησιμοποιώντας το σύστημα ανασυνδυασμού Cre-lox για τη δημιουργία ενός ρεπερτορίου Fabs που εμφανίζονται σε φάγο και περιλαμβάνει 6,5 × 10^10 κλώνους. Η βιβλιοθήκη απέδωσε Abs έναντι πολυάριθμων αντιγόνων, μερικά με νανομοριακή συγγένεια. Η δημιουργία της βιβλιοθήκης ανθρώπινων αντισωμάτων βασίζεται στην τεχνολογία απεικόνισης φάγων M13 (φαίνεται στο παρακάτω σχήμα).