Faagi kuvamise antikehade arendusplatvorm

Alpha Lifetech, kellel on laialdased projektikogemused antikehade avastamisel, suudab pakkuda kohandatud monoklonaalsete ja polüklonaalsete antikehade teenuseid mitme liigi jaoks, samuti antikehade raamatukogu koostamise ja sõeluuringu teenuseid. Alpha Lifetech suudab pakkuda klientidele kvaliteetseid antikehade ja rekombinantsete antikehade tooteid, samuti vastavaid teenuseid, et valmistada tõhusaid, väga spetsiifilisi ja stabiilseid antikehi. Kasutades kõikehõlmavaid antikehaplatvorme ja antikehade inseneritööd, pakume teenuseid, mis hõlmavad antikehade tootmist üles- ja allavoolu, sealhulgas tehnilisi teenuseid, nagu antikehade valmistamine, puhastamine, antikehade järjestamine ja valideerimine.

Alpha Lifetechil on arenenud antikehade avastamise platvorm, mis pakub klientidele mitmesuguseid teenuseid, sealhulgas loomade immuunsust, faagikuvari antikehade raamatukogu koostamist ja sõelumist, antikehade sekveneerimist, antikehade ekspressiooni, antikehade puhastamist, antikehade valideerimist ja antikehade märgistamist, mis põhineb hübridoomitehnoloogial, üksikute B-rakkude tehnoloogial, faagikuvamise tehnoloogial ja palju muud. Alpha Lifetechil on standardne tootmisliin ja lisaks antikehade valmistamise teenustele saab pakkuda ka tugiteenuseid, nagu antikehade humaniseerimine, antikehade afiinsuse küpsemine, ADC ravimite kavandamine ja arendamine ning CAR-T järgnevate järjestuste kujundamine. Samal ajal on Alpha Lifetech koostanud M13, T4 ja T7 faagikuvamise tehnoloogiaplatvormidel põhineva antikehade raamatukogu, mille salvestusmaht on kuni 10^8-10^9. Raamatukogu positiivne määr, sisestamise määr ja mitmekesisus võivad kõik ulatuda üle 90%.

Faagi kuvamistehnoloogia

Monoklonaalsete antikehade tootmine valmistati algselt hübridoomi monoklonaalsete antikehade tehnoloogia abil, et toota hiire hübridoomi monoklonaalset antikeha. Täpsemalt, immuniseeritud hiirte põrnarakkude liitmisel inimeste või hiirte müeloomirakkudega moodustuvad hübridoomirakud, mis sekreteerivad spetsiifilisi hübridoomi monoklonaalseid antikehi. Hiire monoklonaalsete antikehade humaniseeritud modifitseerimise ja antikehade geenitehnoloogia modifitseerimisega, et anda neile konstantne inimese immunoglobuliini piirkond, saab nende immunogeensust vähendada. Monoklonaalsete antikehade konstrueerimist kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes ja kliinilistes rakendustes.

Alpha Lifetech suudab pakkuda ühtseid antikehade inseneriteenuseid alates prekliinilisest uurimisprotokolli kavandamisest kuni antikehade ravimite konjugaatide (ADC) avastamise ja loomade valideerimiseni. Antikehade ravimite konjugaadid (ADC-d) võivad keemiaravi ravimeid vähirakkudesse toimetada. Pärast vähirakkudes ekspresseeritud spetsiifiliste sihtmärkidega seondumist vabastab ADC vähirakkudesse tsütotoksilisi ravimeid. Alpha Lifetech võib pakkuda klientidele ka terviklikke antikehade afiinsuse küpsemise teenuseid. Täiustatud mutatsioonide optimeerimise ja suure läbilaskevõimega faagiekraani sõelumistehnoloogia abil skriinitakse esmalt teatud afiinsusega antikehi ja seejärel viiakse sisse aminohapete mutatsioonid, et luua erinevaid variante. Seejärel hinnati kõrge afiinsusega antikehi ja skriiniti sõelumistehnikaid kasutades. Pärast mitut optimeerimis- ja struktuurianalüüsi vooru saadi lõpuks kõrgema afiinsuse ja tugevama spetsiifilisusega antikehad.

Alpha Lifetech saab koostada erinevat tüüpi antikehade faagide kuvamise teeke, sealhulgas immuunteeke, natiivseid raamatukogusid, poolsünteetilisi raamatukogusid ja sünteetilisi teeke. Antikehade raamatukogude suure võimsuse põhjal on võimalik saada väga spetsiifilisi antikehi. Võib pakkuda mitmeid fagemiidvektoreid nagu pMECS, pComb3X ja pCANTAB 5E, aga ka tüvesid nagu TG1 E. coli, XL1 Blue ja ER2738. Lisaks raamatukogu mahutavusele kuni 10^9 on raamatukogu sihtfragmentide sisestamise määr kõrge, luues piisavad tingimused kliente rahuldavate antikehade skriinimiseks. Alpha Lifetechi faagikuvamistehnoloogial põhineva antikehade valmistamise teenuse vooskeemi skeem on näidatud joonisel 1.

Joonis 1 Faagi kuvamistehnoloogial põhinevate monoklonaalsete antikehade valmistamise protsessiskeem.

Faagi kuvamise antikehade tootmise töövoog

Sammud	Teenuse sisu	Ajaskaala
1. samm: loomade immuniseerimine	(1) Loomade immuniseerimine 4 korda, revaktsineerimine 1 annus, kokku 5 immuniseeritud annust. (2) Negatiivne seerum koguti enne immuniseerimist ja ELISA viidi läbi neljanda annusega, et tuvastada seerumi tiiter. (3) Kui neljanda annuse seerumi antikehade tiiter vastab nõuetele, manustatakse 7 päeva enne verevõttu üks täiendav immuniseerimisdoos. Kui see ei vasta nõuetele, jätkatakse rutiinset immuniseerimist. (4) Kvalifitseeritud tugevus, vere kogumine ja monotsüütide eraldamine	10 nädalat
2. etapp: cDNA ettevalmistamine	(1) PBMC kogu RNA ekstraheerimine (RNA ekstraheerimise komplekt) (2) cDNA kõrge täpsusega RT-PCR valmistamine (pöördtranskriptsiooni komplekt)	1 päev
3. etapp: antikehade raamatukogu loomine	(1) Kasutades matriitsina cDNA-d, amplifitseeriti geene kahe PCR-i vooruga. (2) Faagi konstrueerimine ja transformatsioon: geeni splaissimise fagemiidi vektor, TG1 peremeesbakterite elektroporatsiooni transformatsioon, antikehade raamatukogu konstrueerimine. (3) Identifitseerimine: valige juhuslikult 24 klooni, PCR identifitseerimise positiivne määr + sisestamise määr. (4) Assisteeritud faagi valmistamine: M13 faagi amplifikatsioon+puhastamine. (5) Phage display raamatukogu päästmine	3-4 nädalat
4. etapp: antikehade raamatukogu sõeluuring (3 ringi)	(1) Vaikimisi 3-ringiline sõeluuring (tahkefaasiline sõeluuring): surveskriin, et eemaldada mittespetsiifilised antikehad võimalikult suures ulatuses. (2) Valitud ühe klooni amplifikatsiooni bakteriofaag + IPTG indutseeritud ekspressioon + positiivsete kloonide ELISA tuvastamine. (3) Kõik positiivsed kloonid valiti geenide sekveneerimiseks.	4-5 nädalat

Faagi kuvamistehnoloogia eelised

Alpha Lifetechil on rikkalik kogemus antikehade arendamise valdkonnas. Aastate jooksul on Alpha Lifetech loonud tervikliku antikehade arendusplatvormi.

Tugiteenused

Pakume erinevaid loomapõhiseid immuunraamatukogu ehitusteenuseid ja looduslike antikehade raamatukogu sõeluuringu teenuseid vastavalt kliendi vajadustele

Mitu sihtmärki

Saadaval on mitu sihtantikehade avastamise teenust: valgud, peptiidid, väikesed molekulid, viirused, membraanivalgud, mRNA jne.

Mitu vektorit

Isikupärastatud raamatukogu ehitusteenus, saame pakkuda erinevaid bakteriofaagi vektoreid, sealhulgas PMECS, pComb3X ja pCANTAB 5E, ning muuta neid vastavalt kliendi vajadustele

Küps platvorm

Säilitusmaht võib ulatuda 10 ^ 8-10 ^ 9, sisestamise määr on kõik üle 90% ja sõeluuringuga saadud antikehade afiinsus on üldiselt nM pM tasemel

Seotud TEENUS

Mitmed antikehade arendamise strateegiad

Monoklonaalsete antikehade väljatöötamise teenus

Hybridoma tehnoloogiaplatvorm

Üks B-rakkude sortimisplatvorm

Faagi kuvamise antikehade arendusplatvorm

monoklonaalsete antikehade arendamine - Alpha Lifetech

Monoklonaalsete antikehade väljatöötamise teenus

Saame pakkuda kvaliteetseid, kõrge puhtusastmega ja väga spetsiifilisi monoklonaalsete antikehade arendusteenuseid, sealhulgas hiire monoklonaalsete antikehade ja küüliku monoklonaalsete antikehade tootmist

Hybridoma tehnoloogiaplatvorm

Sealhulgas immuniseerimisprogramm, antikehade valmistamise teenused, antikehade puhastamine, antikehade suure läbilaskevõimega sekveneerimine, antikehade valideerimine jne

Üks B-rakkude sortimisplatvorm

Alpha Lifetechil on eelised sõeluuringu aja ja kvaliteetsete antikehade hankimise osas. See võib pakkuda antigeeni kujundamist, sünteesi ja modifitseerimist, loomade immuunsust, üksikute B-rakkude rikastamise skriinimist, üksikute rakkude sekveneerimist.