Servo pri Evoluigo de Monoklonaj Antikorpoj

Alpha Lifetech Inc.povas provizi epitopprognozon, peptidsintezon, proteinekspresion, poliklonan aŭ monoklonan antikorpan produktadon same kiel antikorpan purigon el ĉelkulturo, ascita fluido aŭ tuta serumo.

Alpha Lifetech Inc.havas sperton pri provizado al klientoj de diversaj stabilaj ĉelliniaj servoj, inkluzive de hibridomaj ĉeloj, genomaj redaktaj ĉellinioj, malaktivigitaj ĉellinioj kaj troesprimaj ĉellinioj. Ni klopodas oferti progresintajn personecigitajn ĉelliniajn servojn al ĉiu kliento, kaj niaj servoj estas pruvitaj kaj fidindaj.

Strategio pri Antikorpa Disvolviĝo

1. Antigena dezajno kaj preparado
Tiuj antigenoj povas esti proteinoj, peptidoj, aŭ aliaj molekuloj. La dizajnado de imunogenoj postulas ampleksan aliron, kiu integras scion pri antigena strukturo, imunologio, kaj liverosistemoj. Alpha Lifetech havas antigenan dizajnan teknologion, kiu povas desegni imunogenojn por klientoj, kiuj bezonas ilin.
Alpha Lifetech provizas rekombinajn proteinajn produktojn por ke klientoj elektu. Ni havas diversajn proteinajn esprimsistemojn, kiel ekzemple E. coli esprimsistemon, gistan esprimsistemon, bakulovirus-insektan esprimsistemon, mamulan esprimsistemon, ktp., por produkti la rekombinajn proteinojn, kiujn vi bezonas por esplorado.

2. Besta imunigo
Alpha Lifetech povas provizi imunogenojn al klientoj, kaj imunaj bestoj kiel musoj, kunikloj, ŝafoj, alpakoj, kobajoj, hamstroj, ktp. estas disponeblaj por ke vi elektu.

3. Metodoj por produktado de monoklonaj antikorpoj

●Produktado de Mabs per Hibridoma teknologio
Hibridomo estas hibrida ĉelo produktita per la fuzio de du specoj de ĉeloj, nome musa mieloma ĉellinio kaj plasmoĉeloj (limfocito B), en kiuj la heterozigota ĉelo povas produkti kontinuajn antikorpojn kontraŭ la interesata antigeno in vitro. La produktado de hibridoma ĉellinio konsistas el tri partoj: antigena dizajno (haptenoj, malgrandaj molekuloj kaj peptidoj), besta imunigo, ĉelfuzio kaj pozitiva klonrastrumo. Uzante unikajn imunigajn metodologiojn, ni atingas escepte altajn ĉelfuziajn efikecojn (1-10 hibridomoj por mil B-ĉeloj) kaj altajn antikorpajn titolojn, maksimumigante nian sukcesfrekvencon en postaj analizaj testoj, kiuj inkluzivas biokemian rastrumon, in vitro ĉelbazitajn analizojn kaj bestajn studojn.

●Produktado de MAB-oj per fago-ekrana teknologio
Fagoeksponado proponas alian metodon por generi monoklonajn antikorpojn. B-limfocitoj estas izolitaj el besta sango kaj ilia mRNA estas ekstraktita. Per PCR, ĉi tiu mRNA estas konvertita en cDNA, kiu amplifas ĉiujn VH- kaj VL-segmentojn. Ĉi tiuj segmentoj estas poste klonitaj en vektoron, tipe kiel unuĉenaj variaj fragmentoj (scFv), kune kun la PIII-proteino de bakteriofago. Poste, ĉi tiu konstrukcio estas uzata por infekti E. coli, rezultante en la kreado de biblioteko enhavanta proksimume 10^10 ĉelojn per inokulado kun helpanta fago. E. coli tiam kapablas sekrecii la bakteriofago enhavanta la VH- kaj VL-segmentojn kiel parton de sia tegaĵo. Post tio, specifaj VH- kaj VL-segmentoj celantaj la interesatan antigenon povas esti elektitaj kaj uzataj por reinjekti E. coli kun la bakteriofago. Ĉeloj enhavantaj la plasmidon estas poste izolitaj kaj sekvencitaj.

4. Fuzia rastrumo

●Ĉela Fuzio kaj Selektado
La rikoltitaj B-ĉeloj estas poste kunfanditaj kun mielomaj ĉeloj, kiuj estas kanceraj ĉeloj, kiuj povas senfine multiĝi en kulturo. La kunfandiĝo estas tipe atingita per tekniko kiel ekzemple kunfandiĝo kun polietilen-glikolo (PEG).
Post la kunfandiĝo, la hibridomaj ĉeloj estas kultivataj en selektema medio, kiu permesas nur al la hibridomoj pluvivi. La medio kutime enhavas aminopterinon, kiu malhelpas la kreskon de nekunfanditaj mielomaj ĉeloj.

●Rastrumo kaj Algluiĝo
La rezultantaj hibridomaj ĉeloj estas ekzamenitaj por la produktado de antikorpoj specifaj al la cela antigeno. Ĉi tio estas tipe farata uzante teknikojn kiel enzim-ligita imunosorba analizo (ELISA), okcidenta makulumado, imunoprecipitado kaj fluocitometrio.

Post kiam hibridomaj ĉeloj produktantaj la antikorpon estas identigitaj, ili estas klonitaj por generi populacion de identaj ĉeloj. Tio certigas, ke la antikorpo produktita de ĉiu hibridoma ĉelo estas identa.

5. Funkcia Konfirmo de Antikorpoj
Alpha Lifetech provizas funkcian validigon de antikorpoj, kiel ekzemple okcidenta makulumado, imunohistokemio aŭ funkciaj testoj, por karakterizi monoklonajn antikorpojn kaj konfirmi antikorpan specifecon, afinecon kaj funkciecon.

6. Antikorpa optimumigo
Purigado de antikorpoj el kultursupernatanto uzante teknikojn kiel proteino A aŭ proteino G afinecan kromatografion, kaj Alpha Lifetech ankaŭ povas provizi antikorpajn modifmetodojn por plibonigi antikorpan afinecon.

7. Antikorpa produktado
Alpha Lifetech povas taksi kandidatajn antikorpojn por alt-trairaj ekzamenaj aplikoj kaj grandskala produktado.