Sissejuhatus sünteesitud antikehade teekidesse

Sünteesitud antikehade raamatukogu, tuntud ka kui De novo raamatukogu, on sünteetiline meetod, mis kasutab selliseid meetodeid nagu DNA süntees või faagiesitlus, et kujundada ja sünteesida täielikke antikehade muutuvaid piirkondi, sealhulgas raamistiku piirkondi ja CDR-e, ilma naiivsetele antikehade raamatukogudele tuginemata.

Poolsünteetiliste antikehade raamatukogu luuakse looduslikult esinevate antikehade raamatukogude kombineerimisel sünteetilise mitmekesisusega. Tavaliselt hõlmab see DNA oligonukleotiidide sünteesimist, et saada komplekt erinevaid komplementaarseid määravaid piirkondi (CDR), mis seejärel kombineeritakse konstantse antikeha raamistikuga, mis on tuletatud looduslikest allikatest, nagu inimese või looma B-rakud. Sünteesitud CDR toob raamatukogusse mitmekesisuse, mille tulemuseks on antikehad, mis on suunatud paljudele epitoopidele. Poolsünteetiliste antikehade raamatukogu pakub kompromissi immuunsüsteemi loomuliku mitmekesisuse ja sünteetiliste meetoditega saavutatud kontrollitud mitmekesisuse vahel.

Naiivsete ja sünteetiliste antikehade raamatukogude eristamine sõltub immunoglobuliini geenide allikast. Vahepeal seisneb poolsünteesitud ja sünteesitud antikehade raamatukogu erinevus selles, et esimene koosneb osast naiivsetest antikeha segmentidest, nagu kerge ahel või raske ahel, ja ainult üks neist sünteesitakse in vitro; samas kui sünteesitud on täielikult tuletatud kunstlikust sünteesist PCR-ga in vitro.

Alpha Lifetech suudab pakkuda

Alpha Lifetech Inc.võib pakkuda poolsünteesitud/sünteesitud antikehade raamatukogu loomadelt ja inimestelt, mis põhineb meie professionaalsel antikehade avastamise platvormil. Aastatepikkuse kogemusega geneetilise muundamise ja raamatukogude ehitamise alal saab luua sünteesitud raamatukogusid, mis on võimelised tootma sünteetilisi antikehi, mille afiinsus ja spetsiifilisus ületab looduslike antikehade võimet.Alpha Lifetecheksperdid teatavad uhkusega, et suudame tagada 10^8–10^10 sõltumatut klooni sisaldava antikehade raamatukogu ehitamise kõrge edukuse.

Alpha Lifetech Inc.pakub uhkusega kõikehõlmavaid antikehade raamatukogu ehitusteenuseid, mis vastavad ülemaailmsete teadlaste erinevatele vajadustele, sealhulgas scFv, Fab, VHH antikehad ja kohandatud raamatukogud. Meie eesmärk on mõista ja vastata erinevate klientide nõudmistele ning aidata uurimistöös tekkivate ja tekkivate probleemide lahendamisel.

Sünteesitud antikehade raamatukogude ehitusteenuse protsess

Disain
Disainifaas hõlmab antikehade raamistike ja komplementaarsust määravate piirkondade (CDR) valimist olemasolevate antikehajärjestuste või struktuuriandmete põhjal. Sünteetilisi CDR-antikehi saab kujundada ka spetsiifiliste funktsioonide juurutamiseks või seondumisomaduste parandamiseks.

Süntees
Sünteetiline DNA, mis kodeerib kavandatud antikehajärjestusi, sealhulgas nii raamistiku piirkondi kui ka CDR-e, sünteesitakse keemilisi või ensümaatilisi meetodeid kasutades.

Kokkupanek
Sünteesitud DNA fragmendid koondatakse antikeha ekspressioonivektoriteks, kasutades selliseid meetodeid nagu PCR, ligeerimine või Gibsoni kokkupanek. Neid vektoreid saab seejärel viia antikehade tootmiseks ekspressioonisüsteemidesse, nagu bakteri-, pärmi- või imetajarakud.

Sõelumine ja valik
Konstrueeritud antikehade raamatukogud skriinitakse ja selekteeritakse soovitud omadustega antikehade suhtes, kasutades suure läbilaskevõimega skriinimismeetodeid. See võib olenevalt teegi vormingust ja rakendusest hõlmata selliseid tehnikaid nagu faagi kuvamine, pärmi kuvamine või ribosoomi kuvamine.

Sünteesitud antikehade raamatukogude ehitusteenus

Alpha Lifetech Inc.pakub klientidele antikehade raamatukogude terviklikku disaini ja sünteesitud teenust, ligeerides raske ja kerge ahela V-geeni repertuaarid faagivektorisse, kasutades Cre-lox kohaspetsiifilist rekombinatsioonisüsteemi, et luua faagil kuvatavate Fab-de repertuaar, mis sisaldab 6,5 × 10^10 klooni. Raamatukogu andis Ab-sid paljude antigeenide vastu, millest mõnedel oli nanomolaarne afiinsus. Inimese antikehade raamatukogu genereerimine põhineb M13 faagi kuvamistehnoloogial (näidatud alloleval joonisel).