Aptamer Evoluiga Platformo

Aptameroj estas unu-fadenaj oligonukleotidoj (DNA, RNA aŭ XNA) kun la eco de alta afineco kaj alta specifeco, kiuj specife ligas al celmolekuloj kiel antikorpoj, kaj ili estas vaste uzataj por la disvolviĝo de biosensiloj, diagnozo kaj terapioj.

La aptamera platformo provizita de Alpha Lifetech inkluzivas du kategoriojn: aptamer-sinteza platformo, kiu ĉefe implikas SELEX-aptamer-bibliotekan sintezservon kaj aptamer-disvolvan servon (DNA, RNA aŭ XNA), kaj aptamer-rastruma platformo inkluzive de rastrumservoj bazitaj sur SELEX-teknologio por proteinoj, peptidoj, ĉeloj, malgrandaj molekuloj, metaljonoj kaj aliaj celmolekuloj, same kiel laŭfluajn aptamer-optimigajn kaj identigajn analizservojn.

Platformo por Sintezo de Aptamer

SELEX aptamer-biblioteka sintezservo

La sintezservo de aptamerbibliotekoj de SELEX ĉefe implikas la konstruadon de biblioteko enhavanta grandan nombron da hazardaj unu-fadenaj oligonukleotidaj sekvencoj per kemia sintezo en vitro laŭ la celaj molekuloj. La konstruado de bibliotekoj estas la deirpunkto de SELEX-teknologio, kiu provizas abundajn kandidatajn sekvencojn por la posta kribra procezo per konstruado de grandegaj hazardaj bibliotekoj kaj pliigas la eblecon kribri aptamerojn kun alta afineco.

Biblioteka sintezo estas ĉefe dividita en la jenajn paŝojn:

Ŝtupoj	Teknologiaj Detaloj
Identigu Celajn Molekulojn	Identigu la celmolekulojn, kiujn necesas ekzameni por aptameroj, kiuj povas esti proteinoj, nukleaj acidoj, malgrandaj molekulaj, metaljonoj, ktp.
Hazarda Sekvenca Dezajno	Hazarda sekvenclongo, bazkonsisto kaj aliaj parametroj estis dizajnitaj laŭ la karakterizaĵoj de celmolekuloj kaj kribraj postuloj. Tipe, hazardaj sekvencoj estas inter dekoj kaj centoj da bazoj longaj.
Sintezo de Fiksaj Sekvencoj	Oligonukleotidaj fragmentoj kun fiksitaj sekvencoj (kiel ekzemple PCR-enkondukaj sekvencoj) ĉe ambaŭ finoj estas desegnitaj kaj sintezitaj, kiuj estos uzataj en la posta amplifika kaj rastruma procezo.

La sintezita biblioteko ankoraŭ bezonas pluan prilaboradon por kvalito-kontrolo. La koncentriĝo de la biblioteko estis determinita por certigi ĝian aplikeblecon en la posta ekzamena procezo. La diverseco kaj precizeco de hazardaj sekvencoj en la biblioteko estis kontrolitaj per sekvencado kaj aliaj metodoj por certigi, ke la kvalito de la biblioteko plenumas la ekzamenajn postulojn.

Per la supraj paŝoj, altkvalita kaj tre diversa SELEX-aptamera biblioteko povas esti sintezita, kiu povas provizi abundajn kandidatsekvencojn por la posta rastrumprocezo.

Servoj pri aptamera disvolviĝo (DNA, RNA aŭ XNA)

Aptameroj kutime rilatas al nukleaacidaj aptameroj. Nukleaacidaj aptameroj inkluzivas DNA-aptamerojn, RNA-aptamerojn, kaj XNA-aptamerojn, kiuj estas kemie modifitaj nukleaacidaj aptameroj. La SELEX-tekniko estas vaste uzata por la disvolviĝo de aptameroj. La baza laborfluo de aptamer-disvolvaj servoj inkluzivas bibliotekan konstruadon, celligadon, izoladon kaj purigon, amplifikadon, plurajn rondojn de rastrumo, kaj sekvencan identigon. Dum multaj jaroj, ni fokusiĝis al biblioteka konstruado kaj havas riĉan sperton en aptamer-disvolvado. Ni estas dediĉitaj al provizado de pli bonaj servoj al klientoj.

SELEX Teknologia Procezo

La SELEX-procezo konsistas el pluraj rondoj, ĉiu el kiuj konsistas el la jenaj ŝlosilaj paŝoj:

Biblioteko kaj Cela Ligado

La konstruita nukleaacida biblioteko estas miksita kun specifaj celmolekuloj (kiel proteinoj, malgrandaj molekulkunmetaĵoj, ktp.), tiel ke la nukleaacidaj sekvencoj en la biblioteko havu la ŝancon ligiĝi al la celmolekuloj.

Izolado de Neligitaj Molekuloj

Nukleacidaj sekvencoj, kiuj ne estas ligitaj al la cela molekulo, estas apartigitaj de la miksaĵo per specifaj metodoj kiel afineca kromatografio, magneta perlapartigo, ktp.

Amplifiĝo de Ligaj Molekuloj

La nukleaacida sekvenco ligita al cela molekulo estas amplifikita, kutime uzante polimerazan ĉenreakcion (PCR). Por la posta ekzamena fazo, la amplifikitaj sekvencoj estos uzataj kiel la komenca biblioteko.

Figuro 1: SELEX-rastrumprocezo

Aptamer-Rastruma Platformo

Aptamer-rastruma servo

Alpha Lifetech ofertas diversan gamon da specialigitaj aptamer-rastrumaj servoj aplikante diversajn SELEX-metodologiojn por malsamaj specoj de viaj molekuloj:

Celspecoj	Teknikaj Detaloj
Proteina Aptamera Rastrumo per SELEX	La ĉefa celo de proteina aptamera ekzamenado estas ekzameni aptamerojn, kiuj povas specife ligiĝi al celaj proteinmolekuloj. Ĉi tiuj aptameroj estas pli simplaj por sintezi, pli stabilaj kaj malpli sentemaj al mediaj faktoroj.
Peptida Aptamera Rastrumo fare de SELEX	Peptidaj aptameroj estas klaso de mallongaj peptidaj sekvencoj kun alta specifeco kaj afineco, kiuj povas specife ligi al celaj substancoj kaj montras vastan gamon da aplika potencialo en la biomedicina kampo. Per specifa kribra procezo, peptidaj aptameroj, kiuj povas specife ligi al celaj molekuloj, estas kribrataj el granda nombro da hazardaj peptidaj sekvencbibliotekoj.
Ĉel-specifa Aptamera Rastrumo (Cell-SELEX)	Celĉeloj aŭ specifaj molekuloj sur la ĉelsurfaco estas preparitaj kiel celoj. Celoj povas esti tutaj ĉeloj, receptoroj sur la ĉelmembrano, proteinoj aŭ aliaj malgrandaj molekuloj.
Malgranda Molekula Aptamera Rastrumo per Capture SELEX	Kapto SELEX estas en vitra ekzamena tekniko por la ekzameno de malgrandmolekulaj aptameroj, kiu estas variaĵo de SELEX. Kapto SELEX estas precipe bone taŭga por aptamera ekzameno de malgrandmolekulaj celoj, kiuj tipe havas malpli da funkciaj grupoj kaj malfacilas senmovigi rekte sur solidfazaj subtenoj.
SELEX-servoj bazitaj sur vivaj bestoj	Servo pri ekzamenado bazita sur vivaj bestoj estas eksperimenta tekniko vaste uzata en la kampoj de bioscienco, medicino kaj bioteknologio, kiu uzas vivajn bestojn kiel eksperimentajn modelojn por ekzameni kaj taksi specifajn molekulojn, medikamentojn, terapiaĵojn aŭ biologiajn procezojn. La servoj estas desegnitaj por simuli la fiziologian medion en la homa korpo por pli precize antaŭdiri kaj taksi la efikecon kaj sekurecon de eksperimentaj rezultoj en la homa korpo.

Aptamer-optimiga servo

La hidrofileco, alta afineca perdo dum produktado, kaj rapida ekskrecio de aptameroj limigas ilian aplikon. Nuntempe, diversaj optimumigaj metodoj estas esploritaj por plibonigi la rendimenton de aptameroj.

Ni ankaŭ havas diversajn manierojn optimumigi aptameron, konsistantajn el stumpigo, modifoj, konjugacio al la taŭga grupo (tiolo, karboksilo, amino, fluoroforo, ktp.).

Servo pri analizado de aptamer-karakterizado

Analiza servo pri karakterizado de aptamero rilatas al la profesia servo de taksado de rendimento, solvado de strukturo kaj funkcia konfirmo de la akirita aptamero por certigi, ke la aptamero plenumas la postulojn pri specifa ligkapablo, stabileco kaj specifeco. Ĝi ĉefe inkluzivas analizon de afineco kaj specifeco, taksadon de stabileco kaj konfirmon de biologia funkcio.