Introducción a las bibliotecas de anticuerpos sintetizados

La biblioteca de anticuerpos sintetizados, también conocida como biblioteca de novo, es un método sintético que utiliza técnicas como la síntesis de ADN o la presentación en fagos para diseñar y sintetizar regiones variables completas de anticuerpos, incluidas las regiones de marco y las CDR, sin depender de bibliotecas de anticuerpos vírgenes.

Una biblioteca de anticuerpos semisintéticos se crea combinando bibliotecas de anticuerpos naturales con diversidad sintética. Generalmente, implica la síntesis de oligonucleótidos de ADN para producir un conjunto de regiones determinantes de la complementariedad (CDR) diferentes, que luego se combinan con una estructura de anticuerpo constante derivada de fuentes naturales, como linfocitos B humanos o animales. La CDR sintetizada introduce diversidad en la biblioteca, lo que da como resultado anticuerpos dirigidos a una amplia gama de epítopos. La biblioteca de anticuerpos semisintéticos ofrece un equilibrio entre la diversidad natural del sistema inmunitario y la diversidad controlada que se logra mediante métodos sintéticos.

La distinción entre bibliotecas de anticuerpos vírgenes y sintéticas depende del origen de los genes de inmunoglobulina. Por otro lado, la diferencia entre una biblioteca de anticuerpos semisintetizada y una sintetizada radica en que la primera consta de segmentos de anticuerpos vírgenes, como la cadena ligera o la cadena pesada, de los cuales solo uno se sintetiza in vitro; mientras que la sintetizada se obtiene completamente mediante síntesis artificial por PCR in vitro.

Alpha Lifetech puede proporcionar

Alpha Lifetech Inc.Ofrecemos bibliotecas de anticuerpos semisintetizados y sintetizados, tanto de origen animal como humano, gracias a nuestra plataforma profesional de descubrimiento de anticuerpos. Con años de experiencia en modificación genética y construcción de bibliotecas, podemos crear bibliotecas sintetizadas capaces de producir anticuerpos sintéticos con una afinidad y especificidad superiores a las de los anticuerpos naturales.Alpha LifetechLos expertos se enorgullecen de anunciar que podemos garantizar una alta tasa de éxito en la construcción de una biblioteca de anticuerpos que contenga entre 10⁸ y 10¹⁰ clones independientes.

Alpha Lifetech Inc.Nos enorgullece ofrecer servicios integrales de construcción de bibliotecas de anticuerpos para satisfacer las diversas necesidades de investigadores de todo el mundo, incluyendo bibliotecas de anticuerpos scFv, Fab, VHH y personalizadas. Nuestro objetivo es comprender y atender las demandas de nuestros clientes y brindarles asistencia ante cualquier problema que surja en su trabajo de investigación.

Proceso de servicio de construcción de bibliotecas de anticuerpos sintetizados

Diseño
La fase de diseño implica la selección de estructuras de anticuerpos y regiones determinantes de la complementariedad (CDR) a partir de secuencias de anticuerpos o datos estructurales existentes. También se pueden diseñar anticuerpos CDR sintéticos para introducir funcionalidades específicas o mejorar las propiedades de unión.

Síntesis
El ADN sintético que codifica las secuencias de anticuerpos diseñadas, incluyendo tanto las regiones de estructura como las CDR, se sintetiza mediante métodos químicos o enzimáticos.

Asamblea
Los fragmentos de ADN sintetizados se ensamblan en vectores de expresión de anticuerpos mediante técnicas como PCR, ligación o ensamblaje de Gibson. Estos vectores pueden introducirse posteriormente en sistemas de expresión como células bacterianas, de levadura o de mamíferos para la producción de anticuerpos.

Examen y selección
Las bibliotecas de anticuerpos construidas se analizan y seleccionan mediante métodos de cribado de alto rendimiento para obtener anticuerpos con las propiedades deseadas. Esto puede incluir técnicas como la presentación en fagos, en levaduras o en ribosomas, según el formato de la biblioteca y su aplicación.

Servicio de construcción de bibliotecas de anticuerpos sintetizados

Alpha Lifetech Inc.Ofrecemos a nuestros clientes un servicio integral de diseño y síntesis de bibliotecas de anticuerpos mediante la ligación de los repertorios de genes V de cadena pesada y ligera en un vector fágico utilizando el sistema de recombinación sitio-específica Cre-lox. Esto genera un repertorio de Fabs presentados en fagos que comprende 6,5 × 10¹⁰ clones. La biblioteca produjo anticuerpos contra numerosos antígenos, algunos con afinidades nanomolares. La generación de la biblioteca de anticuerpos humanos se basa en la tecnología de presentación en fagos M13 (que se muestra en la figura siguiente).