Faagi kuvamise antikehade arendusplatvorm

Alpha Lifetechil on ulatuslik kogemus antikehade avastamise projektides ning ta pakub kohandatud monoklonaalsete ja polüklonaalsete antikehade teenuseid mitmetele liikidele, samuti antikehade teekide loomise ja skriininguteenuseid. Alpha Lifetech pakub klientidele kvaliteetseid antikehade ja rekombinantsete antikehade tooteid ning vastavaid teenuseid tõhusate, väga spetsiifiliste ja stabiilsete antikehade valmistamiseks. Kasutades terviklikke antikehade platvorme ja antikehade inseneritööd, pakume teenuseid, mis hõlmavad antikehade tootmise ülesvoolu ja allavoolu, sealhulgas tehnilisi teenuseid, nagu antikehade ettevalmistamine, puhastamine, antikehade sekveneerimine ja valideerimine.

Alpha Lifetechil on küps antikehade avastamise platvorm, mis pakub klientidele mitmesuguseid teenuseid, sealhulgas loomade immuunsust, faagi kuvamise antikehade teeki loomist ja skriiningut, antikehade sekveneerimist, antikehade ekspressiooni, antikehade puhastamist, antikehade valideerimist ja antikehade märgistamist, mis põhineb hübridoomitehnoloogial, üksik-B-raku tehnoloogial, faagi kuvamise tehnoloogial ja palju muud. Alpha Lifetechil on standardne tootmisliin ning lisaks antikehade ettevalmistamise teenustele pakutakse ka tugiteenuseid, nagu antikehade humaniseerimine, antikehade afiinsusküpsemine, ADC ravimite disain ja arendus ning CAR-T järgnev sekventseerimine. Samal ajal on Alpha Lifetech loonud antikehade teeki, mis põhineb M13, T4 ja T7 faagi kuvamise tehnoloogiaplatvormidel, mille salvestusmaht on kuni 10^8-10^9. Teegi positiivne määr, sisestamise määr ja mitmekesisus võivad kõik ulatuda üle 90%.

Faagi kuvamise tehnoloogia

Monoklonaalsete antikehade tootmine valmistati algselt ette hübridoommonoklonaalsete antikehade tehnoloogia abil, et toota hiire hübridoommonoklonaalset antikeha. Täpsemalt, immuniseeritud hiirte põrnarakkude ja inimeste või hiirte müeloomirakkude ühendamisel moodustuvad hübridoomrakud, mis eritavad spetsiifilisi hübridoommonoklonaalseid antikehasid. Hiire monoklonaalsete antikehade humaniseeritud modifitseerimise ja antikehade geneetilise muundamise teel, et anda neile konstantne inimese immunoglobuliini piirkond, saab nende immunogeensust vähendada. Monoklonaalsete antikehade inseneritööd kasutatakse laialdaselt biomeditsiinilistes ja kliinilistes rakendustes.

Alpha Lifetech pakub terviklikke antikehade väljatöötamise teenuseid alates prekliiniliste uuringute protokolli kavandamisest kuni antikehade ja ravimikonjugaatide (ADC-de) avastamise ja loomkatsete valideerimiseni. Antikehade ja ravimikonjugaatide (ADC-de) abil saab keemiaravi ravimeid vähirakkudesse toimetada. Pärast vähirakkude pinnal ekspresseeritud spetsiifiliste sihtmärkidega seondumist vabastab ADC tsütotoksilisi ravimeid vähirakkudesse. Alpha Lifetech pakub klientidele ka ulatuslikke antikehade afiinsuse küpsemise teenuseid. Täiustatud mutatsioonide optimeerimise ja suure läbilaskevõimega faagikuvamise sõelumistehnoloogia abil skriinitakse esmalt teatud afiinsusega antikehi ja seejärel viiakse sisse aminohappemutatsioonid, et genereerida erinevaid variante. Seejärel hinnati ja skriiniti kõrge afiinsusega antikehi sõelumistehnikate abil. Pärast mitut optimeerimis- ja struktuurianalüüsi vooru saadi lõpuks suurema afiinsuse ja tugevama spetsiifilisusega antikehad.

Alpha Lifetech saab luua erinevat tüüpi antikehade faagi kuvamise teeke, sealhulgas immuunteeke, natiivseid teeke, poolsünteetilisi teeke ja sünteetilisi teeke. Tänu antikehade teekide suurele mahutavusele on võimalik saada väga spetsiifilisi antikehi. Pakutakse mitmeid faagiidvektoreid, nagu pMECS, pComb3X ja pCANTAB 5E, samuti tüvesid nagu TG1 E. coli, XL1 Blue ja ER2738. Lisaks teeki mahutavusele kuni 10^9 on ka teeki sihtfragmentide sisestamise määr kõrge, luues piisavad tingimused antikehade skriinimiseks, mis rahuldavad kliente. Alpha Lifetechi faagi kuvamise tehnoloogial põhineva antikehade ettevalmistamise teenuse vooskeem on näidatud joonisel 1.

Joonis 1. Faagi kuvamise tehnoloogial põhinevate monoklonaalsete antikehade valmistamise protsessi diagramm.

Faagi kuvamise antikehade tootmise töövoog

Sammud	Teenuse sisu	Ajajoon
1. samm: Loomade immuniseerimine	(1) Looma immuniseerimine 4 korda, revaktsineerimine 1 doosiga, kokku 5 immuniseeritud doosi. (2) Enne immuniseerimist koguti negatiivne seerum ja neljanda annusega tehti seerumi tiitri määramiseks ELISA. (3) Kui neljanda doosi seerumi antikehade tiiter vastab nõuetele, manustatakse 7 päeva enne vere võtmist üks täiendav immuniseerimisdoos. Kui see ei vasta nõuetele, jätkatakse rutiinset immuniseerimist. (4) Kvalifitseeritud tugevus, vere kogumine ja monotsüütide eraldamine	10 nädalat
2. samm: cDNA ettevalmistamine	(1) PBMC kogu-RNA ekstraheerimine (RNA ekstraheerimise komplekt) (2) cDNA kõrge täpsusega RT-PCR-i valmistamine (pöördtranskriptsioonikomplekt)	1 päev
3. samm: Antikehade teeki loomine	(1) Kasutades cDNA-d matriitsina, amplifitseeriti geene kahe PCR-vooruga. (2) Faagi konstrueerimine ja transformatsioon: geeni splaissingu fagemiidvektor, TG1 peremeesbakterite elektroporatsioonitransformatsioon, antikehade teegi konstrueerimine. (3) Identifitseerimine: Valige juhuslikult 24 klooni, PCR-i identifitseerimise positiivne määr + sisestamise määr. (4) Abistatav faagi ettevalmistamine: M13 faagi amplifikatsioon + puhastamine. (5) Faagi kuvamise teeki päästmine	3-4 nädalat
4. samm: antikehade kogu skriining (3 vooru)	(1) Vaikimisi 3-vooruline skriining (tahkefaasi skriining): surveskriining mittespetsiifiliste antikehade võimalikult suureks eemaldamiseks. (2) Üksiku klooni amplifikatsiooniga bakteriofaag valitud + IPTG indutseeritud ekspressioon + positiivsete kloonide ELISA tuvastamine. (3) Kõik positiivsed kloonid valiti geenijärjestuse määramiseks.	4-5 nädalat

Faagi kuvamise tehnoloogia eelis

Alpha Lifetechil on rikkalik kogemus antikehade väljatöötamise valdkonnas. Aastate jooksul on Alpha Lifetech loonud tervikliku antikehade arendusplatvormi.

Tugiteenused

Pakume erinevaid loompõhiste immuunkogude loomise teenuseid ja looduslike antikehade kogude skriininguteenuseid vastavalt kliendi vajadustele.

Mitme sihtmärgi

Saadaval on mitu sihtantikehade avastamise teenust: valgud, peptiidid, väikesed molekulid, viirused, membraanvalgud, mRNA jne.

Mitmed vektorid

Personaliseeritud raamatukogu loomise teenus, pakume erinevaid bakteriofaagvektoreid, sealhulgas PMECS, pComb3X ja pCANTAB 5E, ning saame neid vastavalt kliendi vajadustele modifitseerida.

Küps platvorm

Säilitamismaht võib ulatuda 10^8-10^9-ni, sisestamise määr on kõik üle 90% ja skriinimise teel saadud antikehade afiinsus on üldiselt nM pM tasemel.

Seotud TEENUS

Mitmed antikehade väljatöötamise strateegiad

Monoklonaalsete antikehade väljatöötamise teenus

Hübridoomi tehnoloogiaplatvorm

Üksikute B-rakkude sorteerimisplatvorm

Faagi kuvamise antikehade arendusplatvorm

monoklonaalsete antikehade väljatöötamine – Alpha Lifetech

Monoklonaalsete antikehade väljatöötamise teenus

Pakume kvaliteetseid, kõrge puhtusastmega ja väga spetsiifilisi monoklonaalsete antikehade arendusteenuseid, sealhulgas hiire ja küüliku monoklonaalsete antikehade tootmist.

Hübridoomi tehnoloogiaplatvorm

Sealhulgas immuniseerimisprogramm, antikehade ettevalmistamise teenused, antikehade puhastamine, antikehade suure läbilaskevõimega sekveneerimine, antikehade valideerimine jne.

Üksikute B-rakkude sorteerimisplatvorm

Alpha Lifetechil on eelised sõelumisaja ja kvaliteetsete antikehade saamise osas. See pakub antigeeni disaini, sünteesi ja modifitseerimist, loomade immuunsuse uurimist, üksikute B-rakkude rikastamise sõeluuringuid ja üksikute rakkude sekveneerimist.