Plataforma de desarrollo de aptámeros

Los aptámeros son oligonucleótidos monocatenarios (ADN, ARN o XNA) con la propiedad de alta afinidad y alta especificidad que se unen específicamente a moléculas objetivo como los anticuerpos, y se utilizan ampliamente para el desarrollo de biosensores, diagnóstico y terapias.

La plataforma de aptámeros proporcionada por Alpha Lifetech incluye dos categorías: la plataforma de síntesis de aptámeros, que implica principalmente el servicio de síntesis de bibliotecas de aptámeros SELEX y el servicio de desarrollo de aptámeros (ADN, ARN o XNA), y la plataforma de detección de aptámeros que incluye servicios de detección basados en la tecnología SELEX para proteínas, péptidos, células, moléculas pequeñas, iones metálicos y otras moléculas objetivo, así como servicios de análisis de identificación y optimización de aptámeros posteriores.

Plataforma de síntesis de aptámeros

Servicio de síntesis de bibliotecas de aptámeros SELEX

El servicio de síntesis de bibliotecas de aptámeros SELEX consiste principalmente en la construcción de una biblioteca que contiene un gran número de secuencias aleatorias de oligonucleótidos monocatenarios mediante síntesis química in vitro, según las moléculas diana. La construcción de bibliotecas es el punto de partida de la tecnología SELEX, que proporciona abundantes secuencias candidatas para el posterior proceso de cribado mediante la construcción de enormes bibliotecas aleatorias y aumenta la posibilidad de cribar aptámeros de alta afinidad.

La síntesis de bibliotecas se divide principalmente en los siguientes pasos:

Pasos	Detalles de la tecnología
Identificar moléculas objetivo	Identificar las moléculas objetivo que necesitan ser analizadas para detectar aptámeros, que pueden ser proteínas, ácidos nucleicos, moléculas pequeñas, iones metálicos, etc.
Diseño de secuencia aleatoria	La longitud de la secuencia aleatoria, la composición de bases y otros parámetros se diseñaron según las características de las moléculas objetivo y los requisitos de cribado. Normalmente, las secuencias aleatorias tienen una longitud de entre decenas y cientos de bases.
Síntesis de secuencias fijas	Se diseñan y sintetizan fragmentos de oligonucleótidos con secuencias fijas (como secuencias de cebadores de PCR) en ambos extremos, que se utilizarán en el posterior proceso de amplificación y cribado.

La biblioteca sintetizada aún requiere mayor procesamiento para el control de calidad. Se determinó su concentración para garantizar su aplicabilidad en el proceso de cribado posterior. La diversidad y precisión de las secuencias aleatorias de la biblioteca se verificaron mediante secuenciación y otros métodos para garantizar que su calidad cumpliera con los requisitos de cribado.

Mediante los pasos anteriores, se puede sintetizar una biblioteca de aptámeros SELEX de alta calidad y muy diversa, que puede proporcionar abundantes secuencias candidatas para el proceso de selección posterior.

Servicios de desarrollo de aptámeros (ADN, ARN o XNA)

Los aptámeros suelen referirse a los aptámeros de ácidos nucleicos. Estos incluyen los de ADN, ARN y XNA, que son aptámeros de ácidos nucleicos modificados químicamente. La técnica SELEX se emplea ampliamente para el desarrollo de aptámeros. El flujo de trabajo básico de los servicios de desarrollo de aptámeros incluye la construcción de bibliotecas, la unión a la diana, el aislamiento y la purificación, la amplificación, múltiples rondas de cribado y la identificación de secuencias. Durante muchos años, nos hemos centrado en la construcción de bibliotecas y contamos con una amplia experiencia en el desarrollo de aptámeros. Nos comprometemos a brindar a nuestros clientes un servicio de calidad.

Proceso tecnológico SELEX

El proceso SELEX consta de varias rondas, cada una de las cuales consta de los siguientes pasos clave:

Enlace de biblioteca y destino

La biblioteca de ácidos nucleicos construida se mezcla con moléculas objetivo específicas (como proteínas, compuestos de moléculas pequeñas, etc.), de modo que las secuencias de ácidos nucleicos de la biblioteca tengan la oportunidad de unirse a las moléculas objetivo.

Aislamiento de moléculas no unidas

Las secuencias de ácidos nucleicos que no están unidas a la molécula objetivo se separan de la mezcla mediante métodos específicos como cromatografía de afinidad, separación con perlas magnéticas, etc.

Amplificación de moléculas de unión

La secuencia de ácido nucleico unida a una molécula diana se amplifica, generalmente mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Para la fase de cribado posterior, las secuencias amplificadas se utilizarán como biblioteca de partida.

Figura 1: Proceso de selección SELEX

Plataforma de detección de aptámeros

Servicio de detección de aptámeros

Alpha Lifetech ofrece una amplia gama de servicios especializados de detección de aptámeros aplicando diversas metodologías SELEX para diferentes tipos de moléculas:

Tipos de objetivos	Detalles técnicos
Detección de aptámeros de proteínas mediante SELEX	El objetivo principal del cribado de aptámeros proteicos es identificar aptámeros que puedan unirse específicamente a las moléculas proteicas diana. Estos aptámeros son más fáciles de sintetizar, más estables y menos susceptibles a los factores ambientales.
Detección de aptámeros peptídicos mediante SELEX	Los aptámeros peptídicos son una clase de secuencias peptídicas cortas con alta especificidad y afinidad, capaces de unirse específicamente a sustancias diana y con un amplio potencial de aplicación en el campo biomédico. Mediante un proceso de cribado específico, se seleccionan aptámeros peptídicos capaces de unirse específicamente a moléculas diana a partir de un gran número de bibliotecas aleatorias de secuencias peptídicas.
Detección de aptámeros específicos de células (Cell-SELEX)	Se preparan como dianas células diana o moléculas específicas de la superficie celular. Estas pueden ser células completas, receptores de la membrana celular, proteínas u otras moléculas pequeñas.
Detección de aptámeros de moléculas pequeñas mediante Capture SELEX	Capture SELEX es una técnica de cribado in vitro para el cribado de aptámeros de moléculas pequeñas, una variante de SELEX. Capture SELEX es especialmente adecuada para el cribado de aptámeros de moléculas pequeñas, que suelen tener menos grupos funcionales y son difíciles de inmovilizar directamente en soportes de fase sólida.
Servicios SELEX basados en animales vivos	El servicio de cribado con animales vivos es una técnica experimental ampliamente utilizada en los campos de las biociencias, la medicina y la biotecnología. Utiliza animales vivos como modelos experimentales para cribar y evaluar moléculas, medicamentos, terapias o procesos biológicos específicos. Estos servicios están diseñados para simular el entorno fisiológico del cuerpo humano y así predecir y evaluar con mayor precisión la eficacia y seguridad de los resultados experimentales en el cuerpo humano.

Servicio de optimización de aptámeros

La hidrofilicidad, la alta pérdida de afinidad durante la producción y la rápida excreción de los aptámeros limitan su aplicación. Actualmente, se han explorado diversos métodos de optimización para mejorar su rendimiento.

También tenemos una variedad de formas de optimizar el aptámero que consisten en truncamiento, modificaciones, conjugación al grupo apropiado (tiol, carboxi, amina, fluoróforo, etc.).

Servicio de análisis de caracterización de aptámeros

El servicio de análisis de caracterización de aptámeros se refiere al servicio profesional de evaluación del rendimiento, resolución estructural y verificación funcional del aptámero obtenido para garantizar que este cumpla con los requisitos de capacidad de unión, estabilidad y especificidad. Incluye principalmente análisis de afinidad y especificidad, evaluación de estabilidad y verificación de la función biológica.