سرویس کشف آنتی‌بادی VHH آلپاکا

آلفا لایف تک می‌تواند ارائه دهد

شرکت آلفا لایف‌تک (Alpha Lifetech Inc.) به عنوان پیشرو در کشف آنتی‌بادی‌های تک‌دامنه شناخته می‌شود. شرکت آلفا لایف‌تک رویه‌های اختصاصی برای کشف نانوبادی‌ها توسعه داده است. فرآیندهای بهینه ساخت کتابخانه و غربالگری ما با فناوری نمایش فاژ، جداسازی موفقیت‌آمیز نانوبادی‌های آلپاکا با میل ترکیبی بالا را در مدت زمان کوتاهی تضمین می‌کند. ما در تولید کلون‌های مثبت متعدد برای انواع آنتی‌ژن‌ها، از مولکول‌های پروتئینی بزرگ گرفته تا هاپتن‌های کوچک، موفق بوده‌ایم. بسیاری از عوامل اتصال‌دهنده دارای میل ترکیبی زیرنانومولی هستند که با روش ELISA اندازه‌گیری می‌شود.

معرفی سرویس کشف آنتی‌بادی VHH آلپاکا

علاوه بر IgG معمولی، آلپاکا یک آنتی‌بادی عملکردی تک زنجیره‌ای تولید می‌کند که قادر به اتصال به آنتی‌ژن است و گاهی اوقات آنتی‌بادی‌های VHH نامیده می‌شوند. این آنتی‌بادی‌ها صرفاً از زنجیره‌های سنگین تشکیل شده‌اند و فاقد زنجیره‌های سبک و دامنه‌های عملکردی CH1 و CH4 هستند. این آنتی‌بادی‌های به اصطلاح زنجیره سنگین در توسعه آنتی‌بادی‌های تک دامنه‌ای استفاده می‌شوند.

ماهیت تک‌دمینه‌ای این آنتی‌بادی‌ها مزایای منحصر به فردی را ارائه می‌دهد که آنها را برای کاربردهای بیوتکنولوژی متمایز می‌کند. برخی از این مزایا عبارتند از:

الف) پایداری در دما و pH بالا.

ب) VHHها می‌توانند جایگاه‌های آنتی‌ژنی را شناسایی کنند که به‌طور معمول توسط آنتی‌بادی‌های مرسوم شناسایی نمی‌شوند.

ج) اندازه مولکولی کوچک آنها به نفوذ سریع بافت و کاربردهای برچسب‌گذاری، از جمله عبور از سد خونی-مغزی، کمک می‌کند.

د) برای تولید در مقیاس بزرگ ارزان‌تر است.

گردش کار سرویس کشف آنتی‌بادی VHH آلپاکا

مراحل	مشخصات	گاهشمار
مرحله ۱: ایمن‌سازی آلپاکا	آلپاکای خاکی و بالغ (۲۸ تا ۳۶ ماهه) ۴ تا ۷ بار واکسینه شد تیتر سرم با روش ELISA اندازه‌گیری و خون محیطی جمع‌آوری شد.	۶-۸ هفته
مرحله ۲: سنتز cDNA (مشتریان می‌توانند سلول‌ها را ارائه دهند)	استخراج RNA کل RT-PCR تکثیر PCR با پرایمرهای اختصاصی اکتین برای شناسایی کیفیت cDNA	۱ روز
مرحله ۳: ساخت کتابخانه آنتی‌بادی VHH	طراحی و سنتز پرایمر تکثیر PCR ژن‌های ناحیه متغیر پروتئین‌های سنگین با استفاده از cDNA به عنوان الگو ساخت و ترانسفورماسیون پلاسمید: پس از هضم آنزیمی، VHH و ناقل فاژمید به هم متصل شده و با شوک الکتریکی به باکتری میزبان TG1 ترانسفورم شدند تا کتابخانه‌های آنتی‌بادی ساخته شوند. شناسایی: 20 تا 50 کلون به طور تصادفی انتخاب شدند، شناسایی PCR، تعیین توالی و تجزیه و تحلیل توالی‌های آنتی‌بادی انجام شد.	۳-۴ هفته
مرحله ۴: غربالگری کتابخانه آنتی‌بادی VHH (۳ دور)	روش فشار حد آنتی‌ژنی برای ۳ دور بررسی استفاده می‌شود. شناسایی: ۹۶ کلون به طور تصادفی برای تعیین تیتر ELISA انتخاب شدند. تا ۹۶ کلون مثبت توالی‌یابی شدند و ۱۰ تا ۱۵ کلون برای تبدیل بیان پروکاریوتی انتخاب شدند. ۱۰ تا ۱۵ کلون مثبت برای ساخت مایع رویی آنتی‌بادی VHH بیان شدند.	۳-۴ هفته
تولید آنتی‌بادی VHH-Fc (اختیاری)	سنتز ژن، زیرکلون‌سازی، تهیه پلاسمید بیان گذرا و خالص‌سازی تجزیه و تحلیل کنترل کیفیت	۲ هفته
رتبه‌بندی بر اساس وابستگی (اختیاری)	میل ترکیبی اندازه‌گیری شده توسط Biacore 8K	۱ هفته
مجموع	ساخت و غربالگری کتابخانه نمایش فاژ Alpaca VHH	۶ ماه

فرآیند خدمات کشف آنتی‌بادی VHH آلپاکا

آلفا لایف‌تک می‌تواند خدمات کشف آنتی‌بادی VHH، شامل خدمات ساخت کتابخانه آنتی‌بادی VHH و خدمات غربالگری کتابخانه آنتی‌بادی VHH را ارائه دهد. دستاوردهای آلفا لایف‌تک: