Plataforma tecnológica de hibridomas
Alpha Lifetech ofrece a sus clientes productos y servicios de anticuerpos y anticuerpos recombinantes con garantía de calidad.
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Plataforma tecnológica de hibridomas
Alpha Lifetech cuenta con una dilatada experiencia en el campo del desarrollo de anticuerpos. A lo largo de los años, Alpha Lifetech ha consolidado una plataforma integral para el desarrollo de anticuerpos (que incluye el desarrollo de anticuerpos monoclonales, policlonales y recombinantes, así como otros servicios de preparación y desarrollo de anticuerpos).
Alpha Lifetech ofrece a sus clientes productos y servicios de anticuerpos y anticuerpos recombinantes de calidad garantizada. Los anticuerpos preparados poseen una alta especificidad y buena estabilidad. Dispone de diversos instrumentos y equipos para la purificación de anticuerpos, lo que permite purificar anticuerpos de diferentes fuentes, como anticuerpos monoclonales de conejo, oveja, pollo y ratón, así como realizar purificaciones por afinidad con proteína A/G y servicios de separación de anticuerpos.
Basándose en diversas técnicas de preparación de anticuerpos, como la tecnología de células de hibridoma, Alpha Lifetech ofrece servicios personalizados para anticuerpos monoclonales y policlonales de diferentes especies. Además, brindamos una amplia gama de servicios, desde secuenciación de alto rendimiento y preparación y purificación de anticuerpos hasta validación de anticuerpos. Seleccionaremos el método de purificación más adecuado según las necesidades específicas del cliente. Gracias a plataformas integrales como la plataforma de desarrollo de anticuerpos y la plataforma de proteínas, Alpha Lifetech abarca todos los servicios de la producción de anticuerpos, incluyendo purificación, secuenciación de alto rendimiento, validación y otros servicios técnicos.
Tecnología de hibridoma
La tecnología de hibridomas se puede utilizar para preparar anticuerpos monoclonales. Al fusionar células del bazo de ratones inmunizados con células de mieloma de humanos o ratones, se forman células de hibridoma que secretan anticuerpos específicos. Los anticuerpos monoclonales derivados de ratones generados se pueden utilizar en investigación científica, como el ensayo inmunoenzimático (ELISA), el radioinmunoensayo, la inmunohistoquímica, la citometría de flujo, la purificación de proteínas, etc. Las muestras de anticuerpos monoclonales incluyen líquido ascítico, sobrenadante de hibridoma, etc. La muestra obtenida al inyectar células de hibridoma en la cavidad abdominal de animales y utilizar el entorno fisiológico de dicha cavidad para producir anticuerpos se denomina muestra de líquido ascítico. Las células de hibridoma inyectadas en la cavidad abdominal de los animales pueden proliferar y secretar anticuerpos monoclonales, que pueden acumularse en el líquido ascítico. Debido a la posible presencia de impurezas (proteínas animales, hormonas, etc.) en estos anticuerpos, es necesaria su purificación. Basándose en la función secretora de los linfocitos B, los anticuerpos monoclonales suelen secretarse en el medio de cultivo al cultivar células de hibridoma. El líquido que contiene anticuerpos monoclonales en el medio de cultivo se denomina sobrenadante de hibridoma. La pureza de los anticuerpos monoclonales en el sobrenadante es relativamente alta, pero se requiere una purificación adicional para su preparación a gran escala, ya que se obtienen mediante cultivo in vitro.
La purificación de anticuerpos permite aislar anticuerpos de alta pureza a partir de complejos. Actualmente, la purificación por afinidad y la separación y purificación de anticuerpos son métodos comunes, que incluyen principalmente la purificación con proteína A/G, la cromatografía de intercambio iónico, la filtración en gel, la precipitación y la cromatografía de interacción hidrofóbica. Entre ellos, el servicio de purificación por afinidad con proteína A/G es muy popular en diversas aplicaciones de purificación de anticuerpos. El proceso de Alpha Lifetech para la preparación de anticuerpos monoclonales mediante tecnología de hibridoma se muestra en la Figura 1.
Figura 1. Diagrama de proceso para la preparación de anticuerpos monoclonales basados en la tecnología de hibridomas.
Tecnología de conjugados anticuerpo-fármaco e hibridomas
El conjugado anticuerpo-fármaco (ADC) es un agente biológico innovador que combina químicamente anticuerpos con fármacos citotóxicos. Este conjugado combina la capacidad de reconocimiento específico de los anticuerpos con el potente efecto citotóxico de los fármacos, administrándolos con precisión a las células tumorales a través de los anticuerpos, logrando así un tratamiento preciso. La porción de anticuerpo en los fármacos ADC se suele preparar mediante tecnología de hibridoma u otras técnicas de producción de anticuerpos, como la ingeniería genética de anticuerpos. La tecnología de hibridoma proporciona materias primas de anticuerpos de alta calidad para los fármacos ADC. Los fármacos ADC y los anticuerpos monoclonales preparados mediante tecnología de hibridoma desempeñan un papel fundamental en campos como el tratamiento del cáncer. Pueden utilizarse solos o en combinación para potenciar la eficacia terapéutica.
Los anticuerpos monoclonales preparados mediante tecnología de hibridoma poseen alta especificidad, se unen con precisión a antígenos específicos y pueden producirse a gran escala. Mediante la secuenciación de hibridomas, se pueden extraer y secuenciar los genes de anticuerpos presentes en las células de hibridoma para obtener las secuencias correspondientes, lo que facilita la posterior expresión de anticuerpos. Estos anticuerpos monoclonales pueden utilizarse para detectar marcadores específicos de enfermedades, como marcadores tumorales y antígenos virales, lo que contribuye significativamente al diagnóstico precoz de enfermedades. Además, pueden emplearse en experimentos como inmunoblotting e inmunohistoquímica para estudiar la expresión, localización, estructura y función de las proteínas.
Flujo de trabajo del servicio de producción de anticuerpos de la tecnología de hibridomas
| Pasos | Contenido del servicio | Cronología |
|---|---|---|
| Paso 1: Inmunización animal | (1) Inmunización animal 4 veces, inmunización de refuerzo 1 dosis, un total de 5 dosis inmunizadas. (2) Se recolectó suero negativo antes de la inmunización y se realizó ELISA en la cuarta dosis para detectar el título sérico. (3) Si el título de anticuerpos séricos de la cuarta dosis cumple con los requisitos, se administrará una dosis adicional de inmunización 7 días antes de la toma de muestra de sangre. Si no cumple con los requisitos, se continuará con la inmunización de rutina. (4) Potencia calificada, las células del bazo se aíslan para la fusión celular. | 10-12 semanas |
| Paso 2: Fusión y cribado | (1) Fusión: Después de la inmunización, se recolectaron células del bazo del ratón y se fusionaron con células de mieloma. (2) Proliferación y selección: Las células de hibridoma obtenidas fueron sometidas a proliferación y selección ELISA para obtener clones altamente eficientes. | 6 semanas |
| Paso 3: Subclonar | Subclonación de 15 a 25 células madre positivas mediante el método de dilución limitada, y finalmente determinación de 10 a 15 clones positivos. | 3-4 semanas |
| Paso 4: Producción de líquido ascítico y purificación de anticuerpos | (1) Producción de ascitis: se utilizan de 10 a 15 cepas de hibridoma para la producción de ascitis en ratones (si se obtiene un gran número de cepas de hibridoma, se enviarán en forma celular). (2) Identificación de ascitis: Detección de ascitis mediante ELISA, potencia (proteína/virus > 10 ^ 5, molécula pequeña/péptido > 10 ^ 4) para purificación posterior. (3) Purificación de la proteína A/G: Purificación de la ascitis | 3-4 semanas |
| Paso 5: Entrega | (1) Proporcionar de 3 a 5 cepas de hibridomas de anticuerpos monoclonales. (2) Cada célula de hibridoma proporciona 1 mg de anticuerpo purificado (purificación de ascitis). (3) Informe del proceso experimental | 1 semana |
Múltiples especies
Se puede proporcionar inmunidad a diversos animales, incluidos, entre otros, ratones, conejos, ovejas, etc.
Objetivo múltiple
Basándose en la tecnología de hibridomas, se ofrecen servicios de descubrimiento de anticuerpos dirigidos a múltiples objetivos: proteínas, péptidos, moléculas pequeñas, virus, proteínas de membrana, ARNm, etc.
Registros de trazabilidad
Estándares de control de calidad (potencia inmunitaria, control de calidad de PBMC, control de calidad de la biblioteca y control de calidad de validación de cribado), informes experimentales en inglés, registros experimentales originales
Programa personalizado
Adaptación de programas personalizados e individuales para satisfacer las necesidades de los proyectos de investigación de diversos clientes.
Servicio de desarrollo de anticuerpos monoclonales
Podemos proporcionar servicios de desarrollo de anticuerpos monoclonales de alta calidad, alta pureza y alta especificidad, incluyendo la producción de anticuerpos monoclonales de ratón y anticuerpos monoclonales de conejo.
Plataforma tecnológica de hibridomas
Incluye programas de inmunización, servicios de preparación de anticuerpos, purificación de anticuerpos, secuenciación de alto rendimiento de anticuerpos, validación de anticuerpos, etc.
Plataforma de clasificación de células B individuales
Alpha Lifetech ofrece ventajas en cuanto al tiempo de cribado y la obtención de anticuerpos de alta calidad. Proporciona diseño, síntesis y modificación de antígenos, inmunidad animal, cribado de enriquecimiento de células B individuales y secuenciación de células individuales.
Plataforma de desarrollo de anticuerpos mediante visualización de fagos
Alpha Lifetech puede proporcionar servicios técnicos para el desarrollo de anticuerpos mediante la técnica de presentación en fagos, desde la preparación de anticuerpos, la purificación de anticuerpos, la secuenciación de anticuerpos, etc.
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Introducción a la tecnología de hibridomasVIDEO
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16/07/2018 
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