Leave Your Message
slaid1

Bispetsiifiliste antikehade arendusplatvorm

Alpha Lifetech pakub klientidele kvaliteetseid ja kindlaid antikehade avastamise ning rekombinantsete valkude tooteid ja teenuseid.

Küsi pakkumist
01

Bispetsiifiliste antikehade arendusplatvorm

Alpha Lifetech pakub klientidele kvaliteetseid ja tagatud antikehade avastamise ning rekombinantsete valkude tooteid ja teenuseid. Suudame valmistada antikehi, millel on kõrge efektiivsus, tugev spetsiifilisus ja hea stabiilsus. Alpha Lifetechil on lai valik antikehade puhastamise instrumente ja seadmeid, mis pakuvad antikehade puhastamise teenuseid erinevatest allikatest, näiteks küüliku, lamba, kana ja hiire monoklonaalsetest antikehadest, samuti valkude A/G afiinsuspuhastusteenuseid ning antikehade eraldamise ja puhastamise teenuseid. Tuginedes antikehade avastamise platvormi, valguplatvormi jne terviklikule platvormisüsteemi konstruktsioonile, katame antikehade tootmise üles- ja allavoolu teenuseid ning pakume tehnilisi teenuseid alates antikehade valmistamisest, bispetsiifiliste antikehade puhastamisest ja antikehade eraldamisest ja puhastamisest, antikehade sekveneerimisest, antikehade valideerimisest jne, mida saab kasutada bispetsiifiliste antikehade ravis.

Monoklonaalsed antikehad viitavad ühe B-raku poolt toodetud immunoglobuliinidele, millel on antigeenide või epitoopide suhtes kõrge spetsiifilisus. Monoklonaalsete antikehade tootmine viidi algselt läbi hübridoomtehnoloogia abil hiire antikehade saamiseks. Täpsemalt, immuniseeritud hiirte põrnarakkude ja inimeste või hiirte müeloomirakkude ühendamisel moodustuvad hübridoomrakud, mis eritavad spetsiifilisi antikehi. Tekkinud hiire monoklonaalseid antikehi kasutatakse pärast puhastamist peamiselt loomkatsetes ja haiguste diagnoosimisel. Inimkeha tekitab aga immuunvastuse võõraste hiirevalkude suhtes, seega on hiire monoklonaalsete antikehade tootmise kliinilisel rakendamisel olulisi piiranguid. Hiljem kasutasid inimesed hiirtelt monoklonaalsete antikehade valmistamiseks "humaniseerimist" ja geenitehnoloogiat hiire antikehade modifitseerimiseks, et neil oleks inimese immunoglobuliini konstantne piirkond, et vähendada nende immunogeensust. Seda tüüpi antikeha tuntakse ka humaniseeritud monoklonaalse antikehana. Lisaks nimetatakse monoklonaalsete antikehade tootmist inimrakkude abil tervete inimese monoklonaalsete antikehade valmistamiseks. Monoklonaalseid antikehi kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes ja kliinilistes rakendustes. Meditsiinilistes uuringutes saab monoklonaalseid antikehi kasutada immunomodulaatoritena, terapeutilisi monoklonaalseid antikehi saab kasutada vähi keemiaravi ja viirusnakkuste raviks ning monoklonaalsete antikehade konjugaatide väljatöötamist kasutatakse peamiselt vähiravis.

Sissejuhatus bispetsiifilistesse antikehadesse

1960. aastal pakuti välja bispetsiifiliste antikehade kontseptsioon. Bispetsiifilised antikehad, tuntud ka kui bispetsiifilised monoklonaalsed antikehad, on kunstlikult sünteesitud antikehad, kasutades geenitehnoloogiat. Kunstlikult konstrueeritud antikehadena kuuluvad bispetsiifilised antikehad tavaliselt IgG alamklassi ja sisaldavad antigeeni siduvat fragmenti, mis on suunatud CD3 subühikule. Bispetsiifilistel antikehadel on kaks spetsiifilist antigeeni sidumissaiti, mis suudavad samaaegselt siduda ja ära tunda kahte erinevat antigeeni või kahte erinevat antigeeni epitoopi. Võrreldes monoklonaalsete antikehadega on bispetsiifilistel antikehadel täiendav spetsiifiline antigeeni sidumissait, millel on seega tugevam spetsiifilisus ja sihtimisvõime, mis võimaldab täpsemalt sihtida kasvajarakke ja vähendada sihtmärgivälist toksilisust. Bispetsiifilised antikehad võivad samaaegselt täita mitmeid bioloogilisi funktsioone, näiteks värbata immuunrakke, blokeerida signaaliülekande radasid ja tappa kasvajarakke otse. Varased bispetsiifilised antikehad valmistati peamiselt keemilise konjugeerimise või rakkude liitmise teel, kuid see meetod võis juhusliku kombinatsiooni ja sihtmärgi kombinatsiooni isoleerimise raskuste tõttu aeglaselt edeneda. Geenitehnoloogia pideva arenguga on välja töötatud palju uusi tehnoloogiaplatvorme, näiteks sõlmed aukudes (KIH), CrossMab, DVD Ig jne. Need platvormid lahendavad tõhusalt selliseid probleeme nagu raske ja kerge ahela mittevastavused ning parandavad bispetsiifiliste antikehade ühtlust ja saagist.
kõhulihased
Joonis 1. Lihtsustatud skemaatiline ülevaade bispetsiifiliste antikehade (bsAb) kavandatud toimemehhanismidest onkoloogilistes kliinilistes uuringutes.(Joonise allikas: Bispetsiifiliste antikehade ja antikehade konstruktide ülevaade onkoloogias ja kliinilistes väljakutsetes - ScienceDirect)

Bispetsiifiliste antikehade tootmistehnoloogia

Bispetsiifiliste antikehade tootmise peamised meetodid hõlmavad keemilist sidumist, nelja allika hübridoomi ja geenitehnoloogia abil antikehade valmistamist. Nende hulgas on keemilise sidumismeetodi puhul tegemist kahe terve IgG või kahe F(ab')2 antikeha fragmendi sidumisega bispetsiifilisteks antikehadeks, kasutades keemilisi sidumisaineid, nagu ftalimiidi ja ditioatsüülbensoehapet. See meetod on lihtne ja hõlpsasti kasutatav, kuid see võib kahjustada antigeeni sidumissaiti, vähendada antikehade aktiivsust ja sidumisaine ise on teatud määral kantserogeenne. Nelja allika hübridoomi meetod põhineb kahe erineva hübridoomi rakuliini somaatiliste rakkude liitmisel vastava hiire IgG ekspresseerimiseks. Geenitehnoloogia abil saab antikehi geneetiliselt modifitseerida, et moodustada bispetsiifilisi antikehi. Konstrueeriti kaks erinevat monoklonaalset antikeha ja kahe antikeha Fab-fragmendid või raske ahela ja kerge ahela muutuvad piirkonnad lõigati eraldi. Ristsidumisreaktsiooni või ahela rekombinatsioonitehnoloogia abil ühendati kaks fragmenti, moodustades bispetsiifilise antikeha. Kuigi geenitehnoloogia keerukus on suhteliselt suur, on see praegu bispetsiifiliste antikehade tootmise kõige sagedamini kasutatav meetod antikehade struktuuri ja funktsiooni kohandamiseks. Bispetsiifiliste antikehade disaini läbiviimisel võib kasutada antikehade ristreaktiivsuse põhimõtet, kuid antikehade ristreaktiivsus võib põhjustada mittespetsiifilisi reaktsioone, seega arvestatakse seda hoolikalt bispetsiifiliste antikehade disaini praktilisel rakendamisel, näiteks bispetsiifilise antikeharavi puhul.

Bispetsiifiliste antikehade puhastamine

Bispetsiifiliste antikehade puhastamine on protsess, mille käigus eraldatakse ja puhastatakse kõrge puhtusastmega sihtantikehasid. Mõnede lahustuvate lisandite eemaldamiseks kasutatakse kahte meetodit: tsentrifuugimist ja sügavfiltreerimist. Sihtbispetsiifilist antikeha püütakse esialgu kinni afiinsuskromatograafia abil. IgG-taoliste bispetsiifiliste antikehade puhul kasutatakse A-valgu afiinsuskromatograafiat, mitte-IgG-taoliste bispetsiifiliste antikehade puhul aga kerge ahela baasil põhinevat afiinsuskromatograafiat. Seejärel inkubeeritakse antikeha teatud aja jooksul madala pH tingimustes, mille tagajärjel viiruse ümbrise pinnal olev valgu struktuur häirub ja antikeha kaotab võime rakke nakatada. Lisandite, näiteks peremeesraku valkude (HCP), edasiseks eemaldamiseks viiakse läbi vahepealne sügavfiltreerimine. Antikehade puhtust parandatakse selliste meetodite abil nagu ioonvahetuskromatograafia ja kõik järelejäänud viirused eemaldatakse nanofiltreerimise või ultrafiltreerimise tehnikate abil. Lõpuks proov kontsentreeritakse ja asendatakse sobiva formuleerimispuhvriga.

Bispetsiifiliste antikehade tootmise teenuse töövoog

Sammud Teenuse sisu Ajajoon
Geeni süntees
Kuni kolme erineva järjestuste disainiskeemi genereerimine, rekombinantsete antikehade DNA plasmiidide de novo genereerimine
2-3 nädalat
Väikesemahuline test Bispetsiifiliste antikehavalkude tootmine → Väikesemahuline ekspressioon imetajate rakuliinides → Valideerimine SDS-PAGE abil → Seondumisanalüüs rekombinantsete valguantigeenidega ELISA abil → Kloonide võrdlus vanemlike antikehadega 5-6 nädalat
Tuvastage
Kahe esimese täispika bispetsiifilise antikeha ekspressioon → Seondumisanalüüs ELISA abil → Hiirevastaste antikehade poolt äratuntavate antikehade ELISA hindamine
1 nädal
Antikehade tootmine
Laiaulatuslik antikehade tootmine
3-4 nädalat

Meie eelised

Pakume antikehade tootmise üles- ja allavoolu teenuseid ning tehnilisi teenuseid alates antikehade ettevalmistamisest, bispetsiifiliste antikehade puhastamisest ja antikehade eraldamisest ja puhastamisest, antikehade sekveneerimisest, antikehade valideerimisest jne, mida saab kasutada bispetsiifiliste antikehade ravis.

  • dst-11

    Kõrge väljendus

    Kõrge valguekspressioon CHO rakkudes.

  • dst-12

    Stabiilne hoiustamine

    >2 nädalat seerumis temperatuuril 37 °C.

  • dst-13

    Lahustuvusprobleem puudub

    >30 mg/ml

  • dst-14

    Stabiilsed rakuliinid

    Paljude bispetsiifiliste antikehade valideerimiseks on välja töötatud palju stabiilseid rakuliine kasvaja antigeenidega

Seotud teenus

Kui teil on küsimusi, võtke meiega igal ajal ühendust.

Leave Your Message

Soovitatud teenus