Plataforma de desarrollo de anticuerpos mediante visualización de fagos
Tecnología de visualización de fagos

Flujo de trabajo de producción de anticuerpos mediante presentación de fagos
| Pasos | Contenido del servicio | Cronología |
|---|---|---|
| Paso 1: Inmunización animal | (1) Inmunización animal 4 veces, inmunización de refuerzo 1 dosis, un total de 5 dosis inmunizadas. (2) Se recolectó suero negativo antes de la inmunización y se realizó ELISA en la cuarta dosis para detectar el título sérico. (3) Si el título de anticuerpos séricos de la cuarta dosis cumple con los requisitos, se administrará una dosis adicional de inmunización 7 días antes de la toma de muestra de sangre. Si no cumple con los requisitos, se continuará con la inmunización de rutina. (4) Potencia calificada, recolección de sangre y separación de monocitos | 10 semanas |
| Paso 2: Preparación del ADNc | (1) Extracción de ARN total de PBMC (Kit de extracción de ARN) (2) Preparación de ADNc mediante RT-PCR de alta fidelidad (kit de transcripción inversa) | 1 día |
| Paso 3: Construcción de la biblioteca de anticuerpos | (1) Utilizando ADNc como plantilla, los genes se amplificaron mediante dos rondas de PCR. (2) Construcción y transformación de fagos: vector fagemídico de empalme genético, transformación por electroporación de bacterias huésped TG1, construcción de biblioteca de anticuerpos. (3) Identificación: Seleccionar aleatoriamente 24 clones, tasa de identificación positiva por PCR + tasa de inserción. (4) Preparación asistida de fagos: amplificación y purificación del fago M13. (5) Rescate de bibliotecas de visualización de fagos | 3-4 semanas |
| Paso 4: Cribado de la biblioteca de anticuerpos (3 rondas) | (1) Cribado predeterminado de 3 rondas (cribado en fase sólida): cribado de presión para eliminar los anticuerpos no específicos en la mayor medida posible. (2) Amplificación de un solo clon de bacteriófago seleccionado + expresión inducida por IPTG + detección de clones positivos mediante ELISA. (3) Todos los clones positivos fueron seleccionados para la secuenciación genética. | 4-5 semanas |
Servicios de apoyo
Podemos proporcionar diferentes servicios de construcción de bibliotecas inmunológicas basadas en animales y servicios de cribado de bibliotecas de anticuerpos naturales según las necesidades del cliente.
Objetivo múltiple
Disponemos de servicios de descubrimiento de anticuerpos dirigidos a múltiples objetivos: proteínas, péptidos, moléculas pequeñas, virus, proteínas de membrana, ARNm, etc.
Vectores múltiples
Servicio de construcción de bibliotecas personalizadas: podemos proporcionar varios vectores de bacteriófagos, incluidos PMECS, pComb3X y pCANTAB 5E, y modificarlos según las necesidades del cliente.
Plataforma madura
La capacidad de almacenamiento puede alcanzar 10 ^ 8-10 ^ 9, las tasas de inserción son todas superiores al 90%, y la afinidad de los anticuerpos obtenidos mediante cribado generalmente se encuentra en el nivel nM pM.
Servicio de desarrollo de anticuerpos monoclonales
Podemos proporcionar servicios de desarrollo de anticuerpos monoclonales de alta calidad, alta pureza y alta especificidad, incluyendo la producción de anticuerpos monoclonales de ratón y anticuerpos monoclonales de conejo.
Plataforma tecnológica de hibridomas
Incluye programas de inmunización, servicios de preparación de anticuerpos, purificación de anticuerpos, secuenciación de alto rendimiento de anticuerpos, validación de anticuerpos, etc.
Plataforma de clasificación de células B individuales
Alpha Lifetech ofrece ventajas en cuanto al tiempo de cribado y la obtención de anticuerpos de alta calidad. Proporciona diseño, síntesis y modificación de antígenos, inmunidad animal, cribado de enriquecimiento de células B individuales y secuenciación de células individuales.
Plataforma de desarrollo de anticuerpos mediante visualización de fagos
Alpha Lifetech puede proporcionar servicios técnicos para el desarrollo de anticuerpos mediante la técnica de presentación en fagos, desde la preparación de anticuerpos, la purificación de anticuerpos, la secuenciación de anticuerpos, etc.






16/07/2018 

