Sissejuhatus sünteesitud antikehade teekidesse

Sünteesitud antikehade teek, tuntud ka kui de novo teek, on sünteetiline meetod, mis kasutab DNA sünteesi või faagi kuvamise tehnikaid, et kujundada ja sünteesida täielikke antikehade varieeruvaid piirkondi, sealhulgas raamistikupiirkondi ja CDR-e, ilma et see toetuks naiivsetele antikehade teekidele.

Poolsünteetiline antikehade teek luuakse looduslikult esinevate antikehade teekide ja sünteetilise mitmekesisuse kombineerimise teel. Tavaliselt hõlmab see DNA oligonukleotiidide sünteesimist, et saada erinevate komplementaarsete määramispiirkondade (CDR) komplekt, mis seejärel kombineeritakse looduslikest allikatest, näiteks inimese või looma B-rakkudest, pärineva konstantse antikehade raamistikuga. Sünteesitud CDR toob teeki mitmekesisust, mille tulemuseks on antikehad, mis on suunatud laia epitoopide valiku vastu. Poolsünteetiline antikehade teek pakub kompromissi immuunsüsteemi loomuliku mitmekesisuse ja sünteetiliste meetoditega saavutatud kontrollitud mitmekesisuse vahel.

Naiivsete ja sünteetiliste antikehade teekide erinevus sõltub immunoglobuliini geenide allikast. Samal ajal seisneb poolsünteesitud ja sünteesitud antikehade teekide erinevus selles, et esimene koosneb osaliselt naiivsete antikehade segmentidest, näiteks kergest või raskest ahelast, ja ainult üks neist sünteesitakse in vitro; samas kui sünteesitud osa on täielikult saadud kunstliku sünteesi teel PCR-i abil in vitro.

Alpha Lifetech saab pakkuda

Alpha Lifetech Inc.Pakume oma professionaalsel antikehade avastamise platvormil põhinevat loomadelt ja inimestelt pärit poolsünteesitud/sünteesitud antikehade teeki. Tänu aastatepikkusele kogemusele geneetilise modifitseerimise ja teekide loomise alal saab luua sünteesitud teeke, mis on võimelised tootma sünteetilisi antikehi, mille afiinsus ja spetsiifilisus ületavad looduslike antikehade võimeid.Alpha LifetechiEksperdid teatavad uhkusega, et suudame garanteerida 10^8 – 10^10 sõltumatut klooni sisaldava antikehade teeki loomisel kõrge edukuse määra.

Alpha Lifetech Inc.pakub uhkusega laiaulatuslikke antikehade teekide loomise teenuseid, et rahuldada teadlaste mitmekesiseid vajadusi kogu maailmas, sealhulgas scFv, Fab, VHH antikehade ja kohandatud teeke. Meie eesmärk on mõista ja rahuldada erinevate klientide nõudmisi ning abistada uurimistöös tekkivate ja tekkivate probleemide lahendamisel.

Sünteesitud antikehade teekide ehitusteenuse protsess

Disain
Kujundusfaas hõlmab antikehade raamistike ja komplementaarsust määravate piirkondade (CDR) valimist olemasolevate antikehade järjestuste või struktuuriandmete põhjal. Sünteetilisi CDR-antikehi saab kujundada ka spetsiifiliste funktsionaalsuste lisamiseks või sidumisomaduste parandamiseks.

Süntees
Kujundatud antikehade järjestusi kodeeriv sünteetiline DNA, mis hõlmab nii raampiirkondi kui ka CDR-e, sünteesitakse keemiliste või ensümaatiliste meetodite abil.

Assamblee
Sünteesitud DNA fragmendid pannakse antikehade ekspressioonivektoriteks, kasutades selliseid tehnikaid nagu PCR, ligeerimine või Gibsoni kokkupanek. Seejärel saab neid vektoreid antikehade tootmiseks sisestada ekspressioonisüsteemidesse, näiteks bakteriaalsetesse, pärmi- või imetajarakkudesse.

Sõelumine ja valik
Loodud antikehade teeke skriinitakse ja selekteeritakse soovitud omadustega antikehade suhtes, kasutades suure läbilaskevõimega sõelumismeetodeid. See võib hõlmata selliseid tehnikaid nagu faagikuva, pärmikuva või ribosoomikuva, olenevalt teeki formaadist ja rakendusest.

Sünteesitud antikehade teekide ehitusteenus

Alpha Lifetech Inc.pakub klientidele antikehade teekide universaalset disaini ja sünteesi teenust, ligeerides raske ja kerge ahela V-geeni repertuaarid faagi vektorisse, kasutades Cre-loxi saidispetsiifilist rekombinatsioonisüsteemi, et luua faagil kuvatavate Fab-ide repertuaar, mis koosneb 6,5 × 10^10 kloonist. Teek andis antikehi arvukate antigeenide vastu, mõnedel nanomolaarse afiinsusega. Inimese antikehade teeki genereerimine põhineb M13 faagi kuvamise tehnoloogial (näidatud alloleval joonisel).